MONOCAPA

DISEÑO DE UNA MONOCAPA PARA RECUBRIMIENTOS CON MATERIAL W-
DLC Y Si-DLC EN APLICACIONES BIOMÉDICAS
FABIÁN ALEJANDRO LERMA CAICEDO

GERMÁN FELIPE PLAZAS GUTIÉRREZ
UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE OCCIDENTE

FACULTAD DE INGENIERÍA
PROGRAMA DE INGENIERÍA BIOMÉDICA
SANTIAGO DE CALI
2010
DISEÑO DE UNA MONOCAPA PARA RECUBRIMIENTOS CON MATERIAL W-
DLC Y Si-DLC EN APLICACIONES BIOMÉDICAS
FABIÁN ALEJANDRO LERMA CAICEDO

GERMÁN FELIPE PLAZAS GUTIÉRREZ
Trabajo de Grado para optar al título de

Ingeniero Biomédico
Director
FARUK FONTHAL RICO
Ingeniero Electrónico
Ph.D
UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE OCCIDENTE

FACULTAD DE INGENIERÍA
PROGRAMA DE INGENIERÍA BIOMÉDICA
SANTIAGO DE CALI
2010
Nota de aceptación:
Aprobado por el comité de grado

en cumplimiento de los requisitos
exigidos por la Universidad
Autónoma de Occidente para
optar al título de Ingeniero
Biomédico.
Dra. Paola Andrea Neuta A._____

Jurado
Dra. Adriana Gómez Gómez_____

Jurado
Santiago de Cali, 16 de julio de 2010
3
A nuestras familias por su paciencia y apoyo constante.
4
AGRADECIMIENTOS
Los autores expresan sus agradecimientos a:
Doctor Faruk Fonthal Rico, Ingeniero Electrónico de la Universidad Autónoma de

Occidente, Director del Grupo de Investigación de Materiales Avanzados para
Micro y Nano Tecnología IMAMNT de la Universidad Autónoma de Occidente y
Director del Trabajo de Grado.
Doctor Carlos Alberto Rincón López, Doctor en Física de la Universidad del Valle,
integrante del Grupo de Investigación de Física de Bajas Temperaturas
FISBATEM de la Universidad del Cauca.
Doctora Clara Eugenia Goyés López, Doctora en Ingeniera de Materiales de la

Universidad del Valle, integrante del Grupo de Investigación de Materiales
Avanzados para Micro y Nano Tecnología IMAMNT de la Universidad Autónoma
de Occidente, Codirectora del Trabajo de Grado.
Doctora Paola Andrea Neuta Arciniegas, Bacterióloga de la Universidad del Valle,

Directora del Programa de Ingeniería Biomédica de la Universidad Autónoma de
Occidente.
Señora Jennifer Lucumí Vargas, Laboratorista Clínico de la Universidad del Valle,

encargada del Laboratorio de Ciencias Biomédicas de la Universidad Autónoma
de Occidente.
Señora Diana Marcela Ordóñez Gómez, Bióloga de la Universidad del Valle,

Investigadora del Laboratorio de Bioprocesos de la Universidad Autónoma de
Occidente.
Doctor Federico Sequeda, Doctor en Ingeniería de Materiales, profesor de la

Universidad del Valle, Director del Grupo de Investigación en Recubrimientos
Duros y Aplicaciones Industriales.
Ingeniero Michel Felipe Cano Ordóñez, Ingeniero de Materiales, auxiliar del

Laboratorio de Recubrimientos Duros y Aplicaciones Industriales de la Universidad
del Valle.
5
CONTENIDO
pág.
GLOSARIO 15
RESUMEN 21
INTRODUCCIÓN 23
1. PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA 28

2. JUSTIFICACIÓN 31
3. ANTECEDENTES 33
4. PROCESO DE PULVERIZACIÓN CATÓDICA (SPUTTERING) 38

4.1. PACVD (Plasma Assisted Chemical Vapor Deposition) 39
4.2. PAPVD (Plasma Assisted Physical Vapor Deposition) 40
5. RECUBRIMIENTOS DUROS 41
5.1. RECUBRIMIENTOS DE W-DLC 42
5.2. RECUBRIMIENTOS DE Si-DLC 42
5.3. RECUBRIMIENTOS DE DIAMANTE TIPO CARBONO (DLC) 43
5.4. RECUBRIMIENTOS DE TITANIO-Ti 47
6. PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL, TÉCNICAS PARA

CARACTERIZAR LOS RECUBRIMIENTOS Y DIAGNÓSTICO
49
CITOTÓXICO
6.1. TÉCNICAS PARA CARACTERIZAR LOS RECUBRIMIENTOS 49
6.2. RESUMEN DE PROCESOS REALIZADOS 50
6.3. PREPARACIÓN DEL SUSTRATO 50
6.3.1. Corte y preparación de sustrato de AISI-316 50
6.3.2. Caracterización metalográfica de sustrato de AISI-316 52
6.3.3. Esterilización e introducción de sustratos AISI-316 en material
53
baquelita
6
6.3.4. Toma de durezas tipo rockwell B y C a sustrato de AISI-316 54
6.3.5. Procedimiento experimental para la realización de monocapas
55
de Si-DLC y W-DLC
6.3.5.1. Equipo para la producción de los recubrimientos 56
6.3.6. Espectroscopía raman 57
6.3.7. Pin on disc y profilometría 59
6.3.8. Nanoindentación 60
6.4. TÉCNICAS PARA EL DIAGNÓSTICO CITOTÓXICO 62
6.4.1. Viabilidad Celular 62
7. ANÁLISIS Y RESULTADOS 66
7.1. CARACTERIZACIÓN DEL SUSTRATO DE AISI-316 66
7.1.1. Análisis metalográfico 66
7.1.2. Análisis de dureza tipo rockwell B y C 68
7.2. CARACTERIZACIÓN DE LAS PELÍCULAS EN MONOCAPAS 69
7.2.1. Caracterización de las películas en monocapa de Si-DLC y W-
DLC 69
7.2.1.1. Análisis por espectroscopía raman 70
7.2.1.1.1. Interpretación de picos raman en recubrimiento de Si-DLC 71
7.2.1.1.2. Interpretación de picos raman en recubrimiento de W-DLC 73
7.2.1.2. Análisis por pin on disc y profilometría 74
7.2.1.3. Análisis por nanoindentación 86
7.2.1.4. Análisis por citotoxicidad 89
8. CONCLUSIONES 97
9. RECOMENDACIONES 100
PONENCIAS 103
GRUPOS DE INVESTIGACIÓN 104
BIBLIOGRAFÍA 105
ANEXOS 112
7
LISTA DE CUADROS
pág.
Cuadro 1. Formas moleculares de la estructura del carbono 44
Cuadro 2. Comparación de algunas propiedades del diamante, el grafito y

del carbón amorfo hidrogenado y no hidrogenado 47
Cuadro 3. Resumen de los procesos de preparación del sustrato,

recubrimiento y su caracterización 50
Cuadro 4. Parámetros de medición para dureza rockwell B y C. 54

Cuadro 5. Matriz experimental de las condiciones de deposición 55
Cuadro 6. Parámetros de medición de espectros raman para películas de Si-
DLC y W-DLC 58
Cuadro 7. Parámetros empleados para la realización de la técnica de pin on

disc 60
Cuadro 8. Parámetros de carga empleados en nanoindentación 62

Cuadro 9. Dureza Rockwell tipo B 68
Cuadro 10. Dureza Rockwell tipo C 68
Cuadro 11. Tasa de desgaste pin indentador Al2O3 6 mm diámetro 85
Cuadro 12. Tasa de desgaste pin indentador WC-Co 6 mm diámetro 85
Cuadro 13. Espesores calculados por rata de deposición para las películas
de W-DLC y Si-DLC 87
Cuadro 14. Comparación de tasa de desgaste, dureza y módulo de

elasticidad de las películas de Si-DLC y W-DLC teniendo en cuenta el pin
indentador utilizado 88
Cuadro 15. Matriz experimental de conteo celular (linfocitos) 89

Cuadro 16. Estadística de linfocitos viables en periodos de 24 horas
expuestos a contacto físico con los materiales a evaluar 92
Cuadro 17. Estadística de linfocitos no viables en periodos de 24 horas 90
8
expuestos a contacto físico con los materiales a evaluar
Cuadro 18. Cuadro comparativo para determinación de viabilidad celular 91

Cuadro 19. Cotejo muestras 1 y 2 vs. controles 91
Cuadro 20. Cotejo muestras 1 vs. muestra 2 93
9
LISTA DE FIGURAS
pág.
Figura 1. Proceso de creación de películas delgadas. 38
Figura 2. Esquema de las posibles hibridaciones del carbón, (a) sp1, (b) sp2
y (c) sp3 44
Figura 3. Estructura molecular del diamante 45
Figura 4. Estructura molecular del grafito 46
Figura 5. Proceso de preparación de sustrato de AISI-316 (A), corte de

sustratos (B), sustratos después de pulido mecánico por medio de lijas desde
80 hasta 1200 (C), pulido tipo espejo por medio de paños (D), sustrato con
efecto tipo espejo superficial (E) y esterilización de sustrato con alcohol
isopropílico (F) 51
Figura 6. Solución de Agua Regia 52
Figura 7. Probetas sumergidas en alcohol isopropílico (A) y Equipo de

lavado por ultrasonido COLE PARMER 8890 (B) 53
Figura 8. Máquina montadora de probetas BUEHLER (A) y Probetas de

AISI-316 en molde de baquelita (B) 53
Figura 9. Durómetro BUEHLER para mediciones tipo rockwell (A) y Sustrato

de AISI-316, con marcas realizadas por equipo de dureza rockwell B y C (B) 54
Figura 10. Microdurómetro BUEHLER (A) y Microscopio óptico OLYMPUS

(B) 55
Figura 11. Equipo de deposición - Sputtering R.F. 56
Figura 12. Cámara de vacío sputtering RF (A) y Proceso de generación de

plasma y deposición de películas (B) 56
Figura 13. Equipo para análisis de espectroscopía raman (A) y Microscopio

DIVISION equipo raman (B) 58
Figura 14. Equipo para ensayo de desgaste pin on disc (A) y Equipo para
ensayo de profilometría (B) 60
10
Figura 15. Equipo para ensayo de nanoindentación 61
Figura 16. Preparación de paciente para venopunción (A), Extracción de

sangre por venopunción (B), Tubos al vacío con sangre periférica (C) y
Micropipetas de 100µl y 1000µl 63
Figura 17. Equipo de centrifugación UNIVERSAL 32 R (A) y Base rotatoria

para centrifugación de equipo UNIVERSAL 32 R (B) 64
Figura 18. Tubos de eppendorf con polvo de azul de tripán (A) y Cajas de
ensayo con fosfatos (B) 64
Figura 19. Separación centrifugada (A), Tubo de ensayo después de

segundo lavado de linfocitos (B), Preparación de antibióticos (C), Mezcla de
linfocitos con antibióticos y RPMI, introducción de linfocitos en cámara de
CO2 y extracción de linfocitos para conteo 65
Figura 20. Análisis metalográfico de tres sustratos de AISI-316 a una

resolución de 200X de aumento 66
Figura 21. Análisis metalográfico de tres sustratos de AISI-316 a una

resolución de 500 X de aumento 67
Figura 22. Recubrimiento de W-DLC, sobre sustratos de vidrio y AISI-316

con baja adherencia película sustrato (A), Sustrato de AISI-316 con película
(interlayer Ti) de titanio (B), Sustrato AISI-316 con monocapa de Ti/W-DLC
(C) y Sustrato AISI-316 con monocapa de Ti/Si-DLC (D) 69
Figura 23. Sustrato N° 1, Espectro Raman película de Si-DLC 70
Figura 26. Sustrato N° 4, Espectro Raman película de W-DLC 72
Figura 29. Curva de rugosidad promedio para la película de Si-DLC 74
Figura 30. Curva de rugosidad promedio para la película de W-DLC 75
Figura 31. Comparación de los coeficientes de fricción en función de la

distancia de deslizamiento para AISI-316, W-DLC y Si-DLC utilizando pin
indentador de Al2O3 en un recorrido de 50m con una carga transversal de 1N 76
11
Figura 32. Comparación de los coeficientes de fricción en función de la
distancia de deslizamiento para AISI-316, W-DLC y Si-DLC utilizando pin
indentador de WC-Co en un recorrido de 50m con una carga transversal de
1N 76
Figura 33. Profundidad de surco generado al sustrato de AISI-316, con pin

indentador de Al2O3, a una distancia de recorrido de 50m y carga transversal
de 1N (A) e imagen tomada del surco a 100X (B) 78
Figura 34. Profundidad de surco generado a la película de Si-DLC, con pin
de 1N (A), imagen tomada del surco de Si-DLC a 100X (B) e imagen tomada
del surco de Si-DLC a 500X (C) 79
Figura 35. Profundidad de surco generado a la película de W-DLC, con pin

de 1N (A), imagen tomada del surco de W-DLC a 100X (B) e imagen tomada
del surco de W-DLC a 500X (C) 80
Figura 36. Profundidad de surco generado al sustrato de AISI-316, con pin

indentador de WC-Co, a una distancia de recorrido de 50m y carga
transversal de 1N (A) e imagen tomada del surco de AISI-316 a 100X (B) 81
Figura 37. Profundidad de surco generado a la película de Si-DLC, con pin
transversal de 1N (A), imagen tomada del surco de Si-DLC a 100X (B) e
imagen tomada del surco de Si-DLC a 500X (C) 82
Figura 38. Profundidad de surco generado a la película de W-DLC, con pin

transversal de 1N (A), imagen tomada del surco de W-DLC a 100X e imagen
tomada del surco de W-DLC a 500X (C) 83
Figura 39. Comparación entre surcos generados al sustrato de AISI-316,

películas delgadas de W-DLC y Si-DLC, con pin indentador de Al2O3, a una
distancia de recorrido de 50m y carga transversal de 1N 84
Figura 40. Comparación directa entre surcos generados al sustrato de AISI-

316, películas delgadas de W-DLC y Si-DLC, con pin indentador de WC-Co,
a una distancia de recorrido de 50m y carga transversal de 1N 84
Figura 41. Tasa comparativa, desgaste de películas Si-DLC y W-DLC entre

pin indentador Al2O3 y WC-Co 86
Figura 42. Espesor de las películas de Si-DLC y W-DLC 87
12
Figura 43. Matriz de conteo cámara de newbauer (A) y (B), Linfocitos viables
en 3 días de conteo celular (C), (D) y (E), Linfocito viable y no viable (F) y
Linfocitos no viables (G) 89
Figura 44. Control positivo Titanio (A), control positivo AISI-316 (B) y control
negativo Hierro (C) 91
Figura 45. Curvas porcentuales de linfocitos viables expuestos a materiales

durante 3 días 92
Figura 46. Curvas porcentuales de linfocitos no viables expuestos a

materiales durante 3 días 93
Figura 47. Barras de comparación para determinar viabilidad celular en

linfocitos expuestos a material Si-DLC y W-DLC 94
13
LISTA DE ANEXOS
pág.
Anexo A. Proceso detallado para desarrollo de recubrimientos duros de W-

DLC y Si-DLC 112
Anexo B. Formulario de consentimiento informado 114
Anexo C. Procedimiento de la técnica azul de tripán para evaluar

biocompatibilidad celular 119
Anexo D. Gráficas de conteo celular específicas para cada muestra respecto

a cada día para linfocitos no viables y viables 112
14
GLOSARIO
ACERO INOXIDABLE 316 (AISI-316): aleación de acero con un mínimo de 10%

de cromo, además otros elementos aleantes como níquel y molibdeno, es
resistente a la corrosión, dado que el cromo, u otros metales que contiene, posee
gran afinidad con el oxígeno y reacciona con él, formando una capa mitigadora,
evitando así la corrosión del hierro.
ADHERENCIA: propiedad de los materiales para conservar una interacción entre

superficies del sistema.
RPMI: es un medio de cultivo celular.
ALTERACIONES MECÁNICAS: es la modificación de las propiedades mecánicas

de los materiales sin producir cambios en su composición química o en su
composición mineral.
ALTERACIONES TRAUMÁTICAS: son el tipo de alteraciones de índole fisiológico

que pueden llegar a presentarse en un paciente tales como: fracturas, esguinces,
luxaciones, patología mecánica, lumbalgia, hernia discal, enfermedades de los
huesos, fibromialgia, esclerosis múltiple, osteoporosis, artrosis y artritis.
ÁNODO: electrodo positivo de una celda electrolítica hacia el que se dirigen

los iones negativos (Aniones) dentro de un sistema.
ARGÓN (Ar-): gas inerte que se usa frecuentemente para la limpieza y activación
con plasma-ionización, pues no puede entrar en ninguna reacción con el sustrato;
pero si es apto para la abrasión de impurezas.
AZUL DE TRIPÁN: indicador o colorante implementado en procesos de

evaluación de biocompatibilidad con técnicas de viabilidad celular.
RUGOSIDAD SUPERFICIAL: parámetro de medición de irregularidades

superficiales; del acabado final y la textura del elemento; esta es de gran
importancia e influencia para definir la capacidad de desgaste, lubricación,
resistencia a la fatiga y aspecto externo de un material.
BIOCOMPATIBILIDAD: propiedad de los materiales para interactuar con un

medio fisiológico, sin generar alteraciones o una respuesta inmunológica.
BIOFUNCIONABILIDAD: capacidad de los materiales para incorporarse en un

medio fisiológico como parte del mismo cumpliendo una determinada función.
15
BIOMATERIAL: material diseñado para ser implantado o incorporado dentro de
un sistema vivo, con el objeto de sustituir o regenerar tejidos vivientes y sus
funciones.
BOMBA TURBOMOLECULAR: bomba para presiones finales extremadamente

bajas que consiste en una serie consecutiva de estatores y rotores. En sistemas
de plasma las turbo-bombas se usan siempre y cuando se requieran presiones
muy bajas, las cuales no son posibles de generar con otro tipo de bombas de
vacío.
CÁMARA DE SPUTTERING: cámara de plasma o cámara de tratamiento que se

encuentra herméticamente al vacío para procesos de generación de plasma de
baja presión.
CÁTODO: electrodo negativo de una celda electrolítica hacia el cual son dirigidos
los iones positivos (Cationes) dentro de un sistema.
CHEMICAL VAPOR DEPOSITION (CVD): proceso que permite la evaporación

química de materiales sobre superficies involucrando algún tipo de plasma,
partiendo de determinados gases precursores que reaccionan por medio de una
activación térmica y una excitación eléctrica.
DEBRIS: impureza de material que se genera en el ensayo de tribología pin on

disc; al hacer contacto físico la bola indentadora con la superficie del
recubrimiento.
DELAMINACIÓN: proceso por el que una capa superficial se desprende del

material base, debido a una baja interacción entre los enlaces de las interfaces del
material.
DEPOSICIÓN: proceso con el cual se implantan partículas de un material blanco

sobre la superficie de un material base por medio de efectos iónicos, físicos y
químicos.
DESGASTE: proceso en el cual las capas superficiales de un sólido se deterioran

a causa de distintos efectos físico-químicos, al igual que la fricción, el desgaste no
es solamente una propiedad del material, es una respuesta integral del sistema.
DESGASTE ABRASIVO: fricción o rozamiento que producen partículas sólidas

sobre una superficie, desgastándola
DESGASTE CORROSIVO: efecto físico-químico que genera deterioro sobre un

material por lo general metálico, en consecuencia de un ataque electroquímico.
16
Otros materiales no metálicos también sufren corrosión mediante otros
mecanismos.
DIAMOND LIKE CARBON (DLC): material amorfo de características similares al

diamante, cuya estructura contiene enlaces de tipo sp3.
DISPOSITIVOS DE SUJECIÓN: dispositivos ortopédicos adaptados al cuerpo

para realizar sujeción en diferentes puntos de una estructura ósea, haciendo que
esta se mantenga firme y en posición adecuada para su correcta reconstrucción.
DOPAJE DE MATERIALES: proceso físico o químico, mediante el cual se realiza

la implantación de un material sobre otro.
DUREZA: propiedad mecánica de los materiales que consiste en la dificultad que

existe para rayar o crear marcas en la superficie mediante micropenetración.
ENLACES SP2/SP3: conexiones químicas que definen la estructura morfológica de

un material de características amorfas.
ESFUERZO MECÁNICO: efecto ejercido por una fuerza o carga en la superficie

de un material.
ESTRUCTURAS CRISTALINAS: modelo ordenado y repetitivo de las partículas

