Universidad Autónoma de Sinaloa

Facultad de Ciencias del Mar

Microbiología

Bacteriología de agua y sedimentos

Practica #6

J. Samuel Briones Sandoval

Mariano de la Rosa Huerta.
Valdez Lindoro Jordy Asael
Enedina Monserrat Torres Trejo
Valeria Sánchez Viveros

M.C Judith Haydeé González Benítez

Mazatlán, Sin. 26 de Noviembre del 2019

Introducción
La bacteriología en sedimentos y en agua es un conjunto de métodos que se utiliza como
apoyo en el diagnóstico de enfermedades en camarones, cuando se sospecha que la causa
de la enfermedad está relacionada con presencia de bacterias patógenas en el agua de
cultivo. Consiste en la siembra de muestras en diferentes medios de cultivo, para
determinar si hay crecimiento o no de bacterias potencialmente patógenas.
La determinación de la calidad bacteriológica reviste gran importancia en el ámbito de la
salud pública ya que permite garantizar la inocuidad del agua destinada al consumo .Los
sedimentos de los ecosistemas acuáticos constituyen el hábitat de los organismos
bentónicos y por otra, actúan como fuentes y reservorios de nutrientes y diversas
sustancias; son por lo tanto una porción crítica de los ecosistemas acuáticos y deben ser
evaluados. Diversas normativas recogen la necesidad de la caracterización química,
bacteriológica y toxicológica del sedimento.

Objetivos
Conocer y aplicar los procedimientos para determinar la cantidad y el tipo de bacterias que
se encuentran en el agua y los sedimentos y de esta forma analizar las principales
enfermedades causadas por dichas bacterias.

Antecedentes
Anthony Van Leeuwenhoek fue el primero en descubrir a las bacterias con un microscopio
construido por él mismo. En otros tiempos se pensaba que las bacterias aparecían por
generación espontánea a partir de materia inerte. Leeuwenhoek publicó su descubrimiento
más o menos en 1683. Pero aun así tuvieron que pasar muchas generaciones de químicos y
biólogos para que se demostrase que las bacterias se reproducen unas a partir de otras,
como todos los seres vivos. Hasta que en el año de 1860, Louis Pasteur describió el origen
bacteriano de algunas enfermedades infecciosas y de los procesos de fermentación. Fue en
ese punto cuando podría decirse que inició el desarrollo de la bacteriología.
Las bacterias forman parte del reino mónera y son el objeto de estudio de una ciencia
llamada Bacteriología, en la cual se incluye el estudio de su clasificación y prevención de
enfermedades de etiología bacteriana. Robert Koch diseñó, en 1876, un procedimiento de
inoculación de bacterias en un medio nutriente para cultivarlas y estudiarlas. De acuerdo a
los siguientes postulados logró aislar al agente etiológico del carbunco: la bacteria Bacillus
anthracis. En los postulados de Koch se mencionan estos pasos a seguir en la inoculación de
bacterias para su estudio:
Se debe obtener a la bacteria en todos los casos de enfermedad.
Dicha bacteria debe poder aislarse en un cultivo puro a partir de las lesiones producidas en
el enfermo infectado. El microorganismo debe producir la misma enfermedad cuando se
inocula a partir de un cultivo puro en un modelo animal. Él mismo microorganismo debe
poder aislarse en cultivo puro a partir de las lesiones del modelo animal. Él microorganismo
debe inducir una respuesta inmune con la aparición de anticuerpos específicos en la sangre
del hombre o animal infectado que puedan demostrarse por pruebas serológicas. En 1880
se inició el conocimiento científico de la inmunidad frente a las bacterias: Pasteur descubrió
que el Bacillus anthracis cultivado a una temperatura entre 42 y 43 °C pierde toda su
virulencia tras varias generaciones, y más tarde se descubrió que los animales inoculados
con estas bacterias debilitadas eran resistentes a la infección. Un método fundamental para
estudiar las bacterias es cultivarlas en un medio líquido o en la superficie de un medio sólido
de agar. Los medios de cultivo contienen distintos nutrientes que van, desde azúcares
simples hasta sustancias complejas como la sangre u otro medio de enriquecimiento. Como
siguiente paso en la identificación de las bacterias, se observa la morfología de las colonias
obtenidas en el cultivo y posteriormente se aíslan las que nos interesan para identificas su
género y especie con pruebas bioquímicas. Para aislar o purificar una especie bacteriana
específica a partir de una muestra formada por muchos tipos de bacterias, la muestra se
siembra en un medio de cultivo sólido donde las células que se multiplican no cambian de
localización; tras muchos ciclos reproductivos, cada bacteria individual genera por escisión
binaria una colonia macroscópica compuesta por decenas de millones de células tan
similares a la original que podría decirse que son sus clones. Si esta colonia individual se
siembra a su vez en un nuevo medio crecerá como cultivo puro de un solo tipo de bacteria.
Otro concepto importantísimo e intrínsecamente relacionado a la bacteriología que ha
evolucionado a lo largo del tiempo y que es esencial para el estudio de la bacteriología
(aunque también de otras ciencias; como la medicina) son los métodos de esterilización: la
importancia de estos procedimientos radica en la acción biocida (eliminación de cualquier
organismo vivo), del agente o técnica usada. Los métodos de esterilización pueden ser por
medios físicos o por procedimientos químicos. Los métodos de esterilización son usados
para evitar la diseminación del material biológico por el laboratorio y otras áreas, pero
sobre todo para proteger a las personas. También son usados en la industria para asegurar
la calidad de sus productos, generalmente alimenticios y cosméticos. Incluso todas las
personas al tomar medicinas mientras estamos enfermos e incluso lavarse las manos se está
usando un método de esterilización.
Materiales

