γ-GLUTAMIL TRANSPEPTIDASA (Szasz)

Reactivo líquido para la determinación fotométrica de

γ−GT en suero.

Para uso en el diagnóstico in Vitro. Apto para usar en autoanalizador.

SIGNIFICANCIA CLINICA MATERIAL NECESARIO NO INCLUIDO

La enzima γ-GT forma parte del grupo de las llamadas peptidasas. Su Espectrofotómetro manual o automático o fotocolorímetro de filtros
función es catalizar la transferencia del grupo γ-glutamil desde un con cubeta termoestable, capaz de medir absorbancia a 405 nm, baño
péptido a otro. termoregulado, cronómetro, pipetas, calibrador y sueros controles.

A pesar de que la mayor concentración de γ-GT se encuentra localizada TECNICA

en el riñón, la mayor fuente de la enzima presente en el suero es el
Llevar el reactivo a la temperatura que se realizará el ensayo (30° ó 37°
hígado. Niveles elevados de γ-GT se encuentran asociados a
C.). Las pipetas a utilizar deben estar limpias y libres de residuos para no
enfermedades hepatobiliares y pancreáticas; alcohólicos, en
contaminar el reactivo.
enfermedades al miocardio y en los diabéticos.
Calibrador Muestra
FUNDAMENTOS DEL METODO
Muestra (mL) -- 0.05
El método VALTEK® se basa en la proposición de Szasz y la modificación Calibrador (mL) 0.05 --
efectuada por Rosalki, utilizando un sustrato sintético, γ-glutamil-p- Reactivo de trabajo (mL) 1.00 1.00
nitroanilida (GGPNA) y glicilglicina como activador.
Mezclar e incubar por 30 segundos. Leer las absorbancias inicial
- ajustando a cero el espectrofotómetro contra blanco de agua y repetir
GGPNA + glicilglicina γ GT > p-NA + γ-G-glicilglicina la lectura a intervalos de 60 segundos por los próximos 3 minutos.

La γ-GT cataliza la transferencia del grupo γ-glutamil desde el sustrato Adaptaciones para la aplicación de este reactivo en autoanalizadores
GGPNA a la glicilglicina. La velocidad de liberación de la p-nitroanilida es están disponibles a solicitud. Es responsabilidad del laboratorio validar
directamente proporcional a la actividad de la γ-GT en la muestra, y se esta aplicación.
cuantifica midiendo el aumento de la absorbancia a 405 nm.
CALIBRACION
REACTIVOS • En la calibración se recomienda utilizar calibrador sérico VALTROL-
C (código 210-130), proceder de igual forma que con las muestras.
Conservados entre 2° y 8°C. y protegidos de la luz, estables hasta la • Se recomienda recalibrar en cualquier momento que se evidencie
fecha de caducidad indicada en la etiqueta. alguno de estos acontecimientos:
• El lote de reactivo cambia
Composición de los Reactivos:
• Se realiza un mantenimiento preventivo del equipo
Reactivo 1: • Los valores de control han cambiado o se encuentran fuera
Glicilglicina 150 mM de escala.
Buffer TRIS (pH 8,2±0,1) 120 mM
CALCULOS
Estabilizantes y preservantes c.s.
Determine el cambio de Absorbancia por minuto (∆A/min) tanto para el
Reactivo 2: calibrador como para las muestras.
Buffer Acetato (pH 4,8±0,1) 50 mM
γ-Glutamil-p-nitroanilida 4,00 mM Factor = Concentración Calibrador
Abs. Calibrador
Preparación del Reactivo de Trabajo: Mezclar 1 mL. de Reactivo 1 con γ-GT (UI/l)= Factor x Abs. Muestra
200 ul. de Reactivo 2 o preparar el volumen requerido manteniendo la
proporción. O bien se puede utilizar el siguiente factor:
Estabilidad del reactivo de trabajo: 3 días entre 2° y 8°C.
Descartar el reactivo si su absorbancia es mayor de 0,85 O.D. a 405 nm. Actividad γ-GT (UI/l )= ∆ Abs/min x 2121
contra blanco de agua y paso de luz de 1 cm o presenta turbidez.
FACTOR = Vt x 1000 = 2121
MUESTRA ∑p-NA 405 x P x Vm

Utilizar suero fresco. Los anticoagulantes, particularmente el fluoruro, Vt= Volumen total de reacción
citrato y oxalato, inhiben la actividad de la γ-GT. ∑p-NA 405= Coef. de extinción molar de la p-NA a 405 nm
La γ-GT es estable por 8 horas a temperatura ambiente, 3 días entre 2° y P= Espesor del paso de luz en la cubeta
8°C y una semana a -20°C. Vm= Volumen de muestra