(átomos, iones) que conforman la estructura de un material en forma de red
simétrica.
EVAPORACIÓN DE MATERIALES: se generan mediante colisiones que aceleran

los iones del material blanco en el vacío, dicha evaporación genera plasma por
efecto térmico de transmisión de energía entre iones.
FRICCIÓN: resistencia al movimiento durante el deslizamiento o rodamiento que

experimenta un cuerpo sólido al moverse sobre otro con el cual está en contacto,
dicha resistencia depende de las características de la superficie.
GAS DOPANTE: elemento que se combina en un proceso físico-químico

generando radicales libres, los cuales bombardean la superficie del material
blanco desprendiendo de su superficie átomos por el método de transmisión de
energía.
GENERADOR: unidad que suministra tensión de excitación para la generación de

plasmas. De acuerdo con la frecuencia de la tensión alterna generada, se
diferencian generadores LF (40kHz), generadores RF (13,56/27,12kHz) y
generadores de micro-ondas (2,45GHz).
17
GRIETAS SUPERFICIALES: son fallas que se presentan en la estructura del
material; también llamadas discontinuidades superficiales.
IMPEDANCIA ELECTROQUÍMICA: ensayo con el cual se mide la resistencia de

materiales metálicos, a la descomposición originada por procesos electroquímicos
(Corrosión, oxidación).
IMPLANTES ARTICULARES: dispositivo ortopédico de carácter permanente o

parcial que entra en contacto con el medio fisiológico.
LUBRICACIÓN: introducción de una capa intermedia de un material ajeno entre

las superficies en contacto cuya función es disminuir la fricción y el desgaste,
pueden ser de naturaleza líquida, sólida, gaseosa e incluso pastosa.
MAGNETRÓN: tubo electrónico especial para la generación de micro-ondas.
METALOGRAFÍA: ensayo químico que evalúa la composición y estado de fases

de los metales.
METANO (CH4): gas natural de naturaleza reactiva, utilizado como medio de

evaporación o desprendimiento de electrones para deposición.
MODIFICACIONES SUPERFICIALES FÍSICAS: cambio de la composición física

de una superficie, dicha modificación superficial se puede lograr por medio de
procesos físicos como el tratamiento de plasma.
MODIFICACIONES SUPERFICIALES QUÍMICAS: cambio de la composición

química o de la constitución de una superficie. Una modificación de una superficie
se puede lograr por medio de procesos químicos líquidos, por medio de oxidación
o reducción.
MÓDULO DE YOUNG: relación entre el esfuerzo y la deformación de un material

que determina el valor de su elasticidad máxima antes de una ruptura.
MONOCAPA: recubrimiento en forma de película delgada compuesta por una

capa de material base.
MULTICAPA: recubrimiento en forma de película delgada compuesta por

múltiples capas de material base.
ORTESIS: Dispositivo ortopédico externo utilizado para soporte.
PLASMA ASSISTED CHEMICAL VAPOR DEPOSITION (PACVD): método usado

para la deposición de carburos y nitruros, a temperaturas más bajas (450°C y
18
500°C), de lo normal por otro tipo de técnicas muy similares de deposición asistida
por plasma.
PELÍCULAS DELGADAS: recubrimiento sobre superficies con distintos materiales

a espesores mínimos en escalas micrométricas [106] y manométricas [109].
PLASMA: elemento en fase gaseosa implementado en procesos de pulverización

de materiales de origen físico-químico.
PRÓTESIS: dispositivo ortopédico utilizado para el reemplazo de un segmento

corpóreo.
PRE-SPUTTERING: método preliminar a un proceso asistido por plasma para

tratamientos superficiales y limpieza de entornos.
PHYSICAL VAPOR DEPOSITION (PVD): proceso que permite la evaporación

física de materiales sobre superficies involucrando algún tipo de plasma, partiendo
de determinados gases precursores que reaccionan por medio de una activación
térmica y una excitación eléctrica.
RECUBRIMIENTO DURO: recubrimientos producidos por técnicas asistidas por

plasma los cuales son implementados para mejorar las propiedades superficiales y
elevar la vida útil de materiales metálicos, modificando características físicas,
mecánicas y tribológicas.
RIESGO BACTERIANO: amenaza potencial generada por la intervención de

agentes patológicos generados por un sistema biológico hacia un material
implantado.
SILICIO (Si): es un elemento químicamente inerte con propiedades mecánicas

que lo hacen biocompatibles de baja rugosidad, y coeficiente de rozamiento
mínimo.
SISTEMA DE PULVERIZACIÓN CATÓDICA (SPUTTERING): proceso físico en el

que se produce la vaporización de los átomos de un material mediante el
bombardeo de éste por iones energéticos.
SISTEMA SPUTTERING RF: sistema que proporciona las deposiciones de

distintos materiales por medio de radiofrecuencia,
SISTEMA SPUTTERING DC: sistema que proporciona las deposiciones de

distintos materiales por medio de corriente directa al blanco de deposición.
19
SUERO BOBINO FETAL (SFB): sustancia rica en componentes proteínicos que
sirve para el enriquecimiento de medios de cultivo, implementada en procesos de
separación celular.
SUSTRATO: material base que se ve expuesto a transformaciones físico-químicas

superficiales, este puede ser de tipo metálico, cerámico, polímero o compuesto.
TARGET O BLANCO: material expuesto a procesos físico-químicos para ser

evaporado y depositado sobre un sustrato.
TENACIDAD: propiedad de los materiales que hace referencia a la energía

absorbida antes de alcanzar la rotura.
TENSIÓN COMPRESIVA INTERNA: fuerzas interatómicas que se generan en una

estructura o red de los materiales, frecuentemente en modelos estructurales de
tipo amorfo, cuyas características se ajustan a las del diamante en cuanto a las
concentraciones de enlaces sp3.
TITANIO (Ti): es un material que posee alta resistencia a la corrosión, gran

resistencia mecánica a impactos y desgaste superficial.
TRIBOLOGÍA: ciencia que estudia la fricción, el desgaste y la lubricación como

elementos presentes en el contacto entre superficies sólidas.
TUNGSTENO (W): es un material muy duro y resistente a altas temperaturas se

combina con ácidos para potenciar sus propiedades mecánicas resistente a
impactos y desgaste superficial.
VIABILIDAD CELULAR: ensayo preliminar a la implementación de la técnica de

citotoxicidad, el cual evalúa la calidad de las células que estarán expuestas a un
material en prueba.
20
RESUMEN
Los recubrimientos de diamante tipo carbono (DLC) son de gran interés para la
comunidad científica, ya que ofrecen propiedades que son implementadas dentro
del campo industrial, con el objetivo de incrementar el rendimiento en cuanto a
producción y disminuir el daño de piezas a partir del desgaste superficial. El DLC
es un material amorfo muy similar al diamante en cuanto a propiedades de dureza,
coeficiente de fricción entre otras y se forma a partir de una hibridación que
depende de la concentración de enlaces sp3. Actualmente se implementa el
diamante tipo carbono como medio de protección y capa antidesgaste para casi
cualquier sistema que relacione algún tipo de contacto entre superficies, este
material se comporta como un lubricante seco que potencia las propiedades
tribológicas y mecánicas del sustrato al cual se adhiere. Muchas veces se ha
trabajado la deposición de material DLC sobre sustratos metálicos para fortalecer
otro tipo de recubrimientos como Ti, TiN, WC, Si, aprovechando que es un
material muy versátil y flexible respecto a la recepción de elementos dopantes;
también se sabe de recubrimientos de DLC sobre cuchillas para máquinas de
corte, las cuales mejoran su rendimiento y tiempo de vida útil. El presente
proyecto tiene como objeto, mejorar las propiedades superficiales de un sustrato
de AISI-316, depositando recubrimientos duros de W-DLC y Si-DLC para
aplicaciones biomédicas.
En este estudio se crecieron monocapas de silicio–diamante tipo carbono Si-DLC

y tungsteno–diamante tipo carbono W-DLC, utilizando la técnica de pulverización
catódica, también conocida por su nombre en inglés: sputtering. Se prevé que el
dopaje y la unificación de sistemas multicapas, conllevan a la utilización de estos
materiales en aplicaciones prácticas de la industria médica. La técnica utilizada
para fabricar el recubrimiento, fue pulverización catódica con un equipo de
sputtering R.F. (radio frecuencia) asistida con campos magnéticos. Previo al
crecimiento de algunas monocapas y siguiendo una matriz experimental, se
depositó una interface de titanio para mejorar la adherencia entre el sustrato y el
recubrimiento. Las monocapas se crecieron utilizando como material blanco:
carbono, titanio, silicio y tungsteno. La composición y estructura de las películas
fueron estudiadas a través de la técnica espectroscopía raman obteniendo
concentraciones de enlaces sp3 adecuadas y niveles de espectros en los rangos
entre 1300cm-1 y 1600cm-1 para la banda D y G respectivamente. Estos resultados
indican un crecimiento favorable del material DLC, a pesar de las dificultades de
adherencia que presentó la interface antes de desarrollar la intercapa de titanio.
Se evaluó la biocompatibilidad de las monocapas por medio de una prueba de

viabilidad celular (citotoxicidad) la cual involucró un cultivo de linfocitos; los
21
resultados presentaron valores experimentales de viabilidad celular adecuados
para cada monocapa: W-DLC reportó un 51,19% más de viabilidad celular que el
control de Fe, Si-DLC reportó un 48,68% más de viabilidad celular respecto al
mismo control, el control positivo (a) tuvo una mínima diferencia con la monocapa
de W-DLC de aproximadamente 4,7% y respecto a él Si-DLC se registró una
diferencia de 7,21%, que es muy baja teniendo en cuenta que el control (a) fue
una muestra de titanio.
22
INTRODUCCIÓN
El cuerpo humano es un sistema complejo donde las partes se interrelacionan, un

ejemplo de ello son las articulaciones que juegan un papel muy importante en la
transmisión del peso corporal, por tanto son zonas propensas a sufrir alteraciones
de índole mecánicas y traumáticas.
Anualmente se presentan casos de afecciones articulares que terminan en una

intervención quirúrgica con implantación de dispositivos ortopédicos que en la
mayoría de los casos se realiza para articulaciones de cadera y rodilla1. En
algunos casos las personas que fueron intervenidas quirúrgicamente presentan
luego dolencias, molestias, respecto al dispositivo que les fue implantado para
mejorar su calidad de vida. La problemática con los dispositivos protésicos suele
tener distintas causas, pero siempre converge en el desgaste, afectando así la
tribología de las superficies involucradas, tanto del material del dispositivo como
del tejido biológico; por esa razón es necesario un avance en las tecnologías de
los nuevos materiales, para brindar una mejor calidad de vida al paciente que está
doliente por la fricción y el desgaste generado en este tipo de zonas.
El diseño y aplicación de recubrimientos sobre los sustratos, aporta a la ciencia y

la industria resultados favorables, en vista que se pueden modificar características
y propiedades de los materiales tanto del sustrato (propiedades mecánicas) como
del recubrimiento (propiedades relacionadas con el desgaste). Es así como en un
proceso de deposición de recubrimientos de diversos compuestos, se
implementan materiales que suelen ser muy distintos entre sí, para contribuir con
variedad de propiedades al sistema sustrato-recubrimiento.
La tribología es una ciencia que se adhiere al estudio de los recubrimientos de

películas delgadas por su base en mecanismos de desgaste, ya que estudia tres
aspectos que relacionan fricción, desgaste a causa de la fricción y lubricación
como medio de contrarrestar los dos primeros aspectos; una característica del
material tipo carbono es su capacidad para ofrecer un gran componente de
lubricación en seco; es por la tribología que a través de los años se han
desarrollado películas delgadas con materiales que brinden un comportamiento
tribológico adecuado (bajo coeficiente de fricción). En la actualidad se está
trabajando en la combinación de propiedades como: dureza, tenacidad y
coeficiente de fricción, sin olvidar el mejoramiento en cuanto a respuestas ópticas,
magnéticas, eléctricas, de resistencia a la corrosión junto con biocompatibilidad y
1
GAONA, M., Recubrimientos biocompatibles obtenidos por proyección térmica y estudio in-vitro
de la función osteoblástica. Tesis. 2007. p. 1 – 288.
23
biofunciobabilidad. Por ende, las técnicas y los sistemas de generación de
recubrimientos están mejorando con el tiempo para dar mayores posibilidades y
aplicaciones; hoy por hoy los expertos trabajan técnicas de dos familias
importantes las cuales tienen intervención de plasma: PAPVD (deposición física
de vapor asistida por plasma) y PACVD (deposición química de vapor asistida por
plasma)2.
En la base de los estudios de recubrimientos de películas delgadas se encuentran

materiales compuestos que han sido protagonistas durante muchos años como el
nitruro de titanio (TiN), carburos de tungsteno (WC), carburos de titanio (TiC) entre
otros, ya que muestran excelente resistencia al desgaste, resistencia a la
corrosión y estabilidad química, sus aplicaciones son variadas dentro de la
industria en herramientas de corte y maquinado, industrias militares etc. La
innovación en la ciencia de los materiales está en la producción de nuevos
materiales con propiedades que ayuden a la tribología como: diamante tipo
carbono (DLC), carbonitruro de titanio (TiCN).
EL desarrollo de recubrimientos a base de carbono amorfo (DLC) ha crecido en

los últimos años por sus propiedades tribológicas, en vista que este tipo de
material goza de un bajo coeficiente de fricción estático y dinámico, alta dureza y
por ende una excelente resistencia al desgaste. Por otro lado, también ofrece alta
resistencia eléctrica y conductividad térmica, transparencia óptica, además que es
muy biocompatible3,4. No obstante, este tipo de recubrimientos presentan
problemas de adherencia con la interface del sustrato (la mayoría metálicos),
debido a que la estructura del diamante tipo carbono tiene concentraciones de
enlaces sp3 que lo acerca mucho a las propiedades del diamante, otorgándole una
alta dureza, pero también altas tensiones compresivas internas que generan
fracturas y delaminación en las películas5. A través del tiempo se han propuesto
diversos métodos para resolver el problema, como generar recubrimientos
compuestos involucrando dopajes entre los materiales, lo cual dará estabilidad a la
película y mayor adherencia entre microestructuras; también sugieren y aplican en
la mayoría de los casos, el uso de recubrimientos funcionales que hacen
referencia a aquellos que se realizan con una o más capas intermedias entre el
2
ROHDE, S., et al. Recent developments in plasma assisted physical vapour deposition. Journal of
Physics D: Applied Physics. 2000. Vol. 33 N°18. p. 1-13
3
HALL, R., et al. Biomechanics: Biotribology for joint replacement. Current Orthopedics. 2001. Vol.
15, p. 281 – 290.
4
PEINDY, H., et al. Synthesis, characterization, X-Ray crystallography, and cytotoxicity of a
cymantrene keto carboxylic acid for IR labelling of bioactive peptides on a solid support. Journal of
Inorganic Biochemistry. (2008) Vol. 102, p. 2114 – 2119.
5
ZAMBRANO, G., et al. Multicapas de metal cerámico carbono tipo diamante (DLC), un camino
para la obtención de recubrimientos superduros. Rev. Acad. Colomb. Cienc. 2003. Vol. 27 (103), p.
225 - 231.
24
sustrato y el recubrimiento para mejorar la compatibilidad entre los enlaces
químicos de las capas.
Conociendo las distintas técnicas para el desarrollo de recubrimientos de película

delgada y las bondades del material diamante tipo carbono, surge la idea de
realizar un crecimiento de un recubrimiento de película delgada en forma de
monocapa implementando el DLC. Estas monocapas tendrán un dopaje de
tungsteno (W) diseñado para ofrecer dureza a la película y con dopaje de silicio
(Si) diseñado para mejorar la reacción biocompatible (riesgo bacteriano) de la
misma. Los objetivos van enfocados al mejoramiento y optimización de las
propiedades superficiales del material sustrato que en este caso usaremos un
acero inoxidable austenítico 316 (AISI-316), solucionando el problema de
adherencia para estas películas por medio de un recubrimiento funcional y reducir
la respuesta inmunológica que puede tener un medio biológicamente activo frente
al nuevo material; la técnica implementada para el crecimiento de la película hace
parte de la PAPVD (deposición física de vapor asistida por plasma), pulverización
catódica por radio frecuencia (RF); es una técnica muy conocida en el campo de
los métodos de deposición sobre diferentes laminas delgadas, es de las más
usadas en la actualidad junto con el sistema de pulverización catódica por
corriente directa (DC). Su popularidad radica en lo fácil que es desarrollar su
proceso físico, además que es una técnica muy versátil, ajustable y da la
posibilidad de una personalización.
Cuando se realizan crecimientos de recubrimientos en forma de monocapa se

generan algunos problemas cuyas causas radican en la imposibilidad de obtener
propiedades como: alta dureza, buena adherencia, bajo coeficiente de fricción etc.
de forma simultánea. Por ejemplo, un aumento en la dureza y la resistencia
mecánica en la interlayer sustrato-capa esta comúnmente relacionado con una
disminución en la tenacidad y la adherencia. Por consiguiente, la mayor parte de
los recubrimientos comerciales de alta calidad tienen estructura de multicapa; este
concepto implica el uso de varias capas de materiales mutuamente solubles a fin
de promover el desarrollo de interfaces altamente adherentes entre ellas. El
material de la primera capa, en contacto con el sustrato, tiene por función principal
promover una buena adherencia (usualmente Ti, TiN o TiC), en tanto que los
materiales de las capas siguientes se eligen para conseguir capas de alta dureza y
resistencia al desgaste (TiC, WC, W-DLC o TiCN) y/o bajo coeficiente de fricción y
estabilidad química (DLC, Si-DLC). Muchos investigadores reportan que los
recubrimientos metal carbón tienen un coeficiente de fricción menor que los
recubrimientos metálicos puros. Se conoce que capas de DLC sobre TiN tienen
coeficiente de fricción más bajo que el TiN solo6. En esta instancia, se utiliza una
6
DEVIA, A., et al. Producción y caracterización de bicapas de TiN/DLC en Películas delgadas.
Revista Colombiana de Física. 2004. Vol. 36, N° 2, p. 1 - 5.
25
combinación relativamente limitada de materiales de recubrimientos en multicapas
y es usual que cuenten con varias capas alternadas. Trabajos anteriores
realizados por el doctor Federico Sequeda, reportan que el uso de recubrimientos
en multicapas implementados en la industria, permiten extender la vida de la
herramienta, aumentar su velocidad de corte y de avance con respecto a
recubrimientos en forma de monocapa de modo que aportan una ventaja
económica importante en procesos de producción continua. El desarrollo de
recubrimientos multicapas para herramientas de corte constituye una de las
tendencias más importantes.
En este trabajo de grado se detalla el proceso para la producción y caracterización

de recubrimientos en monocapa de Si-DLC/W-DLC/Ti, el trabajo se desarrolla en
diferentes capítulos. El primer capítulo presenta el planteamiento del problema, la
justificación y los antecedentes, más específicamente, definen la problemática a
tratar, la importancia del proyecto, algunos antecedentes respecto al tema de
recubrimiento de materiales y los objetivos desarrollados. En el segundo y tercer
capítulo se dan ideas generales acerca del sistema de pulverización catódica por
radio frecuencia, técnicas de deposición basadas en plasma y se da una base
teórica sobre los recubrimientos duros enfatizando en el desarrollo de las películas
delgadas de tungsteno-diamante tipo carbono (W-DLC), silicio-diamante tipo
carbono (Si-DLC), titanio (Ti) y diamante tipo carbono (DLC)7. El cuarto capítulo
describe los procedimientos experimentales para la obtención y caracterización de
los recubrimientos, así como también las técnicas para el diagnóstico citotóxico. El
quinto capítulo presenta la metodología experimental utilizada en el proyecto.
Finalmente en el sexto capítulo, se analizan los resultados obtenidos con base en
análisis de espectroscopía raman para identificación estructural, pruebas de pin on
disc, nanoindentación y profilometría para análisis tribológico; ensayo de
citotoxicidad por medio de viabilidad celular para determinar parámetros de
biocompatibilidad8.
Como resultados directos de este proyecto, se obtienen unos resultados

experimentales que dan a conocer algunas condiciones que podrían ser
adecuadas para desarrollar y manipular las variables involucradas dentro del
proceso de deposición. Estos resultados intentan proponer resultados sobre
efectos del tipo de dopaje en la microestructura del recubrimiento, propiedades
mecánicas y biocompatibilidad del material, dando así soluciones a una aplicación
en la industria biomédica que supla las necesidades de la sociedad.
7
SEGURA, B., Producción y caracterización de recubrimientos en multicapa de TiN/DLC en
películas delgadas. Tesis. Universidad Nacional Sede Manizales. 2003.
8
Ibíd., p. 26.
26
Como resultados indirectos, se tiene la innovación en la línea de biomateriales
para aplicaciones biomédicas en la Universidad Autónoma de Occidente,
fortalecimiento y consolidación de grupos de investigación con vínculos entre
Universidades de la región, del país y fuera de este.
27
1. PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA
Un paciente con lesiones articulares se ve afectado por dolencias generadas con

el debilitamiento de las superficies fisiológicas involucradas. Además, con el
transcurso del tiempo el individuo inicia un proceso degenerativo tanto óseo como
muscular, perdiendo un gran porcentaje de la movilidad y motricidad de su cuerpo,
afectando directamente el comportamiento de los diferentes puntos anatómicos;
impidiéndole cumplir con sus actividades diarias de forma normal.
Las estadísticas certifican que las actividades relacionadas con prótesis, ortesis
dispositivos de sujeción e intervenciones articulares hacen parte del 55% del
mercado que aborda el uso de biomateriales de uso ortopédico a nivel mundial;
gran parte de este mercado se encuentra en Colombia debido a los diferentes
factores sociales y de salud9.
En los últimos años se ha venido presentando un fenómeno mundial referente al

crecimiento exagerado de la población mayor de 60 años10, factor decisivo a la
hora de analizar el mercado potencial al que se dirigen los implantes y nuevos
biomateriales, en vista que el envejecimiento ayuda al crecimiento de la población
afectada por lesiones articulares y demás patologías relacionadas.
Los estudios estadísticos de María Gaona Latorre11 informan que Colombia posee
una gran demanda del mercado de implantes protésicos y ortésicos, ya que es un
país con altos niveles de problemática social; presentándose así casos de
discapacidad parcial o total. También indican que el número de intervenciones a
nivel articular es elevado reportando como dato referencia cerca de 5.000 casos a
nivel de cadera y 3.000 en rodilla para un total de 8.000 casos anuales.
La mayoría de los implantes usados por la población colombiana son importados,

