Sesión 3 Microbiologia Practica

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA DE ENFERMERIA
“AÑO DEL FORTALECIMIENTO DE LA SOBERANIA NACIONAL”
CURSO: Microbiología y Parasitología
DOCNTE: Malqui Ramos, Ingrid Lisset
GRUPO: 02
INTEGRANTES:
1. Akuts Chuin, Nora Luz

2. Campoverde Chira, Alejandro Francisco
3. Lopez Verastegui, Maria Cecilia Encarnación
4. Quenaya Ponte, Mayreli Estilita
5. Ruiz Paredes, Cintia Elizabet
TRUJILLO - PERÚ
2022
PRÁCTICA Nro. 03
Laboratorio de: Fecha: 15/09//2022
Microbiología y Parasitología
Temática:
Antimicrobianos: Quimioterápicos y antibióticos. Mecanismos de acción de los

antimicrobianos. Resistencia antimicrobiana. Antibiograma y espectro antibiótico
Resultado de aprendizaje:
Explica el crecimiento microbiano

considerando los procesos de
Sesión:3
desinfección, esterilización y antisepsia
que se utiliza para el control de
microorganismos
Estudiante: Tiempo desarrollo de la guía:
IV Ciclo de la Escuela Profesional de 150 minutos

Enfermería
I. INTRODUCCIÓN
La resistencia a los antimicrobianos es un fenómeno biológico que
ocurre de manera natural, pero que se ha incrementado enormemente
debido al uso inapropiado y negligente de estos fármacos. Los ensayos
de susceptibilidad están indicados para apoyar la quimioterapia
antimicrobiana de tratamiento en procesos infecciosos por bacterias en
las que la identidad del microorganismo no es suficiente para predecir
en forma confiable su susceptibilidad. Estos ensayos son a menudo
indicados cuando se piensa que el organismo causante pertenece a una
especie capaz de mostrar resistencia a los agentes antimicrobianos más
comúnmente usados. Los mecanismos de resistencia incluyen la
producción de enzimas inactivantes del antibiótico, que alteran el
objetivo, o alteran la acción.
El método que actualmente recomienda el CLSI está basado en el

método originalmente descrito por Bauer et al., (método de Kirby-Bauer).
Este es el método de difusión en disco en que se han desarrollado
estándares para su interpretación y está apoyado por datos clínicos y de
laboratorio. Las pruebas de susceptibilidad a los antimicrobianos se han
convertido en procedimientos de rutina en la práctica clínica y la
información generada a partir de ellas es fundamental para la vigilancia
de los perfiles de sensibilidad y la detección de nuevos patrones de
resistencia por el laboratorio. Existen vanos métodos para probar la
susceptibilidad de los microorganismos a los antibióticos siendo la
difusión en disco el más utilizado. Se realiza en un medio transparente y
simple como el agar de Mueller Hinton. Se fundamenta en la liberación
del antibiótico al medio e inhibición del crecimiento bacteriano en áreas
concéntricas a la del disco
II. CONOCIMIENTOS PREVIOS:

Evaluación Inicial ¿Qué es el
antibiograma?
¿Para qué sirve el antibiograma?
¿Cómo se interpreta el antibiograma?
III. MATERIAL
1. Material de Laboratorio (por mesa de práctica).
• 01 Mechero de alcohol.
• 01 Asa bacteriológica
• 02 Placas con Agar Mueller Hinton sembradas para lectura de
antibiograma (una con Staphylococcus aureus y otra con Escherichia
coli)
• 02 placas con Agar Mueller Hinton sembradas para lectura de espectro
antibiótico (una placa con un antibiótico de amplio espectro y otra con
un antibiótico de espectro reducido)
• 02 placas con Agar Mueller Hinton
• Discos de sensibilidad: para Gram positivos y Gram negativos
• 02 tubos con Solución Salina Fisiológica Estéril (5mL c/u)
• 01 Cultivo Staphylococcus aureus
• 01 Cultivo Escherichia coli
• 01 Cultivo de Klebsiella sp.
• 01 Cultivo de Bacillus sp.
• 04 Hisopos estériles
• 01 Pinza
2. Material individual
• Guía de prácticas
• Guantes descartables, mascarilla descartable y gorro
• 01 Marcador indeleble
3. Material grupal
• 01 Regla
• 01 Jeringa de 5 ó 10mL
IV. DESARROLLO DE LA PRÁCTICA Actividad 1. Antibiograma
Se realiza mediante el método de Kirby Bauer modificado, para lo cual, a

partir de una suspensión bacteriana (concentración aproximada a 1,5
cél. /mL), utilizando un hisopo estéril, se siembra por superficie en
placas con Agar Mueller Hinton, luego se lleva a secar a la estufa por 10
minutos aproximadamente. Posteriormente se coloca,
equidistantemente, discos de antibióticos, en la superficie del Agar
Mueller Hinton contenido en las placas de Petri, y luego se incuba a 37º
C por 24 horas. Finalmente se mide el halo de inhibición de crecimiento.
2 PUNTOS
BACTERIA ANTIBIÓTICO HALO DE INTERPRETACIÓN
INHIBICIÓN DE
CRECIMIENTO (mm)
cxm:cefuroxima 40 sensible
Fox:cefoxitina 40 sensible
Staphylococcu 22 sensible
s aureus
F: ciprofloxacino
AUG: amoxicilina y acido 45 sensible

clavulanico
CRO:ceftriaxona 40 sensible
Escherichia CXM:Amoxicilina 27 sensible

coli
F: nitrofurantoína 19 sensible
sensible
CIP: ciprofloxacino 22
23 sensible
AUG:amoxicilina + ácido
clavulánico
SXT:sulfametoxazol - 25 sensible
Trimetoprim
Actividad 2. Espectro antibiótico
Se coloca en el centro de una placa con Agar Mueller Hinton un disco de