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CONTROL DE CALIDAD

• Es conveniente analizar junto con las muestras sueros controles -Repetibilidad intraserie: n=20
valorados para γ-glutamil transpeptidasa por este método. Se
recomienda la utilización de los sueros controles VALTROL-N Nivel Media (U/L) C.V.
(código 210-100) y VALTROL-P (código 210-110). Normal 40 1,51%
• Si los valores obtenidos para los controles se encuentran fuera del Patológico 177 1,75%
rango de tolerancia, revisar el instrumento, el reactivo y el
calibrador. -Reproducibilidad interserie: n=20
• Cada laboratorio debe disponer de su propio Control de Calidad y
establecer las correcciones necesarias en caso de que no se Nivel Media (U/L) C.V.
cumpla con las tolerancias permitidas para los controles. Normal 40 2,47 %
Patológico 175 1,68%
ADVERTENCIAS Y MEDIDAS DE PRECAUCION
Estos datos han sido obtenidos utilizando un autoanalizador MINDRAY
• Los volúmenes indicados pueden ser alterados proporcionalmente de la serie BS. Los resultados pueden variar al cambiar de instrumento o
sin alterar los resultados. al realizar el procedimiento manualmente.
• Las drogas anticonvulsivas pueden elevar falsamente los valores
de la γ-GT. -Certificado de Conformidad y Trazabilidad disponible a solicitud
• Los rangos normales deben informarse de acuerdo a la
temperatura a la cual se realiza el ensayo. RANGOS DE REFERENCIA
• Consultar en nuestra página WEB la ficha de seguridad de este
reactivo y observar todas las medidas de precaución necesarias Cada laboratorio debe establecer sus propios rangos de referencia en
para la manipulación y eliminación de residuos. función de la población de pacientes. Los rangos de referencia que se
enumeran a continuación están tomados de la bibliografía existente.
• Contiene Azida de Sodio 0.05% (Nº CAS 26628-22-8) No peligroso
a esta concentración. No ingerir. En contacto con metales
pesados, como tuberías de cobre o plomo, podría formar azida Temperatura medición 25°C 30°C 37°C
metal que es explosiva, elimine los residuos con grandes Hombres (UI/L) 5 a 25 7 a 34 10 a 45
volúmenes de agua y/o de conformidad con las regulaciones Mujeres (UI/L) 4 a 16 6 a 22 7 a 32
locales.
• En autoanalizadores debe utilizarse contenedores de reactivos PRESENTACIONES DISPONIBLES
nuevos.
CODIGO CONTENIDO
ESPECIFICACIONES DE DESEMPEÑO 107-150 Reactivo 1 3 x 50 mL
Reactivo 2 1 x 31 mL
-Linealidad: hasta 400 U/L. 300140 Reactivo 1 4 x 40 mL
Para valores superiores 400 U/L, diluir la muestra con suero fisiológico y Reactivo 2 2 x 16 mL
el resultado obtenido se multiplica por el factor de dilución. 200140 Reactivo 1 4 x 40 mL
Reactivo 2 2 x 16 mL
-Límite de detección: 2 U/L.
BIBLIOGRAFIA
- Sensibilidad analítica: 1 mg/dL = 0.0004 ∆A/min
1. Tietz, N.W., Fundamentals of Clinical Chemistry, 2nd Ed.,
-Interferencias: Hemoglobina sobre 0,5 gr/dL, bilirrubina sobre 10 W.B.Saunders, Philadelphia, PA., 1976.
mg/dL y la lipemia (triglicéridos sobre 400 mg/dL) podrían interferir en 2. Szasz, G., Clin. Chem. 15 (24), 1969.
la técnica. Otros medicamentos y sustancias podrían interferir (6). 3. Rosalki, S.B., et al., Ann. Clin. Biochem. 7(143), 1970.
4. Young, D.S., et al., Clin. Chem. 20(10), 1975.
-Exactitud: Los reactivos VALTEK no muestran diferencias sistemáticas 5. Rosalki, S.B., et al., Clin. Chem. 20(1121), 1974.
significativas cuando se comparan con otros reactivos comerciales. Los 6. Young D.S., effects of drugs on clinical laboratory tests,
detalles del estudio comparativo están disponibles bajo solicitud. 4th ed. AACC Press,1995.

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