debido a que en el país no existe un mercado realmente definido, ni una industria
dedicada a la preparación de estos; por ende, el orden en el costo de adquisición
de los implantes se incrementa por causas de importación, preparación externa y
materiales.
9
La ciencia y la ingeniería de los biomateriales un desafío interdisciplinario, Ciencia hoy, revista de
divulgación científica y tecnológica de la asociación ciencia hoy, Vol. 9 N° 49, noviembre-diciembre
1998.
10
GAONA, M., Op cit., p 3.
11
GAONA, M., Op cit., p 3.
28
El estudio de los implantes médicos lleva a analizar los materiales con los que
estos se constituyen, los cuales algunas veces no brindan suficientes propiedades
tribológicas a las diferentes piezas que los componen y no cumplen con los
requerimientos estipulados en el diseño, acortando de esta forma el tiempo de
vida útil del implante (de laminación de las capas del material); esto incide en que
se tengan que realizar revisiones, modificaciones superficiales e incluso cambios
totales del mismo implante o prótesis después de un tiempo. Es por eso, que el
Grupo de Investigación de Materiales Avanzados para Micro y Nanotecnología
(IMAMNT) quiere proponer ideas para el tratamiento de los materiales en cuanto al
mejoramiento de sus propiedades mecánicas y biocompatibles para potenciar de
alguna manera la estructura y eficiencia de los implantes médicos, mitigando así
los efectos dañinos que producen las diferentes afecciones articulares en las
personas que las padecen. Las superficies de los materiales se encuentran
sometidas a esfuerzos mecánicos y a medios donde se atenta contra la estabilidad
y capacidad del material a resistir ambientes corrosivos y abrasivos, a los cuales
debe estar sometido por las funciones que deben desempeñar. Así, en los últimos
años, se han desarrollado materiales y técnicas que prolongan la vida útil de los
materiales y ayudan a soportar los efectos agresivos del ambiente a los cuales
están expuestos.
Nuestro cuerpo cuenta con un sistema inmunológico que reacciona con la

presencia de partículas de tamaño micrométrico, provocando para esto un
desplazamiento de células (macrófagos) alrededor de estos cuerpos extraños
donde finalmente son atrapados, generándose lo que se denomina como
fagocitosis. Sin embargo, estas células pueden arrojar medidores celulares que
afectan otro tipo de células como, los fibroblastos, osteoblastos y osteoclastos,
donde a largo plazo pueden ocasionar necrosis, complicando el proceso de
aceptación de cualquier implante, generando reacciones secundarias que aflojan
dicho implante por la pérdida del tejido óseo que está en contacto directo con este.
Es así como, la modificación de superficies en este tipo de materiales se ha

convertido en una alternativa necesaria. Pero se debe tener el mejor criterio para
la escogencia de la técnica o método de modificación superficial y los materiales a
usar, ya que de ello depende la efectividad del comportamiento de la superficie del
implante y su rendimiento.
Existe un interés por aprovechar el amplio mercado que está posicionado respecto
a implantes articulares y la poca facilidad de los pacientes para adquirir los
dispositivos ortopédicos debido a los elevados costos; La Universidad Autónoma
de Occidente y la Dirección de Investigación y Desarrollo Tecnológico (DIyDT),
quiso apoyar este proyecto de investigación con el objetivo de penetrar en el
29
mercado por medio de las ciencias biomédicas aportando al país ideas
innovadoras en cuanto al diseño y desarrollo de nuevos biomateriales. Con esta
visión se pretende, expandir el desarrollo productivo en las áreas de materiales y
biomecánica, valiéndose de la tecnología y mano de obra disponible en la región
creando sinergia entre las distintas empresas o institutos que actualmente trabajan
en el medio. De este modo se tiene un segundo interés pero no menos importante,
que es estudiar materiales que se puedan depositar mediante una técnica
especializada, que le brinde al material base (implante), las propiedades
mecánicas y biocompatibles necesarias para soportar el efecto biológico y
mecánico propios de una función articular y disminuir los efectos secundarios en
los pacientes.
De acuerdo a lo anterior, este proyecto plantea la siguiente pregunta de

investigación: ¿podría obtenerse un recubrimiento basado en diamante dopado
con elementos de silicio y tungsteno que cumpla con las condiciones mínimas
necesarias para ser usado como recubrimiento duro biocompatible?.
30
2. JUSTIFICACIÓN
El padecimiento de una enfermedad de tipo articular tiene severas implicaciones

en el paciente, que pueden variar entre fisiológicas y psicológicas según sea el
caso. La exclusión social, en el ámbito de la comunidad y en el ámbito laboral,
son los factores más reconocidos que conducen a una disminución de la calidad
de vida del paciente con una afección de este tipo. La implicación fisiológica
generalizada es el daño de los componentes articulares y sus contiguos,
alcanzando niveles de discapacidad tan altos que afectan otros sistemas
reflejándose en el ciclo de marcha y su capacidad motriz. El daño fisiológico es
directamente proporcional al transcurso del tiempo, es por eso que si no se trata a
tiempo y con un método apropiado se pueden presentar malformaciones de todo
tipo, debido a que el cuerpo se adapta a la nueva condición física degenerando
aún más el sistema e impidiendo en algunos casos el desarrollo normal de ciertas
actividades por parte de los pacientes.
El diseño de materiales con menores costos económicos y tecnológicos para la

construcción de implantes articulares que permitan reducir la brecha que existe
entre los implantes y los discapacitados, aumentando la efectividad y eficiencia del
implante frente a la patología junto con la productividad en la vida de los
pacientes, es el motor de nuestro proyecto.
La importancia de incluir en el diseño de nuevos materiales los distintos

recubrimientos estriba en que las técnicas utilizadas para su generación son
flexibles al momento de desarrollar los protocolos experimentales, permitiendo así
realizar una convergencia de varios materiales para el crecimiento de películas
delgadas con diferentes microestructuras que dependen de la necesidad. La
industria obtiene beneficios con la aplicación de este tipo de recubrimientos sobre
superficies metálicas, ya que se logran potenciar de manera exponencial las
propiedades mecánicas y tribologías de estos, expandiendo el tiempo de vida útil y
su rendimiento, lo que proporciona a la industria una relación rentabilidad vs.
productividad en alza.
Este proyecto apunta hacia la creación de conocimiento técnico que apoye la

innovación en el desarrollo de soluciones ingenieriles en el ámbito de los
biomateriales y la biomecánica, a los distintos problemas que con frecuencia
impiden el libre desarrollo de la comunidad; atenuando en el camino las
problemáticas generadas en el implante por parte del sistema biológico en cuanto
a propiedades mecánicas y biocompatibles. La idea es consolidar la línea de
investigación en biomateriales para la comunidad estudiantil de la UAO, lo cual
31
permite el posicionamiento de su programa de Ingeniería Biomédica en el
desarrollo de nuevos materiales en la sociedad.
32
3. ANTECEDENTES
El uso de materiales no biológicos en el campo de la medicina se remonta al

antiguo Egipto y a las civilizaciones clásicas de Roma y Grecia, donde se han
encontrado evidencias del uso de metales en el tratamiento de heridas. En la
Europa del siglo XVI ya se empleaba oro y plata para la reparación de defectos
dentales y posteriormente, se utilizaron alambres de hierro para la inmovilización
de fracturas óseas12. El uso de biomateriales no repercutió en la medicina hasta
finales del siglo XIX cuando se empezaron a usar ampliamente, debido a las
mejoras en las técnicas quirúrgicas. Los primeros indicios de los implantes
clínicos, fueron reparaciones del esqueleto, por lo que se desarrollaron nuevas
aleaciones para aumentar la resistencia a la corrosión y a la degradación del
medio fisiológico, ya que los metales perdían rápidamente las propiedades
mecánicas para cumplir la función para la que fueron diseñados. Una de las
primeras aleaciones usadas fueron las de CoCr y los aceros inoxidables
austeníticos desarrollados hacia 1930. A finales del siglo XX se empezó a
comercializar titanio y aleaciones de titanio, gracias a que el señor Per Ingmar
Branemark descubriera en la década de 1960 las propiedades de
biocompatibilidad y osteointegración del titanio13.
Durante años, el hombre ha trabajado para lograr desarrollar materiales con

excelentes propiedades de biocompatibilidad (biomaterial) de modo tal que al ser
expuesto en contacto directo con el medio biológico no generen una respuesta
inmunológica dentro del sistema fisiológico; una alternativa para potenciar las
propiedades biocompatibles y biofuncionales de estos materiales es la
modificación de la superficie de los mismos.
El área de estudio de la producción del carbono tipo diamante (DLC) es de

amplias investigaciones, debido a que el material posee una combinación única de
propiedades, la cual lo hace un material ideal para un gran número de
aplicaciones. Películas delgadas de DLC son caracterizadas por una alta dureza,
un bajo coeficiente de fricción, una alta resistencia química, la cual hace de éstos
materiales buenos candidatos para películas delgadas antidesgaste. Una
desventaja del DLC es su alta tensión compresiva que produce una mala
adherencia sobre sustratos metálicos. Se ha encontrado que dopando el DLC con
un pequeño porcentaje de metales de transición o depositando una capa metálica
intermedia se reducen las tensiones y hay un mejoramiento en la adhesión14. El
12
Materiales aplicados para biomédica [en línea]. Santiago de Cali: Universidad Autónoma de
Occidente, 2010. [Consultado 07 de Octubre, 2009]. Disponible en Internet:
http://nanoudla.blogspot.com/2009/05/materiales-aplicados-para-biomedica.html
13
ZAMBRANO, Op. cit., p. 227.
14
33
hecho de que el material DLC presente baja rugosidad superficial, sea
químicamente inerte y además tenga un bajo coeficiente de fricción al entrar en
contacto con la mayoría de los metales, hace que las películas de DLC sean
interesantes para su utilización como capas protectoras contra el desgaste y como
recubrimientos duros para ser depositados sobre metal duro o aceros
endurecidos.
El análisis de espectros raman es la técnica fundamental para determinar las

distintas estructuras que conforman los recubrimientos; ya que es un experimento
que se fundamenta con el fenómeno de dispersión de luz respecto a las moléculas
del material, teniendo en cuenta que una intensidad de un haz de luz tiende a
disminuir de manera progresiva cuando entra en contacto con un medio sólido de
características absorbentes. Dicha espectroscopía se basa en la dispersión
inelástica de la radiación, la cual es consecuencia de las interacciones entre
fotones y las vibraciones de la red molecular.
De este modo, la espectroscopía raman se implementa en el estudio de

recubrimientos basados en carbono con el objetivo de identificar el tipo de
estructura que contiene este material, dependiendo de las concentraciones de
enlaces covalentes de tipo sp, sp2 y sp3 que establecen hibridaciones para la
formación de estructuras grafíticas, fullerenas, diamante puro y diamante tipo
carbono; esperando para este último un gran número de enlaces de orden sp3.
Existen reportes de investigaciones donde se vincula el crecimiento de películas

con material DLC solo y relacionando otros materiales como dopaje; en estudios
realizados por el Doctor Carlos Alberto Rincón López de la Universidad del Cauca,
se observa el desarrollo de multicapas a base de W-C/DLC por medio de un
sistema co-sputtering, implementando un blanco binario W-C y un plasma con
mezcla de CH4 y Ar-.
El análisis de los espectros raman arrojado por esta investigación para el proceso
C, identifica la banda de grafito en G=1350cm-1 y la de diamante en D=1550cm-1
que están asociados a películas de diamante tipo carbono. Para el proceso en el
cual se depositan capas de WC, se hace un análisis raman donde se encuentra el
registro de picos débiles de raman debidos a las bajas concentraciones de enlaces
C-C y al efecto del ruido tipo fluorescencia en la banda 1290cm-1. El autor calculó
la razón de las intensidades ID/IG por medio de la deconvolución en gaussianas.
34
De igual forma, se tiene registro de crecimientos de películas de diamante tipo
carbono con plasma a base de metano en concentraciones de 24% y 40% dentro
del cual se encontraron por análisis raman bandas G y D en los rangos de
1550cm-1 y 1333cm-1 respectivamente, para el cálculo de las concentraciones de
enlaces sp3 se implementó una deconvolución en gaussianas obteniendo áreas
entre los picos con una razón de 2,0 y 2,4, además el autor afirma que la
concentración de metano incrementa el número de enlaces requeridos de tipo sp3.
Utilizando la técnica de espectroscopía raman, se realizó el análisis de una

estructura de multicapas de DLC/W-DLC depositada sobre un cristal de silicio; los
rangos arrojados por el espectro raman indican que las concentraciones de
enlaces covalentes hidrogenados sp2 y sp3, respectivos del crecimiento de DLC,
se encuentran concentrados en los rangos D=1297cm-1 y G=1560cm-1
En este artículo el autor R. D. Manzano, registró un crecimiento de una monocapa

de material W-DLC, utilizando un blanco de tungsteno con pureza de 99,99%,
encontrando a través del análisis de espectroscopía raman bandas que se
encontraron ubicadas entre D=1320cm-1, G=1580cm-1 y 2800cm-1, perteneciendo
las bandas D y G a DLC respectivamente y carburo de tungsteno.
El autor hace reseña que a una mayor concentración de argón y metano en el

sistema, mayores serán los enlaces covalentes de tipo sp2 y sp3 evitando la
formación de material a base de tungsteno lo que también ayuda a mejorar
notablemente la biocompatibilidad de dicho recubrimiento, pero si se presentan
concentraciones bajas de gas en el sistema de deposición esto ocasionaría un
crecimiento de carburos lo que hace al material tenga bajas probabilidades de ser
biocompatible.
Cuando se depositan películas de material DLC de forma directa sobre un sustrato

de metal o acero, las propiedades con que cuenta este material disminuyen su
potencialidad debido a que se generan tensiones compresivas internas las cuales
causan problemas de adherencia entre el sustrato y la capa protectora hasta que
la película de DLC se resquebraje. Una solución para reducir la tensiones internas
es ubicar una capa intermedia entre el sustrato y la película de DLC, por lo general
se usa una capa intermedia de Ti15, W16 o Cr17 de modo tal que funcione como
15
HERNÁNDEZ, J., et al. Estudio de multicapas de Ti/TiSiN obtenidas por erosión catódica. En: X
congreso nacional de microscopia –Morelia, 2010. p. 1-3
16
MALCHER, V., Diamond film coated on WC/Co tools by double bias-assisted hot filament CVD.
Current applied physics. 2002. p. 201 – 204.
17
35
pegamento o anclaje entre los dos materiales, debido a la propiedad de estos
metales de adherirse a los aceros al formar carburos (con enlaces fuertes entre la
capa intermedia y la película de DLC).
La adherencia del recubrimiento es un factor determinante en el comportamiento

del mismo. Desde este punto de vista, capas intermedias adecuadas entre el
recubrimiento exterior y el substrato sirven para reducir las discontinuidades de
tensiones entre ambos, además de mejorar la adhesión con la capa externa18.
Los sistemas de multicapa son aun más complejos. Se componen de capas

frágiles ligadas con películas blandas y permiten gran absorción de energía,
restringiendo las grietas a capas individuales distribuyendo el daño a través del
sistema. Presentan alta resistencia al desgaste y gran tenacidad con baja
susceptibilidad a degradación por acumulación de daño. La diferencia entre los
módulos elásticos (módulo young) de cada capa provoca una repartición de la
energía absorbida. Sin embargo aunque las grietas se confinan en estas capas
exteriores, la flexión que se produce entre ellas potencia con mucha facilidad la
aparición de otras nuevas capas subsiguientes19.
Existen distintos métodos de aplicación de recubrimientos o de modificación

superficial (películas delgadas), con los cuales se pueden obtener materiales con
una gran variedad de estructuras cristalinas, logrando obtener con esto múltiples
propiedades y aplicaciones. Deposición física de vapor (PVD), son técnicas
mediante las cuales se puede depositar un material sobre otro mediante su
evaporación o pulverización, esta deposición se logra variando los parámetros que
controlan el proceso, como tensión, temperatura, corriente, presión y
contaminación del ambiente.
En la fabricación de implantes, se han utilizado métodos de modificación de

superficies físicos y químicos, tales como, “ion beam sputtering”, “physical vapor
deposition” (PVD), “chemical vapor deposition” (CVD), “plasma spray”, “ion beam
implantation”, entre otros, que proveen al material base, resistencia al desgaste y
la corrosión.
Muchos de los dispositivos ortopédicos que salen al mercado para suplir

necesidades a pacientes con limitaciones fisiológicas, se ven expuestos a
fenómenos físicos luego de ser implantados en el medio biológico activo, haciendo
18
19
36
referencia al desgaste de la superficie, liberación de partículas del material y
aflojamiento del dispositivo a causa de la llamada osteolisis. Esta problemática
motiva a la generación de materiales que puedan ser depositados sobre los
implantes médicos para así mitigar los efectos que producen el daño; de este
modo se ha trabajado con películas a base de metal – metal y recubrimientos de
material cerámico que proveen al material base con características antidesgaste
(lubricación), alta dureza, mejor adherencia entre otras20,21.
Dentro de las investigaciones que se han realizado con referencia a la

biocompatibilidad de materiales que se encuentran en contacto con el medio
fisiológico, existe bibliografía que indica algunos protocolos para llevar a cabo los
diferentes ensayos y pruebas que evalúan el comportamiento del material
respecto al tejido vivo y viceversa. Todas las pruebas se encuentran amparadas
bajo normas ISO (5832-1, 437, 439, 629, 671, 643, 10714, 10993-1), UNE 7-
375/2; algunas de estas normas no aplican directamente a la evaluación de la
biocompatibilidad, pero influyen cuando se hace referencia a determinados
aspectos físicos y mecánicos del material que a fin de cuentas afectan parámetros
que a su vez repercuten en el nivel de biocompatibilidad22.
Mundialmente se tienen determinados una serie de protocolos a nivel biológico

aplicados sobre el material para su evaluación biocompatible, para la satisfacción
de los estándares de calidad que maneja cada una de las normativas en los
respectivos lugares; dentro de los protocolos se evalúan efectos de citotoxicidad,
genotoxicidad, mutagenicidad entre otros.
20
HALL, R., et al. Biomechanics: Biotribology for joint replacement. Current Orthopaedics. (2001)
Vol. 15, p. 281 – 290.
21
RODRÍGUEZ, J., et al. Evaluación del desgaste de prótesis cerámicas de cadera recubiertas con
DLC por triboadhesión parte 1. Diseño de la máquina de deposición y desgaste. (2006). Vol. 27(1),
p. 23 – 30.
22
RODRÍGUEZ, L., et al. Aceros inoxidables para implantes ortopédicos utilizados en la industria
ORTOP RALCA del CCOI “Frank París”, VII Congreso de la sociedad cubana de bioingeniería.
Habana: 2007. Artículo T029.
37
4. PROCESO DE PULVERIZACIÓN CATÓDICA (SPUTTERING)
El proceso de pulverización mostrado en la figura 1 catódica es normalmente

conocido con su nombre en inglés: sputtering. Se trata de un proceso físico, que
fundamenta muchas técnicas de deposición por su eficiencia y calidad, en el que
se produce la evaporación de átomos de un material blanco mediante el
bombardeo de éste por iones energéticos y no renovables, como el argón, que
permiten desprender de forma directa y mecánica los átomos que después son
dirigidos y depositados sobre el sustrato. La pulverización catódica es causada por
el intercambio de momento entre iones y átomos, debido a colisiones inelásticas
que se presentan entre ellos; estas colisiones desprenden moléculas de carácter
neutro. La velocidad del proceso mantiene una relación con la energía y la masa
de los iones que inciden en el numero atómico, la temperatura del blanco, ángulo
de incidencia de los iones y tipo de blanco (compuesto, aleación)23,24 etc.
Figura 1: Proceso de creación de películas delgadas.
Fuente: GALINDO, E; et al. Preparación y caracterización de recubrimientos y láminas delgadas,