• Muestra de agua.
• Muestra de sedimento.
• Papel aluminio.
• Balanza analítica.
• Espátula.
• Pipeta automática de (1 y 0,1 mL).
• Tubos de ensayo.
• Cajas de Petri.
• Agar marino y TCBS.
• Rastrillo bacteriológico.
• Vortexer.
• Mechero.

Metodología

1. Se tomaron muestras tanto de agua y sedimento (1ml y 1g) respectivamente, para después
ponerse en un tubo con 9 ml de solución salina al 2.5%.
2. Después se tomó un ml de la primera dilución para poner en otro tubo de 9 ml de solución
salina.
3. Se tomaron 10 ml de cada dilución y se sembró en cajas de Petri con agar marino y agar
TCBS
4. Después se pretendía contar las UFC y después incubarlas de nuevo en agar marino para
volver a contar, pero no tuvimos la posibilidad de contar nuestras muestras.
Conclusión

Tuvimos resultados inconclusos ya que no supimos con qué calidad de agua sanitaria
contábamos; pude observar que el área de estudio donde tomamos las muestras ,se hacía
presente la contaminación esto posiblemente a las descargas directas de aguas residuales
proveniente de los asentamientos humanos ubicados alrededor de dicho laguna. Pude
deducir que existan posibilidades muy altas de encontrar presencia de bacterias de origen
fecal en el sedimento, esto puede provocar un riesgo sanitario para las especies que habitan
ahí. El sedimento puede actuar como microambiente protector para los grupos de bacterias
analizados, encontrándose altas concentraciones respecto al agua.
Valeria Sánchez viveros

En conclusión esta práctica fue muy interesante ya que aprendí como se debe llevar a cabo
una siembre de bacteria de sedimento y agua en las cuales puede ver una gran cantidad de
bacterias. Esta práctica es de gran ayuda ya que se lleva constantemente en la acuicultura
de camarón ya que es una de las prácticas donde se contamina más el sedimento y el agua.
No pudimos contar la cantidad de bacterias que pudo a ver dado la muestra pero al a ver
sido una muestra de un lugar algo contaminado creemos que fue una gran cantidad de
bacterias.

Jordy Asael Valdez Lindoro

Esta práctica de Bacteriología, me resultó muy interesante además de que resulta muy útil
para futuros trabajos y también emplear el conocimiento en diferentes prácticas, es
interesante el método para poder identificar bacterias en agua y sedimento, es un método
sencillo e útil, ya que para el ojo humano es imprescindible una bacteria, El resultado no lo
pudimos obtener ya que no se logró contar las bacterias pero creemos que se generaron un
gran número de colonias
J. Samuel Briones Sandoval
Debido a que no obtuvimos resultados puesto que no fuimos a leer las muestras encubadas
no podemos dar una conclusión completa, pero creemos que en nuestra muestra de agua
que fue recolectada en el estero del infiernillo se alojaban un gran número de bacterias ya
que al observar el cuerpo de agua era muy evidente la contaminación antropogénica.
Por otro lado, creo que llevar acabo la realización de esta práctica fue de suma importancia
para nuestra formación académica y como futuros biólogos acuicultores ya que podremos
saber si el estanque dónde sembraremos tiene una buena calidad de agua.

Enedina Montserrath Torres Trejo

En esta práctica logre comprender como es que a partir de la disolución de agua y

sedimento con contenido de bacterias fue posible comprender la medición de la cantidad
de estas a partir de las Unidades Formadoras de Colonias, todo esto después de un cierto
tiempo en el que se tuvieron de incubación de muestras. Esta práctica fue de mucha
importancia ya que existe una fuerte relación del estudio de las bacterias con el cultivo de
especies acuáticas las cuales pueden producir enfermedades que afecten al organismo que
se tenga cultivado y pueden llegar a generar problemas si no se previenen o se tratan
adecuadamente. Al final de la práctica no nos fue posible contar las muestras, sin embargo
creemos que obtuvimos una gran cantidad de colonias ya que era un agua y sedimento con
bastante mal olor rodeado de organismos en descomposición.

Mariano de la Rosa Huerta