Tema4: Técnicas de deposición física (PVD) II. Deposición mediante bombardeo catódico
('sputtering'). Centro de Microanalisis de Materiales, CMAM-UAM, p. 3 – 26.
En la creación de recubrimientos, las partículas que bombardean la superficie del

material blanco, transfieren su energía y momento a los átomos que se encuentran
23
SEGURA, Op. cit., p. 29.
24
GALINDO, E., et al. Preparación y caracterización de recubrimientos y láminas delgadas, Tema4:
Técnicas de deposición física (PVD) II. Deposición mediante bombardeo catódico ('sputtering').
Centro de Microanalisis de Materiales. CMAM-UAM, p. 3 – 26.
38
en la superficie de este, dando lugar a la eyección de estos con energía suficiente
tal que logran superar la energía de los enlaces covalentes. Las cargas positivas
acumuladas en este proceso son eliminadas en el momento en que la polarización
del sistema es invertida en cada semiciclo del sistema. La aplicación de un campo
magnético externo; como el que emplean los sistemas de pulverización catódica,
permite aumentar considerablemente la velocidad de pulverización, haciendo el
sistema más eficiente en el momento de la realización de películas delgadas; lo
que ha dado lugar a diversas aplicaciones y múltiples usos a este tipo de
tecnología de generación de capas delgadas de material25.
Una de las ventajas más evidentes de la utilización de sistemas de pulverización

sputtering R.F., se encuentra en el momento de realizar la descarga en corriente
alterna de alta frecuencia sobre el material blanco, permitiendo depositar una gran
variedad de materiales aislantes; al poder aislar el portasustratos de la región de
descarga, se evita un bombardeo innecesario de los sustratos por iones que se
producen en la carga del sistema26.
4.1. PACVD (Plasma Assisted Chemical Vapor Deposition)
Técnica usada para el depósito de recubrimientos en forma de películas delgadas

sólidas originadas a base de reacciones químicas de especies, las cuales generan
sólidos por reacciones térmicas de los gases a altas temperaturas. La descarga
que implementa más comúnmente para este tipo de deposición es la glow.
Inicialmente se transfiere la energía del campo eléctrico al gas por medio de un

aumento en la energía cinética de algunos electrones. En un corto tiempo, los
electrones adquieren energía suficiente en los choques interatómicos para el
proceso de ionización de las moléculas del gas (disociación y de esta manera,
generar electrones de segundo orden que continúen el comportamiento, hasta
desencadenar un proceso de avalancha. La descarga comienza y un gran número
de electrones se pierde en las paredes de la cámara, en los electrodos y por
reacciones de recombinación. Se producen nuevos electrones tanto por los
procesos de emisión secundaria como por el impacto de los iones en los
electrodos. Un proceso de este tipo es estable, cuando el número de electrones
producidos y perdidos es igual27.
25
ESCOBAR, Op. cit., p. 35.
26
ESCOBAR, Op. cit., p. 35.
27
39
La estabilidad del plasma mantiene una relación estrecha con la magnitud de la
presión del sistema28, de este modo, si la presión es del orden de 0,13mbar, la
posibilidad de que se genere una colisión interatómica dentro del proceso de
ionización disminuye, dándole una velocidad baja al proceso de deposición del
recubrimiento; en tanto que si se tiene una presión del orden de 6,65mBar, la
frecuencia de las colisiones aumenta produciendo así, descargas localizadas y un
recubrimiento con n-homogeneidades en su espesor y composición.
4.2. PAPVD (Plasma Assisted Physical Vapor Deposition)
Esta técnica utiliza procesos físicos para la obtención de las especies de un

material (blanco) de manera directa, evaporándolas y depositándolas sobre el
sustrato. La inclusión del plasma en procesos PVD generó eficiencia en los
mismos, teniendo en cuenta que estos están bajo condición de no equilibrio del
plasma, lo que permite generar especies reactivas a temperaturas bajas que
aumentan la velocidad de deposición por la presencia de iones que pueden ser
acelerados eléctricamente y dirigidos al sustrato.
Las técnicas de deposición de recubrimientos por PVD que implementan plasma y

que son más usadas actualmente son: evaporación y sputtering. Estas brindan la
opción de realizar combinaciones entre ellas según sea la necesidad o la
aplicación29.
28
29
40
5. RECUBRIMIENTOS DUROS
Los recubrimientos duros poseen una combinación óptima de propiedades físicas,

mecánicas y tribológicas. La estabilidad química, la adhesión a sustratos son
requerimientos esenciales para el buen funcionamiento del recubrimiento; por otro
lado el ajuste del grosor de la capa, una microestructura adecuada, aspectos
relacionados con la fricción, la biocompatibilidad y las tensiones residuales de
compresión, pueden potenciar las funciones del recubrimiento30.
En la mayoría de los casos, la ciencia de los materiales no puede reunir de

manera simultánea en un componente distintas propiedades mecánicas y
funcionales de carácter superficial (dureza, resistencia a la corrosión, fricción). En
respuesta a esta situación se diseñan procesos que permiten optimizar de forma
separada la superficie de los materiales con la deposición de un nuevo material.
En la actualidad se tienen distintos métodos de modificación superficial

disponibles, partiendo de técnicas base como las deposiciones químicas y físicas
(PAPVD, PVD, sputtering reactivo, PACVD, CVD), que implementan vapor para
sus procesos.
Las aplicaciones más relevantes de los recubrimientos duros están relacionadas

con la industria, esto se evidencia en el incremento de la resistencia al desgaste y
la lubricación de superficies de algunos materiales que están involucrados en
mecanismos expuestos a contacto físico superficial, también en el mejoramiento
de la respuesta a la fricción (disminución del uso de lubricantes) y en el uso de
recubrimientos para resistencia en altas temperaturas.
En el desarrollo de recubrimientos duros, existe la posibilidad de manipular

distintas variables dentro del proceso de deposición como por ejemplo: velocidad
de deposición, presión de los gases, temperatura del sistema, naturaleza del
material pulverizado etc. Con el objetivo de seleccionar los tipos de propiedades
más adecuada según sea la aplicación.
30
PEINDY, H., et al. Synthesis, characterization, X-Ray crystallography, and cytotoxicity of a
cymantrene keto carboxylic acid for IR labelling of bioactive peptides on a solid support, Journal of
Inorganic Biochemistry. (2008) Vol. 102, p. 2114 – 2119.
41
5.1. RECUBRIMIENTOS DE W-DLC.
Las atractivas propiedades que puede ofrecer el material DLC motivan las
investigaciones de diseño en materiales a incluir otros materiales para fortalecer
estas propiedades y dotar a los sustratos con nuevas, para determinar diferentes
aplicaciones. Dentro de las combinaciones que se presentan en los estudios de
recubrimientos tipo película delgada se tienen capas a base de W-DLC
depositadas con variadas técnicas de modificación superficial como magnetrón co-
sputtering.
Las películas de W-DLC31 tienen características que les permiten funcionar como
recubrimientos de protección bien sea para sustratos solos o para otras películas
depositadas previamente; este tipo de recubrimiento reporta grandes cantidades
de matriz de carbono la cual muchas veces se extiende de manera satisfactoria a
través de toda la interface permitiendo que el recubrimiento obtenga un
mejoramiento en la adherencia y fortaleciendo la estructura interna del material
respecto a los enlaces de tipo sp3.
5.2. RECUBRIMIENTOS DE Si-DLC.
Este tipo de recubrimiento hace parte de la familia de películas delgadas de

carácter superduro, igual que la película de W-DLC pero con una ventaja sobre
esta que se ve relacionada con las propiedades que puede ofrecer en aspectos de
biocompatibilidad.
Teniendo en cuenta que la mayoría de los problemas de los implantes médicos

estriban en la adhesión de elementos bacterianos y generadores de respuesta
inmune, las investigaciones se dirigen a la disminución de este tipo de factores
negativos a partir del diseño de materiales. El material DLC posee buenas
propiedades de biocompatibilidad y hemocompatibilidad en estado puro, también
es un material que es flexible en cuanto a recepción de elementos intersticiales o
materiales dopantes manteniendo su matriz de carbono amorfo; de este modo los
estudios que generan películas delgadas de DLC adicionando silicio, afirman que
la incorporación de este segundo material a la interface permite disminuir la
tensión compresiva y estabilizar térmicamente el DLC puro, así como también
31
TAKENO, T., et al. A DLC/W-DLC Multilayered Structure for Strain Sensing Applications. Science
Direct Diamond & Related Materials. 2007 Vol. 516 p. 980 - 8577
42
reducir la rugosidad superficial de la película, característica que es vital para evitar
la adherencia de bacterias a los materiales32.
5.3. RECUBRIMIENTOS DE DIAMANTE TIPO CARBONO (DLC).
El estudio de los materiales superduros genera gran interés en el momento que se

busca sintetizar propiedades que brinden la posibilidad de asemejar la dureza del
diamante.
A partir de los diversos estudios sobre el diseño de materiales superduros, se han

desarrollado recubrimientos y películas de DLC que poseen propiedades como la
alta resistencia eléctrica, alta dureza, resistencia a la corrosión y al desgaste.
El material de las películas de DLC33 está compuesto principalmente por átomos

de carbono a nivel central, formando estructuras alotrópicas que difieren en los
tipos de enlaces que constituyen sus arreglos cristalinos, de los cuales podemos
nombrar arreglo estructural tipo carbono, tipo grafito, diamante y DLC.
El orden de las estructuras o arreglos cristalinos está definido por el

posicionamiento de los electrones sobre los orbitales pares que tienen movimiento
alrededor del átomo (cuadro 1), los cuales en el momento que no exista espacio
alguno se verá un rechazo de otros electrones orientándolos en el espacio a
grandes distancias.
32
LIU, C., et al. Reduction of bacterial adhesion on modified DLC coatings: colloids and surfaces :
Biointerfaces. (2008) Vol. 61, p. 182 – 187.
33
43
Cuadro 1: Formas moleculares de la estructura del carbono.
Número de par de
Forma de la Ángulo de
electrones en la Descripción
molécula enlace
capa exterior
2 Lineal 180º
Plano
4 120º
triangular
6 Tetrahedral 109º 28’
Fuente: SEGURA, B., Producción y caracterización de recubrimientos en multicapa de TiN/DLC en

películas delgadas. Tesis. Universidad Nacional Sede Manizales.2003, p. 56.
Figura 2: Esquema de las posibles hibridaciones del carbón, (a) sp, (b) sp2 y (c)
sp3.
Fuente: SEGURA, B; Producción y caracterización de recubrimientos en multicapa de TiN/DLC en

películas delgadas. Tesis. Universidad Nacional Sede Manizales.2003, p. 56
Los átomos de carbón pueden presentar enlaces formados por hibridación de sus
orbitales, los cuales aparecen mezclando dos o más orbitales atómicos; es así que
este átomo de carbón se combina con otro o con una molécula y adquiere la
energía suficiente para separar los electrones de otro nivel. De esta forma el
átomo de carbón resultante tendrá cuatro electrones de valencia desapareados,
de los cuales uno puede estar en la capa 2s y los otros tres en la capa 2p, de ahí
44
que los átomos del carbón pueden presentar hibridaciones del tipo de enlaces sp2
o sp3, como se muestra en la figura 2.
La dureza del diamante es una de las más altas conocida, sus átomos se ligan en
un orden cuádruple de enlaces tetrahedarales (hibridaciones sp3, cuatro enlaces
por cada átomo) con longitudes de enlace cortos, lo cual produce una estructura
macromolecular muy fuerte (figura 3).
Figura 3: Estructura molecular del diamante.

El diamante es un material que ofrece propiedades físicas muy útiles. Su dureza

oscila entre 90GPa y 100GPa. Posee una resistencia eléctrica elevada de
aproximadamente 1016W/cm a temperatura ambiente, alta conductividad térmica
y es ópticamente transparente; estas características son debidas a los fuertes
enlaces interatómicos.
La estructura del grafito consta de capas planas en arreglos hexagonales de

átomos de carbón. Dentro de las capas, cada átomo esta enlazado a tres átomos
vecinos coplanares por un fuerte enlace covalente. Los cuatros electrones
enlazados participan en un débil enlace de Van der Waals entre las capas (figura
4).
El material grafito se caracteriza por tener una alta conductividad térmica y

eléctrica, este tipo de arreglo cristalino posee buena estabilidad química a
elevadas temperaturas. Sus enlaces Van der Waals de carácter débil, se localizan
entre las capas permitiendo a los planos deslizarse unos sobre otros, lo cual
45
genera una excelente propiedad de lubricación. Ofrece mejor estabilidad a
temperatura ambiente que el diamante, también tiene bajo coeficiente de
expansión térmica y alta resistencia a choques térmicos.
Figura 4: Estructura molecular del grafito.

Los estudios actuales de investigación muestran avances en el desarrollo de

nuevas clases de carbón como el DLC. El diamante tipo carbono es un material
amorfo metaestable que puede tener muchas propiedades similares a las del
diamante como son su extremada dureza, alta transparencia óptica, alta
resistencia eléctrica, además de ser químicamente inerte y biocompatible,
realizando una comparación directa entre el diamante y el DLC, el diamante es un
cristal con enlaces completos sp3 del tipo carbón – carbón y el DLC es amorfo y su
característica diamond-like varía dependiendo de la relación de enlaces sp2
(enlaces característicos del grafito) y sp3 (enlaces característicos del diamante)34.
Básicamente, los recubrimientos de DLC se dividen en dos grupos. Un gran grupo

son los recubrimientos de carbón amorfo hidrogenado, a-C:H. Este hidrogeno se
presenta dependiendo del proceso de deposición. También existe un grupo que
hace parte los recubrimientos de carbón amorfo, a-C. Los recubrimientos que
presentan un alto contenido de enlaces sp3 son referenciados como
recubrimientos de diamante amorfo, porque su estructura es localmente
tetraédrica, diamond like, aunque esta estructura es desordenada a largo alcance
(ta-C:H y ta-C)35. Así, el DLC puede tomar varios tipos de estructuras del diamante
34
35
46
en el rango de microcristalinos a nanocristalinos, dependiendo de las
concentraciones de los enlaces sp2 a sp3.
Las propiedades que puede ofrecer el material DLC estas sujetas a cambios
según sean las concentraciones de enlaces sp2, sp3 e hidrogeno, además de su
forma estructural (grafito, a-C, a-C:H y diamante); las cuales se exponen en la
cuadro 2.
Cuadro 2: Comparación de algunas propiedades del diamante, el grafito y del

carbón amorfo hidrogenado y no hidrogenado.
a-C:H a-C
Diamante Grafito
ta-C:H ta-C
a = 2,46
Constante de red a = 3.567 Amorfo Amorfo
c = 6,71
3
Aproximado 10 - 50 % sp
(a-C)
3 2 3
Tipo de enlace sp sp 40 – 80% sp
3
Aproximado 50 - 95 % sp
(ta-C)
Concentración de H2 Aproximado
0 0 ..1
(at. %) 10 – 60
Dureza (GPa) 100 <1 5 - 20 20 – 80

5.4. RECUBRIMIENTOS DE TITANIO-Ti
Una estructura rica en enlaces sp3 determina una alta dureza en el material
asociado con DLC y grandes tensiones térmicas dentro de la película, esto genera
a su vez distintos problemas referentes a la propiedad de adhesión entre el DLC y
el sustrato. La falla de adherencia presente en este tipo de material, puede ser
mejorada depositando una capa intermedia en la interface DLC-sustrato.
La adherencia de los recubrimientos de DLC con los sustratos de acero se mejora

con el manejo adecuado de las variables que controlan el proceso de deposición,
esto es, la distancia interelectródica, la presión del gas (presión de trabajo) y la
47
potencia (energía de las partículas). Se puede tener cierto control sobre este
efecto de adherencia dentro del procedimiento de deposición con una adecuada
limpieza superficial del sustrato, desarrollando una matriz experimental que
indique los valores apropiados para las variables de potencia, tensión, corriente,
temperaturas etc., también con la deposición de una capa intermedia (interlayer)
de titanio (Ti) entre el sustrato y el DLC lo cual aumentará la adherencia, en vista
que este elemento reacciona químicamente con la superficie de la interface que
impide el desplazamiento de dislocaciones evitando las fracturas del material y
reduciendo las tensiones residuales internas producidas en el DLC.
48
6. PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL, TÉCNICAS PARA CARACTERIZAR
LOS RECUBRIMIENTOS Y DIAGNÓSTICO CITOTÓXICO
6.1. TÉCNICAS PARA CARACTERIZAR LOS RECUBRIMIENTOS
• Caracterización estructural: Para este caso se requiere el uso de una

técnica de alta exactitud la cual garantice una buena estructura del material DLC;
se implementa la técnica de espectroscopía raman por medio de la cual se logra
determinar la cantidad de enlaces sp3 y sp2 que se encuentran presentes en este
material a través de las curvas que arroja este ensayo conociendo los valores de
los parámetros a los que debe estar sujeta la curva en la grafica y su respectivo
rango; esto para comprobar sí el DLC cumple con las características de un buen
carbono amorfo o tiene comportamientos de grafito.
• Caracterización mecánica: Es indispensable realizar pruebas de

caracterización mecánica y tribológica al material AISI-316 para determinar los
valores de las durezas, así como nanodurezas en el caso del recubrimiento y para
esto se implementan los ensayos de dureza rockwell B, C y nanoindentación.
Además se calcula el valor de la resistencia al desgate mecánico por medio de un
ensayo de pin on disc, midiendo el surco realizado por este ensayo a través de la
profilometría.
• Determinación de la biocompatibilidad: Esta caracterización se realiza a

través de una técnica de tinción con azul de tripán, determinando así un análisis
cuantitativo de la citotoxicidad del material por medio de un protocolo de viabilidad
celular.
49
6.2. RESUMEN DE PROCESOS REALIZADOS
En el cuadro 3 se presenta un resumen de las etapas desarrolladas en este

proyecto, iniciando con la preparación de substratos, seguido por la elaboración de
los recubrimientos y finalmente su caracterización respectiva.
Cuadro 3: Resumen de los procesos de preparación del sustrato, recubrimiento y

su caracterización.
PROCESOS MATERIALES EQUIPOS

Preparación de • Piezas
• Cámara de lavado
sustratos-piezas a • Alcohol isopropílico
• Equipo de ultrasonido
recubrir • Acetona
• Piezas
• Blanco de Titanio,
Carbono, Tungsteno y
• Equipo de deposición de
Elaboración de Silicio.
pulverización catódica
recubrimientos • Sustrato de Acero
"Magnetrón Sputtering RF"
Inoxidable 316
• Cilindro de gas de alta
pureza Argón
• Equipos de
• Bola indentadora de espectroscopía Raman
Alúmina • Equipo de
• Bola indentadora de nanoindentación
Caracterización del
Carburo de Tungsteno • Equipo de durezas
proceso
• Indentador de punta de Rockwell B y C
diamante • Equipo de Pin on Disc
• Alcohol isopropílico • Equipo de Rayado Scrach
• Equipo de Ultrasonido
6.3. PREPARACIÓN DEL SUSTRATO
6.3.1. Corte y preparación de sustrato de AISI-316
Inicialmente se realizó el corte a nivel transversal de una barra de AISI-316 de

modo tal que se obtuvo probetas de 2cm x 0,5cm de dimensión, posteriormente se
realizó previamente el proceso de lijado y pulido de las probetas de AISI-316. Este
proceso se utiliza para mitigar el módulo de la rugosidad superficial. Cada probeta
se lijó en agua, pasándolas por lijas desde el número 150 hasta la 1200 de tamaño
de grano, haciendo un giro de 90º en cada lijada para eliminar los elementos
50
degeneradores de la superficie; luego cada probeta fue pulida en la máquina de
paños rotatorios con refrigeración de agua y alúmina como material de pulido final
por su característica abrasiva. En la figura 5 se presentan fotografías de esta
etapa del proceso de pulido.
El sustrato con mejor calidad de pulido, fue introducido en baquelita, para realizar
un estudio de metalografía.
Figura 5: Proceso de preparación de sustrato de AISI-316 (A), corte de sustratos

(B), sustratos después de pulido mecánico por medio de lijas desde 80 hasta 1200
(C), pulido tipo espejo por medio de paños (D), sustrato con efecto tipo espejo
superficial (E) y esterilización de sustrato con alcohol isopropílico (F).
Fuente: Máquina cortadora industrial y equipo de paños PHOENIX BETA, Laboratorio de

Materiales de la Universidad Autónoma de Occidente.
51
6.3.2. Caracterización metalográfica de sustrato de AISI-316
Con el objetivo de conocer la estructura exacta del material AISI-316 y lograr

relacionarlo con las propiedades físicas, se determinó realizar el ensayo
metalográfico de este. Un punto importante a tener en cuenta dentro del proceso
de preparación de las muestras es que el pulido de las superficies debe tener la
mejor calidad posible para evitar la pasividad del metal, sabiendo que el análisis
se realiza por medio de microscopio el cual utiliza la luz reflejada por el material.
Dentro del protocolo asignado para la realización del ataque metalográfico sobre el
AISI-316, se utilizó una solución preparada con: Acido clorhídrico (HCl) a 1,2ml,
acido nítrico (HNO3) a 0,5ml y agua (H2O) 8,3ml conocida como agua regia de
color amarillo; Esta solución posee una alta capacidad corrosiva y fumante debido
al compuesto (HCl), el cual genera humos de color amarillo que son altamente
tóxicos, como se muestra en la figura 6.
Figura 6: Solución de Agua Regia.
Fuente: Solución, Laboratorio de Química Universidad Autónoma de Occidente.
La metodología que se utilizó para el ensayo metalográfico de las probetas de

AISI-316 está cobijada por la norma (ASTM E 112) la cual constituye y determina
cada proceso de preparación de muestras y ensayos respecto a los análisis de
estructuras e historia de los materiales. En primera instancia las muestras
estuvieron expuestas a calor a través de un secador industrial, con el objetivo de
elevar temperatura superficial de las mismas y así al realizar la inmersión de las
probetas en la solución preparada catalizar el proceso de oxidación; el tiempo de
exposición de las probetas al secador fue aproximadamente de 3min a una
distancia de la boquilla de 2cm, la duración de la probetas calentadas en el agua
regia fue de 40seg.
52
6.3.3. Esterilización e introducción de sustratos AISI-316 en material
baquelita
Finalmente en este proceso se realiza un último lavado superficial por medio de

ultrasonido, para liberar la probeta de impurezas antes de ser introducida en la
cámara de vacío. Ver figura 7.
Figura 7: Probetas sumergidas en alcohol isopropílico (A) y Equipo de lavado por

ultrasonido COLE PARMER 8890 (B).
Fuente: Equipo de ultrasonido, Laboratorio de Materiales Universidad Autónoma de Occidente.
En la figura 8 se presenta una fotografía del equipo utilizado para moldear las
probetas en baquelita.
Figura 8: Máquina montadora de probetas BUEHLER (A) y Probetas de AISI-316

en molde de baquelita (B).
Fuente: Equipo baquelador, Laboratorio de Física de la Pontificia Universidad Javeriana de Cali.
53
6.3.4. Toma de durezas tipo rockwell B y C a sustrato de AISI-316
Posteriormente se midió la dureza a las muestras, donde los equipos utilizados se

presentan en las figuras 9 y 10. Los parámetros de medición de las durezas se
establecen en el cuadro 4.
En el cuadro 4 que se presenta a continuación, se ilustran las cargas y las

precargas empleadas en la toma de mediciones tipo rockwell B y C que se
realizaron al sustrato de AISI-316.
Cuadro 4: Parámetros de medición para dureza rockwell B y C.
Rockwell B C
Precarga [Kg] 360 360
Carga [N] 100 150
Figura 9: Durómetro BUEHLER para mediciones tipo rockwell (A) y Sustrato de

AISI-316, con marcas realizadas por equipo de dureza rockwell B y C (B).
Fuente: Equipo durómetro, Laboratorio de Física de la Pontificia Universidad Javeriana de Cali.
54
Figura 10: Microdurómetro BUEHLER (A) y Microscopio óptico OLYMPUS (B).
Fuente: Equipo durómetro y Microscopía binario, Laboratorio de Materiales de la Pontificia

Universidad Javeriana de Cali
6.3.5. Procedimiento experimental para la realización de monocapas de Si-

DLC y W-DLC
A continuación, en el cuadro 5 se presentan los parámetros utilizados para la

fabricación de las muestras en el equipo de Pulverización catódica.
Cuadro 5: Matriz experimental de las condiciones de deposición.
Sustrato Presión Temperatura Potencia Distancia Tiempo

Película Gas
N° [mBar] [°C] [W] T-B [cm] [min]
-2 -
Si-DLC 1 1,5 X10^ 400+/-1 100 Ar 5 120
-2 -
Si-DLC 2 1 X10^ 400+/-1 60 Ar 5 120
-2 -
Si-DLC 3 1 X10^ 100+/-1 50 Ar 5 120
-2 -
W-DLC 4 1,5 X10^ 400+/-1 100 Ar 5 120
-2 -
W-DLC 5 1 X10^ 400+/-1 60 Ar 5 120
-2 -
W-DLC 6 1 X10^ 100+/-1 50 Ar 5 120
El procedimiento experimental referente al crecimiento de los recubrimientos duros

de Si-DLC y W-DLC sobre el sustrato de acero inoxidable 316, se encuentra
detallado en el anexo A.
55
6.3.5.1. Equipo para la producción de los recubrimientos
En la figura 11 se presenta una fotografía del sistema de pulverización catódica

por radio frecuencia sputtering RF, ubicado en el Laboratorio de Física de Bajas
Temperaturas FISBATEM de la Universidad del Cauca, Popayán. En la figura 12
se presenta una fotografía del equipo en pleno proceso de fabricación de las
muestras, donde se puede identificar claramente el plasma formado.
Figura 11: Equipo de deposición - Sputtering R.F.
Fuente: Maquina de Sputtering RF, Laboratorio de Física de Bajas Temperaturas, Universidad del
Cauca.
Figura 12: Cámara de vacío sputtering RF (A) y Proceso de generación de plasma

y deposición de películas (B).
Fuente: Cámara de vacío de Sputtering RF, Laboratorio de Fisca de Bajas Temperaturas,

Universidad del Cauca.
56
6.3.6. Espectroscopía raman
Es una técnica de tipo fotónica que posee alta resolución lo cual proporciona en un
corto periodo de tiempo información química y estructural de los materiales
permitiendo así su identificación. La fundamentación del análisis de
espectroscopía raman está basada en un fenómeno conocido como raman el cual
se refiere a la inelasticidad de dispersión de la luz cuyo objetivo es el estudio de
rotaciones y vibraciones a nivel molecular, este fenómeno se alimenta del principio
físico de la dispersión de la luz, cuando sobre el material incide un haz de luz
monocromática36.
El rayo incidente posee una frecuencia de incidencia, cuando se hacen exámenes

comparativos que relacionan las frecuencias de entrada con las frecuencias de
salida o dispersadas para determinar el tipo de fenómeno, teniendo en cuenta que
si la luz dispersada presenta la misma frecuencia que la luz incidente se denomina
dispersión Rayleigh y este tipo de fenómeno no arroja ningún tipo de información
acerca de la composición de la muestra del material analizado. La luz dispersada
que presenta cambios en su frecuencia respecto a la radiación de la luz incidente,
es aquella que proporciona información de interés sobre la composición molecular
de la muestra conociendo este fenómeno como dispersión raman.
En la caracterización de materiales carbono tipo diamante se puede implementar

la espectroscopía raman para la evaluación del contenido de enlaces tetrahedrales
en las películas basadas en carbono, en vista que existen diferencias en las
propiedades de los materiales diamante, grafito, fullereno, nanotubos y carbono
tipo diamante debido a la capacidad que tiene el carbono para hibridizar en forma
tetrahedral (sp3), trigonal (sp2) o lineal (sp1).
En la figura 13 se muestra el equipo de espectroscopia raman utilizado para la

realización de los espectros de las monocapas de Si-DLC y W-DLC.
36
GARCÍA, L., Crecimiento y caracterización de películas de CdTe:Cu. Instituto Politécnico
Nacional. ALTAMIRA: TAMPS. Tesis. 2007, p. 1 - 64
57
Figura 13: Equipo para análisis de espectroscopía raman (A) y Microscopio
DIVISION equipo raman (B).
Fuente: Equipo análisis espectroscopía raman, Laboratorio de Propiedades Ópticas de los

Materiales, Universidad Nacional de Colombia sede Manizales.
En el cuadro 6 se presentan los parámetros utilizados para la caracterización

raman de las monocapas de Si-DLC y W-DLC obtenidas. Este ensayo fue
implementado para identificar la ubicación de las bandas para material grafito y
diamante (G y D) respectivamente; estas últimas determinan qué tipo de
hibridación se presentó dentro del recubrimiento con el material carbono,
esperando que dichas bandas fuesen de diamante tipo carbono caracterizado por
grandes concentraciones de enlaces sp3.
Cuadro 6: Parámetros de medición de espectros raman para películas de Si-DLC

y W-DLC.
Exposición (s) 15 Hole 1000

Acumulación 1 Slit 500
Láser 473nm Operador JES
Espectro Múltiple Muestra Si-DLC y W-DLC
Remark 300-1800 Potencia 22mW
58
6.3.7. Pin on disc y profilometría
Aspectos como: coeficiente de fricción, de deslizamiento y resistencia al desgaste

de las superficies son medidos a través de la técnica pin on disc. Se implementa
un pin indentador de distintos materiales el cual está ligado a una carga a nivel
transversal que se apoya sobre la superficie del material a evaluar; de este modo
se mide el nivel de rugosidad, el equipo para el ensayo pin on disc se muestra en
la figura 14A.
El pin indentador es una esfera por lo general de materiales con una alta dureza,
alta rugosidad y coeficiente de fricción elevados, sin embargo dicho indentador,
puede ser de cualquier geometría, que emule la aplicación efectiva de una carga
transversal contra la superficie del sustrato. La celda de carga se adjunta a la
clavija en el disco probador rotatorio; esta celda se utiliza para medir la evolución
en tiempo del coeficiente de fricción con respecto al deslizamiento entre la bola
indentadora y la superficie del sustrato dando el estimado en fricción dependiendo
de la distancia radial recorrida por el pin.
La técnica de profilometría, es implementada para medir la rugosidad superficial

del material y la profundidad del surco realizada por la técnica de pin on disc,
dicha medición superficial es realizada por una punta fina de diamante de manera
mecánica, la cual recorre la longitud total del surco y utilizando un láser de
precisión realiza los cálculos de profundidad y nivel de desgaste superficial
producido al material por el pin indentador.
Por medio de este sistema de medición, en la figura 14B se muestra el equipo

utilizado para profilometría con el que se puede realizar un cálculo estimado del
espesor de películas delgadas depositadas en la superficie del sustrato, por medio
de diferencias entre alturas de los distintos niveles superficiales; dicha medición
superficial puede ser efectuada a cualquier tipo de material ya que es una técnica
de caracterización superficial no destructiva.
59
Figura 14: Equipo para ensayo de desgaste pin on disc (A) y Equipo para ensayo
de profilometría (B).
Fuente: Equipo Tribometer CSECO y Tecnology AMBROS XP-2, Laboratorio de Recubrimientos

Duros y Aplicaciones Industriales, Universidad del Valle.
En el cuadro 7 se presentan los parámetros implementados en la prueba realizada

a las monocapas de Si-DLC y W-DLC, utilizando la técnica de degaste superficial
pin on disc.
Cuadro 7: Parámetros empleados para la realización de la técnica de pin on disc.
CARGA VELOCIDAD RADIO DISTANCIA INDENTADOR

PROBETA
(N) (cm/s) (mm) (m) (mm)
Si-DLC 1 10 3 5 7 50 Al2O3 WC-Co
W-DLC 1 10 3 5 7 50 Al2O3 WC-Co
AISI-316 1 10 3 5 7 50 Al2O3 WC-Co
6.3.8. Nanoindentación
Esta es una técnica que permite identificar con una gran precisión la dureza de las
películas depositadas en el material, encontrando su módulo de elasticidad
(módulo young), el equipo con que se realizó la prueba se muestra en la figura 15.
Es una técnica muy parecida al proceso de indentación vickers, al igual que esta
se definen dos procesos fundamentales la carga y descarga del sistema variando
parámetros como desplazamiento y profundidad.
60
El indentador se programa para incrementar una carga (P) desde una carga inicial
igual a cero (0mN), en el punto de contacto inicial en la superficie, hasta una carga
máxima en el punto final, e induciendo un desplazamiento horizontal (H) de la
indentación hasta un (H) máximo, produciéndose una deformación fuera del área
de contacto entre el sustrato y la superficie, donde el desplazamiento de contacto
de la superficie en el primer contacto es denotado por (Hs), teniendo en
consideración la distancia de la profundidad (Hc), desde el nivel del perímetro del
área de contacto y el vértice de la indentación en (H) máximo.
Cuando el sistema se lleva al máximo valor (P máximo) de carga, preestablecido

en el proceso, el movimiento es revertido y el indentador se mueve hacia afuera
de este proceso. Se pueden tener en cuenta los siguientes procesos:
• El diámetro de la impresión de contacto de la superficie.
• El identador debe ser cargado y descargado en poco tiempo, es decir una

cantidad limitada de plasticidad algunas veces ocurre en cada una de las primeras
cargas y descargas del sistema.
• Los efectos de indentación no rígidos sobre el comportamiento carga

desplazamiento pueden ser efectivamente considerados por la definición de un
módulo de young reducido.
Figura 15. Equipo para ensayo de nanoindentación
Fuente: Equipo ensayo nanoindentación NANOVEA, Laboratorio de Recubrimientos Duros y

Aplicaciones Industriales, Universidad del Valle.
61
A continuación se muestra en el cuadro 13 en la página 86, los valores de espesor
que se calcularon basados en la rata de deposición de cada unos de los
materiales que componen el recubrimiento utilizando la ecuación [2]. Este cálculo
es de vital importancia si se piensa realizar un análisis superficial de las películas
a través de un ensayo de nanoindentación como en este caso, ya que con esta
información se determinaron las cargas inmediatas que se aplicaron sobre los
sustratos recubiertos para medir las durezas del material.
En el cuadro 8 que se presenta a continuación se muestran los parámetros de

carga y numero de indentaciones realizadas a las monocapas de W-DLC y Si-DLC
realizadas con la técnica de nanoindentación.
Cuadro 8: Parámetros de carga empleados en nanoindentación.
CARGA N°
[mN] INDENTACIONES
1,5 16
6.4. TÉCNICAS PARA EL DIAGNÓSTICO CITOTÓXICO.
6.4.1. Viabilidad celular.
Esta es una prueba experimental de respuesta inmediata en corto tiempo que usa
azul de tripán como medio de tinción; de este modo se mide la biocompatibilidad
de los materiales a través del seguimiento del comportamiento de las células
(linfocitos) al ser expuestas a dichos materiales durante un periodo de 3 días
consecutivos, evaluando aspectos que relacionan la membrana citoplasmática en
cuanto a su rompimiento y cambio de morfología en el momento en que el
colorante penetra la célula, para determinar índices de viabilidad celular37,38.
Para tener un mayor entendimiento de la técnica de viabilidad celular es pertinente

referirse al anexo C, en el cual se detalla el protocolo experimental para la
37
GALEANO, A., GUTIÉRREZ T., Estandarización de dos técnicas para evaluar actividad y
viabilidad celular in vitro en repuesta a biomateriales. Tesis. Universidad Autónoma de Occidente.
2009.
38
FRESHNEY, R., Cultures of animal cells. A manual of basic techniques.5. ed. USA: Wiley-Liss. p.
359 - 373.
62
realización del cultivo celular con linfocitos y exposición a los materiales en
evaluación. Además, se puede encontrar en el anexo B, el consentimiento
informado, documento que es necesario redactar para llevar a cabo cualquier tipo
de prueba biológica que involucre seres humanos. En la figura 8 se presenta una
serie de fotografías que ilustran el proceso de preparación del paciente y toma de
muestras.
En la figura 16 se presenta parte del proceso de extracción de sangre periférica,

en la figura 17 se presenta una fotografía del equipo de centrifugación utilizado. En
la figura 19 se encuentran los tubos de eppendorf con polvo de azul de tripán. En
la figura 18 se presentan las fotografías que corresponden al proceso de
centrifugación y mezcla de linfocitos con antibióticos y RPMI.
Figura 16: Preparación de paciente para venopunción (A), Extracción de sangre

por venopunción (B), Tubos al vacío con sangre periférica (C) y Micropipetas de
100µl y 1000µl.
Fuente: Extracción por venopunción, Laboratorio de Ciencias Biomédicas Universidad Autónoma

de Occidente.
63
Figura 17: Equipo de centrifugación UNIVERSAL 32 R (A) y Base rotatoria para
centrifugación de equipo UNIVERSAL 32 R (B).
Fuente: Equipo de centrifugación, Laboratorio de Ciencias Biomédicas Universidad Autónoma de

Occidente.
Figura 18: Tubos de eppendorf con polvo de azul de tripán (A) y Cajas de ensayo
con fosfatos (B).
Fuente: Cajas y tubos eppendorf, Laboratorio de Ciencias Biomédicas Universidad Autónoma de

Occidente.
64
Figura 19: Separación centrifugada (A), Tubo de ensayo después de segundo
lavado de linfocitos (B), Preparación de antibióticos (C), Mezcla de linfocitos con
antibióticos y RPMI, introducción de linfocitos en cámara de CO2 y extracción de
linfocitos para conteo.
Fuente: Báscula digital SANTORIUS CP224S y Cámara de CO2 GASPAK SYSTEM, Laboratorio
de Ciencias Biomédica Universidad Autónoma de Occidente.
65
7. ANÁLISIS Y RESULTADOS
7.1. CARACTERIZACIÓN DEL SUSTRATO DE AISI-316
7.1.1. Análisis metalográfico
El siguiente capítulo muestra el procedimiento experimental tenido en cuenta para

el desarrollo del proyecto en cada una de las etapas de preparación y
caracterización de las muestras obtenidas.
Las figuras 20 y 21 contienen los resultados de las micrografías del ensayo de

metalografía realizado al acero inoxidable.
Figura 20: Análisis metalográfico de tres sustratos de AISI-316 a una resolución

de 200X de aumento.
Fuente: Imágenes metalografías, Laboratorio de Materiales, Universidad Autónoma de Occidente.
66
Figura 21: Análisis metalográfico de tres sustratos de AISI-316 a una resolución
de 500 X de aumento.
Fuente: Imágenes metalografías, Laboratorio de Materiales, Universidad Autónoma de Occidente.
Las micrografías tomadas a las muestras después del ataque metalográfico,

confirman que el material es un acero inoxidable 316, según la distribución de la
austenita. Además, se puede visualizar que el material presenta ciertas
cantidades de inclusiones no metálicas (impurezas)39.
En las tres muestras se puede determinar que la cantidad de impurezas varía

dependiendo de la sección transversal que se analiza del material, ya que dichas
muestras fueron tomadas aleatoriamente de los diferentes cortes realizados al
material.
39
RODRÍGUEZ; Op. cit., p. 4
67
7.1.2. Análisis de dureza tipo rockwell B y C
A continuación se presentan los resultados de los valores tomados respecto a

dureza tipo rockwell (B y C)40, realizados sobre la superficie del sustrato de AISI-
316 usando el equipo mostrado en la figura 9A en la página 54:
Los valores encontrados para las durezas del AISI-316, están dentro de los
parámetros normales arrojados por las tablas de durezas que reportan las
referencias en las tablas de ASTM E 140-97 para los aceros, los cuales se
encuentran en 84HRB y 20HRC.
A continuación en los cuadros 9 Y 10 se presentan los resultados obtenidos

mediante el ensayo rockwell tipo B y C al sustrato de AISI-316
Cuadro 9: Dureza Rockwell tipo B.
ROCKWELL B Precarga Carga

[HRB] [Kg] [N]
96.7
98.5
97.3 360 100
98.6
96.9
Promedio = 97.6
Cuadro 10: Dureza Rockwell tipo C.
ROCKWELL C Precarga Carga

[HRC] [Kg] [N]
19,9
20,6
20,7 360 150
21
20,3
Promedio = 20,5
40
ASKELAND. D; La Ciencia e Ingeniería de los Materiales. Grupo Ed. Iberoamérica, México, 1985
68
7.2. CARACTERIZACIÓN DE LAS PELÍCULAS EN MONOCAPAS
7.2.1. Caracterización de las películas en monocapa de Si-DLC y W-DLC
A continuación en la figura 22, se presenta las fotografías de la interlayer de Ti y

las monocapas de Si-DLC y W-DLC obtenidas mediante la implementación del
sistema de pulverización catódica por radio frecuencia (sputtering R.F.).
Figura 22: Recubrimiento de W-DLC, sobre sustratos de vidrio y AISI-316 con

baja adherencia película sustrato (A), Sustrato de AISI-316 con película (interlayer
Ti) de titanio (B), Sustrato AISI-316 con monocapa de Ti/W-DLC (C) y Sustrato
AISI-316 con monocapa de Ti/Si-DLC (D).
69
7.2.1.1. Análisis por espectroscopía raman
Las figuras 23, 24 y 25 presentan los espectros raman obtenidos de las

monocapas de Si-DLC.
Figura 23: Sustrato N° 1, Espectro Raman película de Si-DLC.


70

Materiales, Universidad Nacional de Colombia sede Manizales
7.2.1.1.1. Interpretación de picos raman en recubrimiento de Si-DLC.
• En la figura 23, se puede visualizar que las bandas de D y G se encuentran

ubicadas en un rango entre 1360cm-1 y 1580cm-1, presentándose una mayor
concentración de material grafítico lo cual se traduce en una concentración más
elevada de enlaces sp2.

concentración de material grafítico lo cual se traduce en una concentración más

concentración de material diamante lo cual se traduce en una concentración más
71
Las figuras 26, 27 y 28 presentan los espectros raman obtenidos de las
monocapas de W-DLC.
Figura 26: Sustrato N° 4, Espectro Raman película de W-DLC.


72

7.2.1.1.2. Interpretación de picos raman en recubrimiento de W-DLC

concentración de material diamante lo cual se traduce en una concentración más
• En la figura 27, se puede visualizar que las bandas de D y G, se encuentran

ubicadas en un rango entre 1390cm-1 y 1580cm-1, presentándose concentraciones
muy similares de material grafítico y diamante lo cual es traducido en
concentraciones muy similares de enlaces sp2 y sp3.

concentración de material grafítico, lo cual se traduce en una concentración más
En ambos dopajes, tanto para Si-DLC41 como para W-DLC42 se puede afirmar que
hubo un crecimiento de una capa de material DLC que está ligada a los valores
41
BABA, K., et al. Deposition of silicon-containing diamond-like carbon films by plasma-enhanced
chemical vapour deposition. Surface & Coatings Technology. 2009. Vol. 203, p. 2747–2750.
73
que arrojan los picos en las bandas D y G de los espectros de raman los cuales
coinciden con los parámetros característicos que reportan experimentalmente
otros autores43,44.
7.2.1.2. Análisis por pin on disc y profilometría
En las figuras 29 y 30 se presentan las curvas de rugosidad obtenidas para las

muestras de Si-DLC y W-DLC respectivamente.
Figura 29: Curva de rugosidad promedio para la película de Si-DLC.
Fuente: Equipo de tribómetria, Laboratorio de Recubrimientos Duros y Aplicaciones Industriales,

Universidad del Valle.
42
TAKENO, Op. cit., p. 7.
43
MIN, Z., et al. Effect of substrate morphology on the roughness evolution of ultra thin DLC films.
Applied Surface Science. 2008. Vol. 254, p. 6742–6748.
44
MANZANO, R., Use of diamond-like carbon with tungsten (W-DLC) films as biocompatible
material. Surface & Coatings Technology. 2008. Vol. 202 p. 2813 – 2816.
74
Figura 30: Curva de rugosidad promedio para la película de W-DLC.

Las curvas mostradas en las figuras 29 y 30 muestran los valores de coeficiente

de rugosidad encontrados para las películas de W-DLC y Si-DLC. Los cuales
están de acuerdo con recubrimientos de sistemas duros como WC/C45 trabajados
por otros investigadores, los valores de rugosidad se establecieron dentro del
rango promedio [23nm y 28nm]. Estos valores de rugosidad son altos teniendo en
cuenta que se trabajó con una matriz de material carbono la cual con la hibridación
en DLC se caracteriza por mantener una rugosidad baja, en este caso la alta
rugosidad obtenida se debe probablemente a que hubo altas concentraciones de
silicio en el sistema durante la deposición, haciendo que la relación ID/IG46 respecto
a las bandas grafito y diamante, disminuyendo también el numero de enlaces sp3.
En las figuras 31 y 32 se presentan los resultados de coeficiente de fricción de las

muestras obtenidas.
45
NIETO, J.; Comportamiento por contacto esférico de dos sistemas con recubrimientos WC/C bajo
cargas monotonicas y cíclicas. Noviembre, 2007.
46
BABA, K. et al; Deposition of silicon-containing diamond-like carbon films by plasma-enhanced
chemical vapour deposition. Surface & Coatings Technology.2009. Vol. 203 p. 2747–2750.
75
Figura 31: Comparación de los coeficientes de fricción en función de la distancia
de deslizamiento para AISI-316, W-DLC y Si-DLC utilizando pin indentador de
Al2O3 en un recorrido de 50m con una carga transversal de 1N.
Fuente: Equipo de pin on disc, Laboratorio de Recubrimientos Duros y Aplicaciones Industriales,

Figura 32: Comparación de los coeficientes de fricción en función de la distancia

de deslizamiento para AISI-316, W-DLC y Si-DLC utilizando pin indentador de
WC-Co en un recorrido de 50m con una carga transversal de 1N.
Fuente: Equipo de pin on disc, Laboratorio de Recubrimientos Duros y Aplicaciones Industriales,

76
Para este ensayo de resistencia al desgaste, se decidió tener en cuenta distancias
de 50m para el análisis, con el objetivo de observar el comportamiento de las
películas de DLC dopadas con W y Si; en vista que el espesor de estas no es lo
suficientemente grande como para tener un tiempo de vida amplio respecto a la
prueba. Además, la capa de titanio sobre la cual están depositadas las monocapas
anteriores, no posee propiedades tribológicas tan buenas como las de W-DLC y
Si-DLC lo que explica por qué los coeficientes de fricción registrados en la curvas
de las figura 31 y 32 para estos materiales inician en valores muy bajos y después
de un tiempo tienden a aumentar, alcanzando valores que no superan los del AISI-
316 sin recubrimiento.
En las pruebas de nanoindentación, las películas del recubrimiento no mostraron

módulos de dureza muy altos, pero se encontraron valores muy buenos de
coeficiente de fricción respecto a los resultados arrojados por el sustrato AISI-316
sin recubrimiento el cual tuvo un coeficiente de fricción entre 0,4µ y 0,7µ utilizando
pin indentador de WC dentro de un recorrido de 50m y valores entre 0,4µ y 1µ
para mediciones con pin indentador de alúmina (Al2O3) en el mismo recorrido;
mientras que los sustratos con recubrimiento de W-DLC y Si-DLC tuvieron valores
entre 0,2µ y 0,3µ respectivamente, para el mismo recorrido de 50m, lo que indica
que hubo un incremento en la resistencia al desgaste en seco para los sustratos
de AISI-316 que se recubrieron con W-DLC y Si-DLC.
Desde la figura 33 hasta la 40 se presentan las tendencias de las curvas de

profilometría, realizadas a los surcos que se obtuvieron anteriormente con los
ensayos de pin on disc. Este análisis se realizó para determinar las dimensiones
de los surcos en función de la profundidad y ancho; estos valores sirven como
apoyo para fortalecer el argumento que los recubrimientos de películas delgadas
como W-DLC y Si-DLC generan un incremento en la resistencia superficial
(desgaste).
77
Figura 33: Profundidad de surco generado al sustrato de AISI-316, con pin
indentador de Al2O3, a una distancia de recorrido de 50m y carga transversal de
1N (A) e imagen tomada del surco a 100X (B).
Fuente: Equipo de tribómetria y nanoindentación, Laboratorio de Recubrimientos Duros y

En la curva de profilometría de la figura 33 se puede ver un surco de grandes

dimensiones [6500nm x 450µm], lo que indica que el ensayo de pin on disc causó
gran daño sobre el sustrato de AISI-316 como se visualiza en la imagen B.
78
Figura 34: Profundidad de surco generado a la película de Si-DLC, con pin
1N (A), imagen tomada del surco de Si-DLC a 100X (B) e imagen tomada del
surco de Si-DLC a 500X (C).

En la curva de profilometría de la figura 34 se puede ver un surco de menores

dimensiones [350nm x 250µm], lo que indica que el daño causado por el ensayo
de pin on disc con indentador de Al2O3 disminuyó notablemente sobre el sustrato
de AISI-316 con recubrimiento de monocapa Si-DLC, como se visualiza en la
imagen B y C.
79
Figura 35: Profundidad de surco generado a la película de W-DLC, con pin
1N (A), imagen tomada del surco de W-DLC a 100X (B) e imagen tomada del
surco de W-DLC a 500X (C).


de pin on disc con indentador de Al2O3 disminuyó notablemente sobre el sustrato
de AISI-316 con recubrimiento de monocapa W-DLC, como se visualiza en la
imagen B y C.
80
Figura 36: Profundidad de surco generado al sustrato de AISI-316, con pin
indentador de WC-Co, a una distancia de recorrido de 50m y carga transversal de
1N (A) e imagen tomada del surco de AISI-316 a 100X (B).

En la curva de profilometría de la figura 36 se puede ver un surco de grandes

dimensiones [6500nm x 450µm], lo que indica que el ensayo de pin on disc causó
gran daño sobre el sustrato de AISI-316 como se visualiza en la imagen B.
81
Figura 37: Profundidad de surco generado a la película de Si-DLC, con pin
1N (A), imagen tomada del surco de Si-DLC a 100X (B) e imagen tomada del
surco de Si-DLC a 500X (C).


de pin on disc con indentador de WC disminuyó notablemente sobre el sustrato de
AISI-316 con recubrimiento de monocapa Si-DLC, como se visualiza en la imagen
B y C.
82
Figura 38: Profundidad de surco generado a la película de W-DLC, con pin
1N (A), imagen tomada del surco de W-DLC a 100X e imagen tomada del surco de
W-DLC a 500X (C).


de pin on disc con indentador de WC disminuyó notablemente sobre el sustrato de
AISI-316 con recubrimiento de monocapa W-DLC, como se visualiza en la imagen
B y C.
En la figura 39 se presenta una comparación directa entre surcos generados al

sustrato de AISI-316, películas delgadas de W-DLC y Si-DLC.
83
Figura 39: Comparación entre surcos generados al sustrato de AISI-316, películas
delgadas de W-DLC y Si-DLC, con pin indentador de Al2O3, a una distancia de
recorrido de 50m y carga transversal de 1N.

Figura 40: Comparación directa entre surcos generados al sustrato de AISI-316,

películas delgadas de W-DLC y Si-DLC, con pin indentador de WC-Co, a una
distancia de recorrido de 50m y carga transversal de 1N.

84
Los resultados arrojados por el ensayo de profilometría a los surcos que se
generaron durante la prueba de pin on disc, fueron útiles para el análisis de
coeficiente de fricción y niveles de dureza respecto al sustrato sin y con
recubrimiento. Las figuras 39 y 40 muestran el cotejo de las curvas de
profilometría para resultados tomados con indentador de alúmina y carburo de
tungsteno; allí se puede observar de manera clara que el sustrato de acero
inoxidable 316 tiene un mejor comportamiento tribológico al estar recubierto con
estructuras tipo monocapa de materiales Si-DLC y W-DLC, manteniendo además
bajos coeficientes de fricción y durezas suficientes para potenciar las propiedades
de la superficie de este acero.
Los cuadros 11 y 12 reportan los parámetros de evaluación utilizados en el ensayo

de pin on disc y los resultados de la tasa de desgaste por parte de cada muestra;
donde se nota una disminución en la tasa de desgaste calculada con la ecuación
[1] de los sustratos cuya superficie fue recubierta con Si-DLC y W-DLC.
Area ( mm 2 ) * Surco ( mm )
k=
C arg a ( N ) * Dis tan cia ( m )
[1]
Volumen ( mm 3 )
k=
C arg a ( N ) * Dis tan cia ( m )
Cuadro 11: Tasa de desgaste pin indentador de Al2O3 6mm diámetro.
Volumen Carga Velocidad Distancia Tasa Desgaste

Probeta 3 3
(mm ) (N) (cm/s) (m) k (mm /Nm)
-04 -05
Si-DLC 7,50E 1 10 50 1,50E
-04 -05
W-DLC 7,53E 1 10 50 1,51E
-02 -03
AISI-316 5,18E 1 10 50 1,04E
Cuadro 12: Tasa de desgaste pin indentador de WC-Co 6mm diámetro.
Volumen Carga Velocidad Distanci Tasa Desgaste

Probeta 3 3
(mm ) (N) (cm/s) a (m) k (mm /Nm)
-03 -05
Si-DLC 1,38E 1 10 50 2,76E
-03 -05
W-DLC 2,26E 1 10 50 4,52E
-02 -04
AISI-316 2,39E 1 10 50 4,78E
85
Figura 41: Tasa comparativa, desgaste de películas Si-DLC y W-DLC entre pin
indentador Al2O3 y WC-Co.
En la figura 41 se muestra una comparación entre el volumen desgastado en la

superficie las muestras obteniendo un dato de la capacidad de resistencia de
ambos materiales (W-DLC y Si-DLC) con los distintos indentadores de Al2O3 y
WC-Co. El resultado encontrado registra mejores propiedades para la muestra de
Si-DLC con el indentador de WC-Co y el mismo nivel de volumen desgastado para
las dos muestras respecto al indentador de Al2O3.
7.2.1.3. Análisis por nanoindentación
Los resultados de los espesores calculados teóricamente y experimentalmente se

reportan en esta etapa del capítulo de análisis y resultados, teniendo en cuenta la
ecuación [2] nombrada en la metodología experimental.
Para el desarrollo de las pruebas de nanoindentación se realizaron 16 mediciones

en diferentes áreas de la superficie de la probeta para identificar un valor de
dureza estadísticamente confiable. Todos los valores y resultados de estas
durezas se reportan mas adelante.
Espesor = Cantidad _ Material ( nm) * Minuto [2]
86
Cuadro 13: Espesores calculados por rata de deposición para las películas de W-
DLC y Si-DLC.
ESPESOR
MUESTRA
[nm]
Si-DLC 700
W-DLC 700
Teniendo en cuenta los espesores calculados teóricamente, se decidió hacer una

confirmación de los mismos para las películas de SI-DLC y W-DLC por medio de
un análisis de profilometría, encontrando poros y surcos naturales que se crearon
durante el proceso de deposición debido a la no homogeneidad del recubrimiento;
de este modo utilizando esta técnica de profilometría se logro medir
experimentalmente la profundidad del surco para determinar el espesor de la
película delgada, que se registra en la figura 42.
Figura 42: Espesor de las películas de Si-DLC y W-DLC.

87
Para la medición de durezas sobre las películas de W-DLC y Si-DLC, se usó el
equipo de nanoindentación NANOVEA, aplicando cargas de 1,5mN para cada
una; dichas cargas fueron estimadas teniendo en cuenta el análisis anterior
respecto a los espesores de cada recubrimiento. Los módulos de dureza se
reportan en el cuadro 14, donde los valores obtenidos para estas durezas no
fueron tan altos como se esperaba, aunque la explicación de esto radica en que se
creció un recubrimiento en forma de monocapa con espesores no muy altos y
concentraciones de enlaces sp3 bajas.
Cuadro 14: Comparación de tasa de desgaste, dureza y módulo de young de las

películas de Si-DLC y W-DLC teniendo en cuenta el pin indentador utilizado.
Contraparte Tasa de Módulo Resistencia a la

Dureza H Rugosidad
Recubrimiento (bola 6mm Desgaste Young E Deformación
3 (GPa) 3 2 Ra (nm)
diámetro) (mm /N*m) (GPa) Plástica (H /E )
-05
Si-DLC Al2O3 1,50E 11,79 121,20 0,11156 28
-05
W-DLC Al2O3 1,51E 10,90 107,40 0,11227 23
-05
Si-DLC WC 2,76E 11,79 121,20 0,11156 28
-05
W-DLC WC 4,52E 10,90 107,40 0,11227 23
Para realizar el cálculo de la resistencia a la deformación plástica, se tuvieron en

cuenta los valores de dureza y el módulo de young de cada película [3].
Dureza 3 (GPa )
Ψ= [3]
Modulo _ Young 2 (GPa)
88
7.2.1.4. Análisis de citotoxicidad
En la figura 43 se presentan fotografías de las matrices de conteo y los resultados

obtenidos mediante el conteo de células (linfocitos) en cada una de las muestras
expuestas al contacto directo con los materiales evaluados en dicho ensayo.
Figura 43: Matriz de conteo cámara de newbauer (A) y (B), Linfocitos viables en 3
días de conteo celular (C), (D) y (E), Linfocito viable y no viable (F) y Linfocitos no
viables (G).
Fuente: Supervivencia celular (linfocitos), Laboratorio de Ciencias Biomédicas, Universidad

Autónoma de Occidente.
En las imágenes anteriores se observan los linfocitos encontrados en el medio de

cultivo expuesto a los distintos materiales en diferentes fases (viables y no viables)
visualizando en estas la estructura de su membrana citoplasmática, la morfología
de su núcleo y el color.
89
Cuadro 15: Matriz experimental de conteo celular (linfocitos).
MUESTRA CUADRANTE CUADRANTE CUADRANTE CUADRANTE NO

TIEMPO MATERIAL TOTAL VIABLES
N° N° 1 N° 2 N° 3 N° 4 VIABLES
0H 1 N/M 109 72 20 50 251 0 251
0H 2 N/M 92 47 16 98 253 0 253
0H 3 N/M 68 81 1 26 176 0 176
0H 4 N/M 15 28 14 15 72 0 72
0H 5 N/M 33 43 51 60 187 0 187
Totales 317 271 102 249 939 0 939
24 H 1 W-DLC 34 23 22 34 113 7 106
24 H 2 Si-DLC 12 6 10 7 35 5 30
24 H 3 AISI-316 50 82 59 53 244 20 224
24 H 4 Fe 13 7 10 8 38 22 16
24 H 5 Ti 13 20 21 15 69 8 61
Totales 122 138 122 117 499 62 437
48 H 1 W-DLC 110 96 87 76 369 99 270
48 H 2 Si-DLC 27 29 36 30 122 39 83
48 H 3 AISI-316 39 34 45 47 165 46 119
48 H 4 Fe 2 7 3 9 21 22 1
48 H 5 Ti 21 41 35 60 157 28 129
Totales 199 207 206 222 834 228 602
72 H 1 W-DLC 101 67 64 82 314 87 227
72 H 2 Si-DLC 51 44 36 52 183 47 136
72 H 3 AISI-316 27 39 29 33 128 39 89
72 H 4 Fe 13 18 7 17 55 44 11
72 H 5 Ti 19 18 25 18 80 12 68
Totales 211 186 161 202 760 222 531
90
Para el análisis estadístico se organizaron los datos de acuerdo al cuadro 15, el
cual contiene el número de linfocitos viables y no viables reportados para cada
muestra durante un periodo de 3 días consecutivos en los que se realizó el conteo.
Adicionalmente se reporta los totales de estos linfocitos para cada una de las
muestras respecto a cada característica que se está evaluando47.
Para determinar la confiabilidad del experimento, se incorporaron a la prueba de

citotoxicidad 3 controles: muestra de Ti como control positivo (a), muestra de AISI-
316 como control positivo (b) y una muestra de hierro con óxido superficial como
control negativo. Estos controles se implementaron dentro del protocolo
experimental para verificar que no hubiera alguna falla durante la realización del
mismo y además, para comparar los resultados de estos con los arrojados por las
muestras de W-DLC y Si-DLC.
En las imágenes mostradas en la figura 44 se presentan los tres controles Ti, AIS-
316 y Fe, que implementados para la realización de la prueba de viabilidad celular.
Figura 44: Control positivo Titanio (A), control positivo AISI-316 (B) y control
negativo Hierro (C).
Se eligió una muestra de Ti como control positivo (a) teniendo en cuenta que es un
material que reporta valores de biocompatibilidad muy altos y que ha sido
implementado a través de la historia en aplicaciones médicas; de igual forma se
hizo la elección del AISI-316 como control positivo (b) por ser un material
austenítico con gran resistencia a la corrosión48, con un recorrido similar al del
titanio respecto a la utilización de este en aplicaciones medicas, además este
47
LÓPEZ, D., Caracterización superficial de acero inoxidable AISI 316 l en contacto con solución
fisiológica simulada. En: congreso CONAME/SAM 2004.
48
CHENG, Z., et al. Low temperature plasma nitrocarburising of AISI 316 austenitic stainless steel.
Surface & Coatings Techology. 2004.
91
último material que se usó como sustrato para la deposición de las películas
delgadas de W-DLC y Si-DLC, lo que sería útil para un análisis más completo de
viabilidad celular y por último se tomó un trozo de material Fe como control
negativo con una superficie cubierta de óxidos de hierro para determinar la
muestra con viabilidad celular nula49.
Siguiendo la metodología adecuada, se realizó un cálculo de viabilidad celular por

medio de porcentajes registrada en las figuras siguientes:
Figura 45: Curvas porcentuales de linfocitos viables expuestos a materiales

durante 3 días.
Cuadro 16: Estadística de linfocitos viables en periodos de 24 horas expuestas a

contacto físico con los materiales a evaluar.
DÍAS 1 2 3
W-DLC 93,80 % 73,17 % 72,29 %
Si-DLC 85,71 % 68,03 % 74,31 %
AISI-316 91,80 % 72,12 % 69,53 %
Fe 42,10 % 4,76 % 20,00 %
Ti 88,40 % 82,16 % 85,00 %
49
DEARNLEY, P. Corrosion-wear mechanisms of hard coated austenitic 316L stainless steel.
Wear. 2004 Vol. 256 p. 491-499.
92
En la figura 45, se puede observar el comportamiento a través del tiempo (3 días)
de cada muestra según el número de linfocitos que se visualizaron como viables;
en donde los porcentajes de estos se plantearon en el cuadro 16 el cual muestra
los porcentajes de viabilidad de las monocapas de W-DLC y Si-DLC, los controles
(a) y (b).
Figura 46: Curvas porcentuales de linfocitos no viables expuestos a materiales

durante 3 días.
Cuadro 17: Estadística de linfocitos no viables en periodos de 24 horas expuestas

a contacto físico con los materiales a evaluar.
DÍAS 1 2 3
W-DLC 6,19 % 26,28 % 26,75 %
Si-DLC 14,28 % 31,96 % 24,59 %
AISI-316 8,91 % 27,87 % 30,46 %
Fe 57,89 % 85,71 % 76,36 %
Ti 11,59 % 17,83 % 15,00 %
En la figura 46, se puede observar el comportamiento a través del tiempo (3 días)

de cada muestra según el número de linfocitos que se visualizaron como no
viables; en donde los porcentajes (cuadro 17) de las muestras de W-DLC y Si-DLC
93
al igual que en la figura anterior siguen un comportamiento similar respecto al de
los controles positivos, convergiendo en algunos puntos.
Cuadro 18: Cuadro comparativo para determinación de viabilidad celular.
TOTAL VIABILIDAD
MUESTRA VIABLES
CÉLULAS CELULAR %
1 W-DLC 603 796 75,75%
2 Si-DLC 249 340 73,24%
3 Control Positivo (b) 432 537 80,45%
4 Control Negativo 28 114 24,56%
5 Control Positivo (a) 258 306 84,31%
Figura 47: Barras de comparación para determinar viabilidad celular en linfocitos

expuestos a material Si-DLC y W-DLC.
Este análisis estadístico recopila las cantidades (cuadro 18) de linfocitos que no
presentaron cambios en la morfología de la membrana citoplasmática lo que indica
que fueron viables durante el periodo de incubación en contacto con los materiales
en estudio; se hizo una relación entre el total de linfocitos viables para cada una
de las muestras, incluyendo los 3 controles y el total de linfocitos contados en esos
3 días, se calculó por medio de la ecuación [4] el porcentaje de viabilidad celular
94
teniendo en cuenta el número de células que no mostraron cambios respecto al
azul de trípan.
N °Celulas _ No _ Activas
Viabilidad (%) = * 100 [4]
Total _ Celulas _ Encontradas
Habiendo obtenido el porcentaje de viabilidad para cada muestra durante todo el

período de incubación, se hace una comparación entre las dos muestras de
material W-DLC, Si- DLC y los controles, para determinar la diferencia porcentual
de la viabilidad celular para estas, como se registra en la figura 47.
Para una mayor especificidad respecto a la información arrojada por cada muestra
del material de manera individual, evaluándose las dos fases (viables y no viables)
se puede observar las imágenes del anexo d.
A partir de este análisis se puede dar un resultado experimental de viabilidad

celular para evaluar biocompatibilidad a través de una prueba citotóxica a los
materiales en cuestión, obteniendo los siguientes resultados:
Cuadro 19: Cotejo muestras 1 y 2 vs. controles.
Muestra vs. CONTROL CONTROL CONTROL

Control POSITIVO (a) POSITIVO (b) (Negativo)
W-DLC 8,56 % 4,7 % 51,19 %
SI-DLC 7,21 % 11,07 % 48,68 %
Los resultados que contiene el cuadro 19 representan la diferencia en porcentaje

de la viabilidad celular de ambas muestras contra los controles; se debe tener en
cuenta los resultados del cuadro 20 para tener la referencia de la comparación.
Cuadro 20: Cotejo muestra 1 vs. muestra 2.
Muestra vs.
Si-DLC
Muestra
W-DLC 2,51 %
95
De la misma forma se realizó una comparación (cuadro 20) entre las dos muestras
para determinar cual reportó un mejor comportamiento al ser expuestas a un
medio fisiológico in vitro. El resultado experimental arrojo que la muestra de AISI-
316 recubierta con material DLC dopado con tungsteno tuvo un mejor
comportamiento frente al medio fisiológico, en vista que presentó una más alta
viabilidad celular respecto a los linfocitos; a pesar que la diferencia de porcentaje
de viabilidad, no fue contundente entre ambas muestras, se puede sustentar este
resultado en la pérdida de propiedades (tribológicas, biocompatibles) que presenta
el silicio cuando se deposita en grandes concentraciones.
96
8. CONCLUSIONES
En este trabajo se obtuvieron películas en monocapa de W-DLC y Si-DLC crecidas

sobre un sustrato de acero inoxidable 316 utilizando la técnica pulverización
catódica por R.F. Variando la temperatura y la potencia, las películas fueron
caracterizadas mediante distintas técnicas, en donde se ha llegado a las
siguientes conclusiones:
• La técnica pulverización catódica por radio frecuencia (sputtering R.F), es

adecuada para la elaboración de monocapas de material DLC dopadas con
elementos que permitan modificar algunas de sus propiedades, ya que es muy
versátil y flexible en cuanto a los procedimientos experimentales.
• Los resultados obtenidos al caracterizar las muestras por espectroscopía

raman representan una tendencia hacia los modos de hibridación que definen una
estructura diamante tipo carbono respecto a las bandas G y D (diamante-grafito),
encontrando picos en los rangos 1300 cm-1 y 1600 cm-1 respectivamente.
• Se obtuvo una variación en la fuerza de colisión de las partículas

evaporadas del material blanco durante el proceso de deposición para mejorar las
cohesiones entre materiales por medio de cambios en la variable potencia del
sistema en valores cercanos a 50 W y 100 W.
• Los recubrimientos realizados de material DLC presentaron baja

adherencia, hecho que se atribuye a que las películas clasificadas como carbón
amorfo (a-C) se caracterizan por tener propiedades similares a las del diamante,
en cuanto a dureza, coeficiente de fricción, etc. Por su dureza este tipo de
recubrimientos presentan altas tensiones comprensivas internas, que originan
fallas de adherencia desde la interface con la mayoría de sustratos sobre los
cuales se depositan; teniendo en cuenta esta problemática se planteó
experimentalmente el depósito de una capa intermedia (interlayer) de titanio (Ti)
con la cual se disminuyeron notablemente las tensiones compresivas internas de
la interface, incrementando la capacidad de adherencia del diamante tipo carbono.
• La caracterización por medio del ensayo pin on disc arrojó, mediciones del
coeficiente de fricción, el cual registró valores muy bajos en la película de
recubrimiento; esto se debe a que el espesor de la película de Si-DLC y W-DLC no
97
es lo suficientemente grande y por ende el valor del coeficiente de fricción de la
interlayer de Ti y el sustrato AISI-316 influyen en la curva de la gráfica.
• Se presentó un aumento notable en el tiempo de vida de la superficie del

sustrato de AISI-316 recubierto con las monocapas de W-DLC y Si-DLC en
comparación con el sustrato de acero sin recubrimiento, lo cual se aprecia el
análisis de pin on disc y profilometría.
• Las durezas halladas para W-DLC y Si-DLC oscilaron entre 10,90GPa y

11,79GPa, las cuales cuentan con una dureza adecuada, la cual se podría mejorar
con el aumento del tiempo de deposición.
• Los ensayos de desgaste muestran la ventaja de la estructura en

monocapas con la que se dopó la matriz de diamante tipo carbono en
comparación con un sustrato de acero inoxidable 316 manteniendo sus
propiedades de lubricación en seco.
• Se estableció que el coeficiente de fricción fue menor para el recubrimiento

W-DLC/AISI-316 y Si-DLC/AISI-316 en comparación con el sustrato AISI-316 sin
recubrimiento, de acuerdo a el registro de análisis tribológicos realizados a través
de la prueba de desgaste pin on disc y la evaluación por profilometría.
• Las imágenes tomadas con microscopio, en donde se registra el surco

realizado por el ensayo de pin on disc, muestran los efectos del aumento de la
rugosidad relacionándolo con la generación de partículas del material (debris) en
la etapa de asentamiento de la prueba de desgaste, lo que conlleva a un aumento
del coeficiente de fricción a mayores distancia de deslizamiento.
• Cuando el recubrimiento posee un espesor muy bajo, la vida útil de este

tiende a ser muy corta, como en el caso de la capa de W-DLC y Si-DLC que a
pesar que tuvieron excelentes coeficientes de fricción y rugosidades buenas,
perdieron sus propiedades superficiales en distancias cortas de deslizamiento.
Por otro lado, si el recubrimiento posee un espesor muy alto, la capa actuará como
un elemento volumétrico, perdiendo su papel intrínseco en el composite.
• Se obtuvieron resultados de índices de viabilidad celular por medio de la

técnica de tinción con azul de tripán (colorante). Los resultados muestran que las
98
probetas con recubrimiento de material W-DLC y Si-DLC tuvieron un buen
comportamiento experimental respecto a la cantidad de células (linfocitos) que no
se murieron mientras permanecieron en contacto con estos materiales. Se registró
un 75,75% y un 73,24% de viabilidad celular respectivamente, teniendo en cuenta
como referencia 2 controles positivos (Ti, AISI-316) y un control negativo (Fe), este
último con oxidaciones superficiales.
• Dentro del desarrollo del proyecto se plantearon matrices y protocolos

experimentales que determinaron el registro de los resultados obtenidos por medio
de las caracterizaciones a los materiales; en futuros trabajos se piensa mejorar el
procedimiento experimental teniendo en cuenta todos los aspectos resaltados en
las recomendaciones.
99
9. RECOMENDACIONES
• Verificar el grado de pureza del material sustrato que sea el más óptimo,
para evitar incrustaciones intersticiales en los cristales de éste haciéndolo más
frágil.
• El tiempo de deposición para cada monocapa según la matriz experimental

planteada fue de 2 horas, sería conveniente tener en cuenta un tiempo más
prolongado de deposición para obtener así, espesores apropiados de las
películas. Esto podría ayudar a mejorar las propiedades como resistencia al
desgaste y dureza.
• Es necesario que dentro de la preparación de los sustratos, las superficies

transversales de estos, queden totalmente paralelas con una superficie plana,
para evitar inconvenientes en el momento de realizar pruebas de caracterización
tribológicas.
• Dar un pulido mecánico a los sustratos hasta obtener el efecto espejo,

utilizando lijas con granos desde 80 hasta 1200; realizando el lijado cada 90° para
eliminar imperfecciones de la superficie, todo el proceso lubricado por agua; para
luego dar un acabado superficial a través del sistema de paños utilizando solución
de alúmina.
• Realizar esterilización de sustratos con alcohol isopropílico o acetona para

introducirlos en el equipo de ultrasonido y dar un lavado previo a la deposición del
recubrimiento.
• Generar un ambiente aséptico durante el proceso de deposición de los

materiales dentro y fuera de la cámara de vacío, evitando cambios en los
resultados por factores externos.
• Se debe tratar que los materiales utilizados como blancos para la

deposición sean de la más alta pureza, para así garantizar que el recubrimiento
sea lo mejor posible en calidad.
100
• Después de realizadas las deposiciones de las películas los sustratos
deben ser almacenados en papel de arroz de grano fino y luego en algodón para
evitar que la película sufra algún daño mecánico superficial.
• La adición de concentraciones de nitrógeno en el proceso de deposición

influye en la baja rugosidad de la superficie de la película, lo que disminuye las
probabilidades de que se presente adherencia bacteriana sobre su superficie
cuando se encuentre con un medio biológico.
• El crecimiento de recubrimientos de W-DLC y Si-DLC con estructura de

multicapa sobre sustratos de acero inoxidable 316, mejoraría la adhesión y la
resistencia al desgaste manteniendo coeficientes de fricción bajos al igual que las
rugosidades.
• Con el fin de obtener una homogeneidad en los recubrimientos depositados

sobre el acero, se debe llevar un control de las concentraciones de los materiales
(W, Si) que dopan la matriz del diamante tipo carbono, manteniendo una relación
1:1 entre ellos, evitando así cambios en las propiedades de cada material.
• Tener en cuenta la deposición de una capa intermedia de Ti para mejorar

las propiedades de adherencia entre la interface del sistema recubrimiento
mientras se mitiga las tensiones compresivas, sin olvidar calcular la tasa de
deposición del material dependiendo de la técnica y el quipo que se esté
implementando.
• En el momento del proceso de deposición de los materiales podría haber

una mejora del sistema recubrimiento adicionando gases renovables como el
nitrógeno (N) y metano (CH4) para las diferentes hibridaciones.
• De acuerdo a la rata de deposición del titanio, no es necesario realizar

recubrimientos de la interlayer con tiempos mayores a 30 minutos, garantizando
de esta forma que la película depositada no sea una monocapa.
• Las altas concentraciones de gas argón (Ar-) y metano (CH4) durante el

proceso de generación de plasma para la deposición de material DLC tiene
resultados favorables respecto a la cantidad de enlaces sp3.
101
• Los bajos niveles de rugosidad y coeficientes de fricción moderados sobre
la película del recubrimiento, influyen en el decremento de la probabilidad de
crecimiento bacteriano sobre la superficie del recubrimiento.
• Esterilizar inicialmente todos los implementos de laboratorio para la prueba

de biocompatibilidad por medio de alcohol antiséptico al 70%.
• Elementos como: beakers, agua, pinzas, petric, puntas de micropipetas,

guantes, materiales sustrato y controles, tubos de ensayo, tubos eppendorf deben
ser esterilizados por vapor de agua en autoclave por 30 min.
• Elementos como: pipetas de vidrio y plásticas, peras de succión,

micropipetas, cámara de newbauer, cámara de CO2, deben ser esterilizados por
medio de luz ultra violeta por un tiempo de 12h antes de iniciar la prueba.
• Todo el protocolo experimental para la prueba de viabilidad celular

(biocompatibilidad), debe ser trabajado dentro de la cámara de flujo laminar para
disminuir la probabilidad de error por contaminación.
• El tiempo que deben estar en contacto con el azul de tripán los linfocitos no
debe superar los 5 minutos cuando se inicie el proceso de conteo celular, para
evitar que se modifique la membrana citoplasmática, incurriendo en errores
experimentales.
102
PONENCIAS
DISEÑO DE MULTICAPAS PARA RECUBRIMIENTOS CON MATERIAL DLC EN

APLICACIONES BIOMÉDICAS.
• Primer Seminario Latinoamericano de Ingeniería Clínica en Gestión de las

Tecnologías Biomédicas, en la Universidad Autónoma de Occidente, en Santiago
de Cali, entre el 7 y 9 de Mayo 2008.
• Tercer Seminario de Socialización de Trabajos Académicos Investigativos

Estudiantiles, en la Universidad Autónoma de Occidente, en Santiago de Cali 23
de Mayo 2008.
• VII Encuentro Departamental de Semilleros de Investigación, Red

Colombiana de Semilleros de Investigación – REDCOLSI, Nodo Valle del Cauca,
en la Institución Universitaria Antonio José Camacho sede Sur, en Santiago de
Cali 13 y 15 de Mayo 2010.
DISEÑO DE UNA BICAPA PARA RECUBRIMIENTOS CON MATERIAL W-DLC

Y SI-DLC EN APLICACIONES BIOMÉDICAS.
• XI Encuentro Nacional y V Internacional de Semilleros de Investigación,

Red Colombiana de Semilleros de Investigación – REDCOLSI, “Ciencia Joven sin
Fronteras”, Universidad EAFIT, en Medellín, entre el 9 y 12 de Octubre 2008.
• Sexto Seminario de Socialización de Trabajos Académicos Investigativos

Estudiantiles, en la Universidad Autónoma de Occidente, en Santiago de Cali 23
de octubre 2009.
• Ponente en el IX Simposio de Investigación en Salud, en la Universidad del

Valle, en Santiago de Cali, entre el 21 y 23 Octubre 2009.
103
GRUPOS DE INVESTIGACIÓN
• Miembros del Semillero de Biomateriales del Grupo de Investigación de

Materiales Avanzados para Micro y Nano Tecnología IMAMNT, Universidad
Autónoma de Occidente.
104
BIBLIOGRAFÍA
ASKELAND, D., La Ciencia e Ingeniería de los materiales. México: Grupo Ed.

Iberoamérica,1985
BABA, K., et al. Deposition of silicon-containing diamond-like carbon films by

plasma-enhanced chemical vapour deposition. Surface & Coatings
Technology.2009. Vol. 203 p. 2747–2750.
BAILEY, L., et al. The quantification of cellular viability and inflammatory response
to stainless steel alloys, Biomaterials.2005. Vol. 26 p. 5296 – 5302.
BORDJI, G., et al. Evaluation of the effect of three surface treatments on the
biocompatibility of 316L stainless steel using human differentiated cells,
Biomaterials. 1996. Vol. 17 p. 491-500.
Computer Science, University of Durham, Durham DHI 3LE, UK. Recent

developments in the tribology of artificial joints. Tribology International. 1995 Vol.
28, N° 7, p. 485 – 495.
CÓRDOBA, M., et al. Fabricación de películas delgadas de VO2 por Sputtering

RF, Popayán: Universidad del Cauca. Revista Colombiana de Física. 2005. Vol.
37, Nº 1.
CÓRDOBA, M., et al. Instalación y adecuación de un horno, con adquisición

automática de datos en un sistema de pulverización catódica R.F., Revista
colombiana de física 2006. Vol. 38, Nº 1.
CORENGIA, P., et al. Deposición de películas de Ti por (PVD) para protección de

aleaciones de aluminio. En 4º jornadas de desarrollo e innovación. Noviembre.
2002.
DEVIA, A., et al. Producción y caracterización de bicapas de TiN/DLC en Películas

delgadas. Revista Colombiana de Física. 2004 Vol. 36, N° 2, p. 1 - 5.
105
EGIDI, D., et al. Deposición de películas delgadas por PVD y su caracterización
mediante AFM. P. 1 – 4.
EISENBARTH, E., et al. Biocompatibility of stabilizing elements of titanium

alloys, Biomaterials. 2004. Vol. 25 p. 5705–5713.
ESCOBAR, R., et al. Preparación y caracterización de recubrimientos y láminas

delgadas, Tema 4: Técnicas de deposición física (PVD) II. Deposición mediante
bombardeo catódico ('sputtering'). Centro de Microanálisis de Materiales, CMAM-
UAM. p. 3 – 26.
FIELD, S., et al. Tribological properties of graphite like and diamond like carbon
coatings, Tribology International. 2004. Vol. 37 p. 949-956.
FIGUEROA, R., et al. Estudios de Nanoindentación en recubrimientos de TiVN y

TiN sobre acero AISI-316 y HSS. Revista de la facultad de ciencias–UNI. p. 27–
36.
FRESHNEY, R., Cultures of animal cells. A manual of basic techniques.5 ed. USA:
Wiley-Liss, p. 359-373.
GALEANO, A., GUTIÉRREZ, T., Estandarización de dos técnicas para evaluar

actividad y viabilidad celular in vitro en repuesta a biomateriales. Tesis.
Universidad Autónoma de Occidente. 2009.
GAONA, M., Recubrimientos biocompatibles obtenidos por proyección térmica y

estudio in-vitro de la función osteoblástica. Barcelona: junio, 2007. p. 1 – 288.
GARCÍA, D., et al. Recubrimientos de (Ti, AL)N sobre acero 4140 por Sputtering
reactivo. Dyna, julio, 2007. Vol. 74, Nº 152, p. 181 – 185.
GARCÍA, L., et al. Crecimiento y caracterización de películas de CdTe:Cu. Instituto

Politécnico Nacional. Altamira: Tamps. Tesis. 2007. p. 1 - 64.
106
GEBESHUBER, I., Biotribology inspires new technologies, Nanotoday. October,
2007. Vol. 2, N° 5. p. 30 – 37.
GIL, L., Corrosion performance of the plasma nitrated 316L stainless steel, Surface
& Coatings Technology. 2006. Vol. 20 p. 4424 – 4429.
GUZMÁN, S., et al. Prótesis de cadera, diez años de evolución en la clínica de la

caja petrolera de salud regional la paz, Revista boliviana de ortopedia y
traumatología. octubre, 2003. Vol. 13, N° 1.
HALL, R., et al. Biomechanics: Biotribology for joint replacement, Current

Orthopaedics. 2001. Vol. 15, p. 281 – 290.
HAUERT, R., An overview on the tribological behavior of diamond like carbon in

technical and medical applications, tribology international. 2004. Vol. 37 p. 991–
1003.
HERNÁNDEZ, J., et al. Estudio de multicapas de Ti/TiSiN obtenidas por erosión

catódica. En: X congreso nacional de microscopia –Morelia, 2010. p. 1-3
JIN, Z., et al. (v) Biotribology, Mini-Symposium: Biomechanics for the FRCS orth
exam, Current Orthopaedics. 2006, Vol. 20 p. 32 – 40.
KHELFAOUI, Y., et al. Electrochemical Characterization of a PVD Film of Titanium

on AISI-316L Stainless Steel. Surface & Coatings Technology. 2006. Vol. 200 p.
4523 – 4529.
La ciencia y la ingeniería de los biomateriales un desafío interdisciplinario, Ciencia

hoy, revista de divulgación científica y tecnológica de la asociación ciencia hoy,
Vol. 9, N° 49, noviembre-diciembre 1998.
LEDON N., et al. Validación del ensayo de proliferación celular colorimétrico por
MTT para la determinación de potencia del rHu-met-G-CSF. Rev. Cubana de
107
química. 2007. Vol. 19, N° 1. p. 18-21
LIU, C., et al. Reduction of bacterial adhesion on modified DLC coatings: colloids
and surfaces : Biointerfaces. 2008. Vol. 61 p. 182 – 187.
LÓPEZ, D., Caracterización superficial de acero inoxidable AISI-316L en contacto

con solución fisiológica simulada. En: Congreso CONAME/SAM 2004.
LORENZO, J., et al. Tribología con nanomateriales, investigación y ciencia.

Febrero, 2008. p. 48 – 58.
MALCHER, V., Diamond film coated on WC/Co tools by double bias-assisted hot
filament CVD. Current applied physics. 2002. p. 201 – 204.
MANZANO, R., Use of diamond-like carbon with tungsten (W-DLC) films as

biocompatible material. Surface & Coatings Technology. 2008. Vol. 202 p. 2813 –
2816.
Materiales aplicados para biomédica [en línea]. Santiago de Cali: Universidad

Autónoma de Occidente, 2010. [Consultado 07 de octubre, 2009]. Disponible en
Internet: http://nanoudla.blogspot.com/2009/05/materiales-aplicados-para-
biomedica.html
Mecánica de sólidos, prácticas de resistencia de materiales en el Sena,

Universidad San buenaventura. Bogotá II semestre del 2002.
MIN, Z., et al. Effect of substrate morphology on the roughness evolution of ultra
thin DLC films. Applied Surface Science. 2008. Vol. 254 p. 6742–6748.
MORÁIS, S., et al. Applied Methodology: Application of stripping voltammetry and

microelectrodes in vitro biocompatibility and in vivo toxicity tests of AISI-316L
corrosion products, J. Trace Elements Med. Biol. April, 2000. Vol. 14 p. 48 – 54.
MOREJÓN, L., et al. Cementos acrílicos con partículas de biovidrio como relleno
bioactivo. VI Congreso de la Salud Cubana de Bioingeniería Habana. 2005.
Sociedad Cubana de Bioingeniería, Articulo T085.
108
NIETO, J., Comportamiento por contacto esférico de dos sistemas con
recubrimientos WC/C bajo cargas monotónicas y cíclicas. noviembre, 2007. p. 1 –
101.
PAREJA, A., et al. Estudio in vitro de la citotoxicidad y genotoxicidad de los

productos liberados del acero inoxidable 316L con recubrimientos cerámicos biono
viables. Iatreia. Marzo. 2007 Vol. 20, Nº 1.
PEINDY, H., et al. Synthesis, characterization, X-Ray crystallography, and

cytotoxicity of a cymantrene keto carboxylic acid for IR labelling of bioactive
peptides on a solid support, Journal of Inorganic Biochemistry. 2008 Vol. 102 p.
2114 – 2119.
RESÉNDIZ, M., et al. Microscopio de fuerza atómica, Eninvie 2005, Encuentro de

investigación en ingeniería eléctrica. Zacatecas: Zac, Marzo, 2005.
RICKERBY, D., et al. Surface and Coating Tecnology. 1989. Vol. 37 p. 4375.
RINCÓN, C., et al. Propiedades mecánicas y tribológicas de monocapas de W-C,

DLC y multicapas de W-C/DLC. Revista Colombiana de Física. 2003. Vol. 35 Nº 1
RÍOS, M., et al. Evaluación toxicológica in vitro de materiales poliméricos de

restauración dental compuestos por BIS-GMA. Instituto Nacional de Oncología y
Radiobiología, Anuario Toxicología. 2001. Vol. 1 p. 65 – 72.
RIVERA, W., BENÍTEZ, S., et al. Análisis por FTIR de diamante y DLC, Revista
Colombiana de Física. 2002. Vol. 34, Nº 2.
RODIL, S., et al. Properties of carbon films and their biocompatibility using in-vitro
tests, Diamond and Related Materials. 2003. Vol. 12 p. 931 – 937.
RODRÍGUEZ, J., et al. Evaluación del desgaste de prótesis cerámicas de cadera

recubiertas con DLC por triboadhesión parte 1, diseño de la máquina de
deposición y desgaste. Junio, 2006. Vol. XXVII Nº 1, p. 23 - 30.
109
RODRÍGUEZ, L., et al. Aceros inoxidables para implantes ortopédicos utilizados
en la industria ORTOP RALCA del CCOI “Frank París”. En: VII Congreso de la
Sociedad Cubana de Bioingeniería. Habana: 2007. Artículo T029.
ROHDE, S., et al. Recent developments in plasma assisted physical vapour

deposition. Journal of Physics D: Applied Physics Create an alert RSS this journal.
2000. Vol. 33, N°18.
SEGURA, B., Producción y caracterización de recubrimientos en multicapa de

TiN/DLC en películas delgadas. Tesis. Universidad Nacional Sede Manizales.
2003.
SRIDHARAN, K., et al. Biocompatibility of uncoated and diamond like carbon

coated Ti–20%Hf alloy. Materials Science and Technology. 2008, Vol. 24, N° 5 p.
575 – 578.
TAKENO, T., et al. A DLC/W-DLC Multilayered Structure for Strain Sensing

Applications. Science Direct Diamond & Related Materials. 2007 Vol. 516 p. 980 -
8577
TANG, L., et al. Biocompatibility of chemical vapour deposited diamond,

Biomaterids. 1995. Vol. 16 p. 483 - 488.
TAKADOUM, J., et al. Surface and Coating Tecnology 1996. Vol. 88, N° 232
UNSWORTH, A., Recent developments in the tribology of artificial joints, Tribology

International Vol. 28, N° 1, p. 485 - 495, 1995.
VARGA, K., et al. comparative study of surface properties of austenitic stainless

steels in sulfuric and hydrochloric acid solutions, Electrochemical Acta. 1997. Vol.
42 N° 1 p. 25 - 35
WANG, A., et al. Lubrication and wear of ultra high molecular weight polyethylene
in total joint replacements, tribology international. 1998. Vol. 31, N° 1 – 3, p. 17 –
33.
110
WEVER, D., et al. Cytotoxic, allergic and genotoxic activity of a nickel-titanium
alloy, Biomaterials. 1997. Vol. 18 p. 1115 – 1120.
WILCHES, L., et al. Wear of materials used for artificial joints in total hip
replacements, Wear. 2008. Vol. 265 p. 143 – 149.
ZAMBRANO, G., et al. Multicapas de metal cerámico carbono tipo diamante

(DLC), un camino para la obtención de recubrimientos superduros. Rev. Acad.
Colomb. Cienc. 2003. Vol. 27 N° 103 p. 225 – 231
ZHANG, Z., et al. Preparation and characterization of La2O3 doped diamond like
carbon nanofilms (I): Structure analysis, Diamond & Related Materials. 2007 p.
1905 – 1911.
111
ANEXOS
ANEXO A. PROCESO DETALLADO PARA DESARROLLO DE

RECUBRIMIENTOS DUROS DE W-DLC Y Si-DLC.
1. PREPARACIÓN DEL SUSTRATO
a. Diseño y preparación de probetas 2cm x 5mm

b. Pulido y acabado de superficies de las probetas (espejo)
c. Ensayo metalográfico
2. PREPARACIÓN DE TARGETS
a. Barra de soldadura de W con pureza del 99.8 % en trozos

b. Lamina delgada de Si en trozos 99.99 %
c. Target de Ti 2’ con pureza del 99.999 %
d. Target de C 2’ con pureza del 99.9999 %
3. LIMPIEZA DE SUSTRATO
a. Limpieza superficial con acetona

b. Limpieza con ultrasonido
c. Inmersión en alcohol isopropílico
4. ACONDICIONAMIENTO SISTEMA SPUTTERING RF
a. Introducción de sustrato y target dentro de la cámara de vacío

b. Limpieza cámara de vacío (pre-sputtering + Ar-)
5. PROTOCOLO DE RECUBRIMIENTOS
a. Ignición de bomba mecánica
112
b. Ignición de bomba turbomolecular
c. Encendido de fuente eléctrica
d. Apertura de flujo de gas no reactivo (Ar-)
e. Generación de plasma
f. Calibración del sistema
i. Encendido de horno
ii. Selección de temperatura
iii. Selección de potencia
g. Verificación de variables
i. Presión
ii. Temperatura
iii. Voltaje
iv. Potencia
v. Corriente
vi. Flujo de gas
h. Apertura del shut sobre el target
i. Evaporación de targets
j. Deposición de especies sobre sustrato
k. Cierre de shut sobre el target
l. Cierre de flujo de gas
m. Apagado de horno
n. Apagado de fuente eléctrica
o. Descompresión de cámara de vacío
p. Apagado de bomba turbomolecular
q. Apagado de bomba mecánica
r. Apertura de cama de vacío
s. Extracción de sustrato
113
ANEXO B. FORMULARIO DE CONSENTIMIENTO INFORMADO
TÍTULO: DISEÑO DE UNA MONOCAPA PARA RECUBRIMIENTOS CON

MATERIAL W-DLC Y SI-DLC EN APLICACIONES BIOMÉDICAS.
PROTOCOLO No: 00001.
INVESTIGADORES: Germán Felipe Plazas Gutiérrez Y Fabián Alejandro Lerma

Caicedo
DIRECCIÓN: Facultad de Ingenierías, Departamento de Ingeniería Biomédica,

Universidad Autónoma de Occidente
INTRODUCCIÓN: Los investigadores que conducen esta investigación han

determinado que Ud. reúne los requisitos principales para participar en el estudio.
La siguiente información describe el estudio y su función como participante en el
estudio. Un miembro del grupo explicará los procedimientos y contestará cualquier
pregunta que tenga acerca de este formulario de consentimiento informado y/o del
estudio. Por favor, lea detenidamente este documento y no dude en consultar al
personal sobre cualquier pregunta que tenga acerca del estudio y/o la información
provista a continuación. No pueden asegurarse ni garantizarse los resultados del
estudio.
OBJETIVO DEL ESTUDIO: En este estudio se determinará la viabilidad celular de

la sangre que Ud. ofrece como muestra para estudios futuros con material Si-DLC,
W-DLC, Ti, Fe y AISI-316 en evaluación de biocompatibilidad específicamente una
prueba de citotoxicidad.
DESCRIPCIÓN DEL ESTUDIO Y PROCEDIMIENTOS: La muestra de material

sanguíneo del estudio será extraída, marcada y manipulada únicamente por la
persona que ha sido asignado para tal fin.
En este estudio participaron 5 adultos 3 hombres y 2 mujeres. Luego de haber

sido asignado a participar en el estudio, Ud. estará expuesto a una extracción de
sangre por parte del personal calificado, la cual será depositada y almacenada
luego para su previa conservación.
114
• EXTRACCIÓN DE SANGRE PERIFÉRICA POR VENOPUNCIÓN:
Obtener 10ml de sangre por venopunción, previo consentimiento informado del

donante de la muestra; se debe tener en cuenta que el donante no debe presentar
alguna enfermedad infecciosa o contagiosa que active el sistema inmune dentro
de los 60 días previos.
• PREPARACIÓN DE MUESTRAS DESPUÉS DE CENTRIFUGACIÓN

(SEPARACIÓN Y LAVADOS):
En un tubo de 20ml colocar 10ml de histopaque marca Sigma-Aldrich ref. 1077 y

luego añadir en la superficie del histopaque los 10ml de sangre periférica
obtenidos. Centrifugar los tubos a 400 gravedades durante 30 minutos a
temperatura ambiente (27°C) con el objetivo de sepa rar los linfocitos.
Extraer con una micropipeta el anillo de células (linfocitos) que queda en la

interface entre el suero y el histopaque del tubo (aproximadamente 800µl),
tratando de arrastrar la menor cantidad posible del reactivo.
Añadir a cada tubo 3800µl de medio de cultivo RPMI 1640 enriquecido, con 5% de
suero fetal bovino equivalente a 190µl; realizar una disociación (mezclar los
linfocitos de forma homogénea con el medio) para luego llevar a un primer lavado
en centrifugadora a 250 gravedades (2.190rpm), por 10 minutos a 27°C.
Retirar el sobrenadante de cada uno de los tubos eppendorf y realizar un segundo

lavado en centrifugadora con las mismas especificaciones que el primero.
• PREPARACIÓN DE MUESTRAS PARA CONTEOS PRE Y POS:
Retirar el material precipitado (linfocitos) en cada tubo eppendorf. Preparar una

solución compuesta de 20ml de RPMI 1640 suplementado con suero bovino fetal
al 10% que equivale a 2ml, penicilina 50µg/ml equivalente a 1000µl y gentamicina
10µg/ml que equivale a 200µl; esta solución se divide por igual en el numero de
muestras que se requiera, luego se disocia nuevamente la cantidad de linfocitos
agregada junto con la solución para iniciar el primer conteo.
115
Se hace la extracción de 100µl del cultivo y se mezclan en un tubo eppendorf que
contiene 100µl de azul de tripán al 4% dejándolos reposar durante 5min máximo
(el azul de tripán se prepara con 100ml de agua autoclavada por 30min,
agregando 0.04g de azul de tripán en polvo); se retira una cantidad adecuada de
la mezcla del cultivo con el tinte, y se coloca en la cámara de newbauer con la
micropipeta por ambas matrices de evaluación, para proceder al conteo con el
microscopio en escalas 40X y 100X, centrándose en los recuadros de las esquinas
de la matriz.
Posteriormente el cultivo que se está incubando en la cámara de CO2 se pone en

contacto con el material a evaluar y se deja cultivando durante 24 horas, para
luego hacer el conteo con el mismo procedimiento que se desarrollo anteriormente
utilizando el tinte azul de tripán, en las mismas cantidades y bajo las mismas
condiciones en la cámara de newbauer.
A continuación, debe replicarse este paso después de 48 y 72 horas después bajo

las mismas condiciones sobre la cámara de newbauer; para luego comparar con el
primer conteo.
RIESGOS Y MOLESTIAS: La participación en este estudio por la recolección del

material sanguíneo en general no implica riesgos.
Sin embargo, se le explicarán las molestias y riesgos razonables y previsibles de

la participación en este estudio.
ALTERNATIVAS: No es obligatorio que Ud. participe en este estudio para

recolección de muestras de sangre. Ud. Podrá decidir si quiere o no participar en
este estudio, en caso que crea que le genere algún tipo de riesgo.
POSIBLES BENEFICIOS PARA LOS PARTICIPANTES: Si bien no hay garantía

de que Ud. personalmente recibirá un beneficio por participar en este estudio, Ud.
podrá beneficiarse de la información que recibirá a lo largo del estudio en cuanto
al estado de su grupo de células sanguíneas y el comportamiento respecto a una
respuesta inmune a materiales de naturaleza extraña. Su participación en esta
investigación proporcionará información acerca de la viabilidad celular, resultados
que podrían beneficiar a otros.
116
COSTOS: La participación en este estudio así como los procedimientos y los
controles, no representará ningún costo para el participante ni para sus padres.
No hay disponible ninguna otra forma de compensación, excepto los recursos
disponibles bajo la ley. No se le reintegrará dinero por el tiempo dedicado en la
investigación.
COMPENSACIÓN POR EFECTOS COLATERALES RESULTANTES DEL

ESTUDIO: Si Ud. sufre algún daño o enfermedad directa por la toma de la
muestra de sangre como resultado de su participación en el estudio, el
patrocinador cubrirá los gastos para su tratamiento.
La firma de este consentimiento no implica su renuncia a ninguno de los derechos

previstos por la normativa vigente para el caso de daños relacionados con su
participación en este estudio.
CONFIDENCIALIDAD: Los registros de su participación en este estudio se

mantendrán confidenciales en la medida permitida por las leyes locales, estatales
y federales. Los encargados del estudio, y directores del mismo podrán
inspeccionar y tendrán acceso a los datos confidenciales que lo identifican a Ud.
por su nombre. Los Comités de Ética/Docencia e Investigación son comités que
evalúan los estudios para garantizar que se protejan los derechos y el bienestar de
los participantes y que el estudio se lleve a cabo éticamente. Dada la necesidad
de entregar información a estos organismos, no puede garantizarse una absoluta
confidencialidad. Ud. no será identificado en ninguna publicación de los datos. Al
firmar este formulario de consentimiento, Ud. autoriza al investigador del estudio a
revelar sus registros médicos relacionados con el estudio a las personas arriba
mencionadas.
A QUIÉN DIRIGIR LAS PREGUNTAS RELATIVAS A ESTE ESTUDIO: Ud. tiene

el derecho de hacer preguntas con respecto a este estudio en cualquier momento
y le pedimos que lo haga. El encargado del estudio será informado acerca de toda
nueva información relativa a su seguridad. Si tiene alguna pregunta relativa a este
estudio o si presenta un daño o enfermedad relacionado con la investigación,
contacte a los investigadores Germán Felipe Plazas Gutiérrez 3162986737 y/o
Fabián Alejandro Lerma Caicedo al teléfono 3166297744.
PARTICIPACIÓN VOLUNTARIA Y DERECHO DE NEGARSE O RETIRARSE: Su

participación en este estudio es voluntaria. Ud. podrá negarse a participar o podrá
117
descontinuar su participación en cualquier momento durante el estudio, sin
penalidad ni pérdida de beneficios.
DESCONTINUACIÓN DE SU PARTICIPACIÓN: Su participación en el estudio

podrá ser descontinuada por el personal autorizado del estudio, sin su
consentimiento si Ud. deja de reunir los criterios para continuar en el estudio, si no
cumple con las instrucciones del estudio que se le indicaron cuando a su cuidado
o con los requerimientos del estudio, si sufre un daño relacionado con el estudio, o
por cualquier otro motivo.
DECLARACIÓN DE CONSENTIMIENTO INFORMADO:
Yo, ________________________________________________, identificado con

la cédula No. ____________________de__________, he comprendido toda la
información que se me suministró acerca de mi participación en este estudio. He
tenido la oportunidad de comentar dicha información y hacer preguntas. Todas
ellas han sido respondidas a mi satisfacción. Acepto de plena voluntad participar
en este estudio. Recibiré una copia firmada de ésta declaración de consentimiento
informado.
La decisión de aceptar participar en este estudio de investigación no anula

ninguno de sus derechos en el caso de negligencia u otra responsabilidad legal de
las personas involucradas en este estudio.
Autorizo a que se revelen los registros de los resultados a los directores de la

investigación.
__________________________ ___________________________
Nombre del paciente Fecha/hora de firma
___________________________ ___________________________
Firma de la persona que Fecha/hora de firma
obtiene el consentimiento
__________________________ ___________________________
Firma del Testigo Fecha/hora de firma
118
ANEXO C. PROCEDIMIENTO DE LA TÉCNICA AZUL DE TRIPÁN PARA
EVALUAR BIOCOMPATIBILIDAD CELULAR
• EXTRACCIÓN DE SANGRE PERIFÉRICA POR VENOPUNCIÓN:
Obtener 10ml de sangre por venopunción, previo consentimiento informado del

donante de la muestra; se debe tener en cuenta que el donante no debe presentar
alguna enfermedad infecciosa o contagiosa que active el sistema inmune dentro
de los 60 días previos.
• PREPARACIÓN DE MUESTRAS DESPUÉS DE CENTRIFUGACIÓN

(SEPARACIÓN Y LAVADOS):
En un tubo de 20ml colocar 10ml de histopaque marca Sigma-Aldrich ref. 1077 y

luego añadir en la superficie del histopaque los 10ml de sangre periférica
obtenidos. Centrifugar los tubos a 400 gravedades durante 30 minutos a
temperatura ambiente (27°C) con el objetivo de sepa rar los linfocitos.
Extraer con una micropipeta el anillo de células (linfocitos) que queda en la

interface entre el suero y el histopaque del tubo (aproximadamente 800µl),
tratando de arrastrar la menor cantidad posible del reactivo.
Añadir a cada tubo 3800µl de medio de cultivo RPMI 1640 enriquecido, con 5% de
suero fetal bovino equivalente a 190µl; realizar una disociación (mezclar los
linfocitos de forma homogénea con el medio) para luego llevar a un primer lavado
en centrifugadora a 250 gravedades (2.190rpm), por 10 minutos a 27°C.
Retirar el sobrenadante de cada uno de los tubos eppendorf y realizar un segundo

lavado en centrifugadora con las mismas especificaciones que el primero.
119
• PREPARACIÓN DE MUESTRAS PARA CONTEOS PRE Y POS:
Retirar el material precipitado (linfocitos) en cada tubo eppendorf. Preparar una

solución compuesta de 20ml de RPMI 1640 suplementado con suero bovino fetal
al 10% que equivale a 2ml, penicilina 50µg/ml equivalente a 1000µl y gentamicina
10µg/ml que equivale a 200µl; esta solución se divide por igual en el numero de
muestras que se requiera, luego se disocia nuevamente la cantidad de linfocitos
agregada junto con la solución para iniciar el primer conteo.
Se hace la extracción de 100µl del cultivo y se mezclan en un tubo eppendorf que

contiene 100µl de azul de tripán al 4% dejándolos reposar durante 5min máximo
(el azul de tripán se prepara con 100ml de agua autoclavada por 30min,
agregando 0.04g de azul de tripán en polvo); se retira una cantidad adecuada de
la mezcla del cultivo con el tinte, y se coloca en la cámara de newbauer con la
micropipeta por ambas matrices de evaluación, para proceder al conteo con el
microscopio en escalas 40X y 100X, centrándose en los recuadros de las esquinas
de la matriz.
Posteriormente el cultivo que se está incubando en la cámara de CO2 se pone en

contacto con el material a evaluar y se deja cultivando durante 24 horas, para
luego hacer el conteo con el mismo procedimiento que se desarrollo anteriormente
utilizando el tinte azul de tripán, en las mismas cantidades y bajo las mismas
condiciones en la cámara de newbauer.
A continuación, debe replicarse este paso después de 48 y 72 horas después bajo

las mismas condiciones sobre la cámara de newbauer; para luego comparar con el
primer conteo.
120
ANEXO D. GRAFICAS DE CONTEO CELULAR ESPECÍFICAS PARA CADA
MUESTRA RESPECTO A CADA DÍA PARA LINFOCITOS NO VIABLES,
VIABLES Y MUERTOS.
Resultados obtenidos en el conteo de células linfocitos, expuestos a cada uno de

los materiales utilizados para la realización de esta prueba cuantitativa.
121

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DISEÑO DE UNA MONOCAPA PARA RECUBRIMIENTOS CON MATERIAL W-

DLC Y Si-DLC EN APLICACIONES BIOMÉDICAS

FABIÁN ALEJANDRO LERMA CAICEDO

UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE OCCIDENTE

FABIÁN ALEJANDRO LERMA CAICEDO

Trabajo de Grado para optar al título de

UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE OCCIDENTE

Aprobado por el comité de grado

Dra. Paola Andrea Neuta A._____

Dra. Adriana Gómez Gómez_____

Santiago de Cali, 16 de julio de 2010

Los autores expresan sus agradecimientos a:

Doctor Faruk Fonthal Rico, Ingeniero Electrónico de la Universidad Autónoma de

Doctora Clara Eugenia Goyés López, Doctora en Ingeniera de Materiales de la

Doctora Paola Andrea Neuta Arciniegas, Bacterióloga de la Universidad del Valle,

Señora Jennifer Lucumí Vargas, Laboratorista Clínico de la Universidad del Valle,

Señora Diana Marcela Ordóñez Gómez, Bióloga de la Universidad del Valle,

Doctor Federico Sequeda, Doctor en Ingeniería de Materiales, profesor de la

Ingeniero Michel Felipe Cano Ordóñez, Ingeniero de Materiales, auxiliar del

1. PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA 28

4. PROCESO DE PULVERIZACIÓN CATÓDICA (SPUTTERING) 38

6. PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL, TÉCNICAS PARA

Cuadro 1. Formas moleculares de la estructura del carbono 44

Cuadro 2. Comparación de algunas propiedades del diamante, el grafito y

Cuadro 3. Resumen de los procesos de preparación del sustrato,

Cuadro 4. Parámetros de medición para dureza rockwell B y C. 54

Cuadro 7. Parámetros empleados para la realización de la técnica de pin on

Cuadro 8. Parámetros de carga empleados en nanoindentación 62

Cuadro 10. Dureza Rockwell tipo C 68

Cuadro 11. Tasa de desgaste pin indentador Al2O3 6 mm diámetro 85

Cuadro 12. Tasa de desgaste pin indentador WC-Co 6 mm diámetro 85

Cuadro 14. Comparación de tasa de desgaste, dureza y módulo de

Cuadro 15. Matriz experimental de conteo celular (linfocitos) 89

Cuadro 17. Estadística de linfocitos no viables en periodos de 24 horas 90

Cuadro 18. Cuadro comparativo para determinación de viabilidad celular 91

Cuadro 20. Cotejo muestras 1 vs. muestra 2 93

Figura 1. Proceso de creación de películas delgadas. 38

Figura 3. Estructura molecular del diamante 45

Figura 4. Estructura molecular del grafito 46

Figura 5. Proceso de preparación de sustrato de AISI-316 (A), corte de

Figura 6. Solución de Agua Regia 52

Figura 7. Probetas sumergidas en alcohol isopropílico (A) y Equipo de

Figura 8. Máquina montadora de probetas BUEHLER (A) y Probetas de

Figura 9. Durómetro BUEHLER para mediciones tipo rockwell (A) y Sustrato

Figura 10. Microdurómetro BUEHLER (A) y Microscopio óptico OLYMPUS

Figura 11. Equipo de deposición - Sputtering R.F. 56

Figura 12. Cámara de vacío sputtering RF (A) y Proceso de generación de

Figura 13. Equipo para análisis de espectroscopía raman (A) y Microscopio

Figura 16. Preparación de paciente para venopunción (A), Extracción de

Figura 17. Equipo de centrifugación UNIVERSAL 32 R (A) y Base rotatoria

Figura 19. Separación centrifugada (A), Tubo de ensayo después de

Figura 20. Análisis metalográfico de tres sustratos de AISI-316 a una

Figura 21. Análisis metalográfico de tres sustratos de AISI-316 a una

Figura 22. Recubrimiento de W-DLC, sobre sustratos de vidrio y AISI-316

Figura 23. Sustrato N° 1, Espectro Raman película de Si-DLC 70

Figura 24. Sustrato N° 2, Espectro Raman película de Si-DLC 70

Figura 25. Sustrato N° 3, Espectro Raman película de Si-DLC 71

Figura 26. Sustrato N° 4, Espectro Raman película de W-DLC 72

Figura 27. Sustrato N° 5, Espectro Raman película de W-DLC 72