antibiótico, posteriormente se siembra, por estría, 4 especies
bacterianas (2 Gram positivas y 2 Gramnegativas) desde el borde del
disco del antibiótico hacia el borde de la placa y luego se incuba a 37º C
por 24 horas.
2 puntos
ANTIBIÓTICO INTERPRETACIÓN
AUG: Amoxicilina + ácido clavulánico Espectro intermedio
V. PRECAUCIONES Y BIOSEGURIDAD
Aprender el manejo cuidadoso de muestras que pueden contener

organismos vivos peligrosos.
Portar la bata y equipo de protección (guantes)
Trabajar siguiendo cuidadosamente el protocolo de la práctica.
Cumplir con las normas establecidas en el reglamento del laboratorio.
Avisar al responsable de la práctica de cualquier accidente por

insignificante que parezca.
No usar equipo que desconozcas su manejo o del cual se tengan

dudas.
VI. CONCLUSIONES (2 PUNTOS)

Por conclusión, el antibiograma es el método o prueba que determina la
manifestación de los gérmenes en los antibióticos.
Agar Mueller Hinton un disco de antibiótico que es de utilidad para realizar la
prueba de los antibióticos en las bacterias
COMO RESULTADOS OBTENIDOS TENEMOS:
NO: NOVOVIANO / 40MM / SENSIBLE
FOX: CEFOXITINA / 40MM / SENSIBLE
F: NITROFURANTOÍNA / 23MM / SENSIBLE
AUG: AMOXICILINA Y ACIDO CLAVULANICO / 45MM / SENSIBLE
CXM: CEFTRIAXONA / 40 MM / SENSIBLE
CXM: AMOXICILINA = 27MM / SENSIBLE

F: NITROFURANTOÍNA = 19MM / SENSIBLE
CID: CIPROFLOXACINO = 22MM / SENSIBLE
AUG: AMOXICILINA + CLAVULÁNICO = 23MM / SENSIBLE
SXT: SULFAMETOXAZOL TRIMETROPIN = 25MM / SENSIBLE
VII. EVALUACIÓN
1. ¿QUÉ SE EVALÚA EN EL ANTIBIOGRAMA? (2 PUNTOS)
Define la eficacia del antibiótico frente a un organismo, para ver cual es la

capacidad para inhibir el crecimiento ya sea de una bacteria o la población
bacteriana.
2. ¿QUÉ SE EVALÚA EN EL ESPECTRO ANTIBIÓTICO? (2 PUNTOS)

Se evalúan
- Espectro Amplio:
- Espectro intermedio:
- Espectro Reducido:
3. UNA VEZ QUE SE TIENE LAS MEDIDAS DE LOS HALOS DE

INHIBICIÓN DE CRECIMIENTO DE LAS BACTERIAS, ¿CÓMO SE
DETERMINA SI DICHAS BACTERIAS SON SENSIBLES O RESISTENTES A
LOS ANTIBIÓTICOS UTILIZADOS? (2 PUNTOS)
En nuestro caso hemos acudido al método del Manual de procedimientos para

la prueba de sensibilidad antimicrobiana.
4. MENCIONE 2 CAUSAS DE LA APARICIÓN DE RESISTENCIA A LOS

ANTIBIÓTICOS.
FUNDAMENTE SUS RESPUESTAS (4 PUNTOS)
⮚ Automedicación: Cuando los antibióticos se usan con demasiada

frecuencia y en dosis inferiores a las recomendadas, las bacterias se
vuelven resistentes.
➢ Uso inadecuado de los antibióticos: Provoca el aumento de la aparición

de bacterias resistentes, ejemplo en la pandemia actual de la covid - 19.
VIII. OBSERVACIONES Y RECOMENDACIONES
❖ Trabajar en grupos de mesa siguiendo cuidadosamente el

protocolo de la práctica.
❖ Preguntar cualquier duda al docente de mesa
❖ Cumplir con las normas establecidas en el reglamento del laboratorio.
❖ No correr, saltar, gritar
❖ No cambiarse de mesa salvo autorización del docente
IX. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS (4 PUNTOS)

Código de LIBROS/REVISTAS/ARTÍCULOS/TESIS/PÁGINAS WEB.TEXTO
biblioteca
616.01 / M95c Murray P, Rosenthal K, Pfaller M. Microbiología Médica. 6ta. ed. Madrid:
Elsevier España; 2009.
579.1788 / M14A Madigan M, Martinko J, Parker J. Biología de los Microorganismos de

Brock. 12ava ed. Madrid: Pearson; 2009.
616.01 / K74A Koneman E et al. Diagnóstico Microbiológico Texto y Atlas. 6ta ed.
Argentina: Médica Panamericana S.A; 2008.
Bauer AW, Kirby WM, Sherris JC, Turck M. Antibiotic susceptibility testing
by a standardized single disc method. Am. J. Clin. Pathol. 1966, 45: 493
Sacsaquispe R, Velásquez J. Presentación del manual de procedimientos

para la prueba de sensibilidad antimicrobiana por el método de disco de
difusión. Serie de normas técnicas N° 30. 2002 [citado el 16 de septiembre de
2022]; Disponible en:
https://www.lareferencia.info/vufind/Record/PE_56647bcd6be88209f5cd82a3
c19060d5
Peinado Rodríguez M. Resistencia a los antibióticos en tiempos de
pandemia. Jaén: Universidad de Jaén; 2021.
https://hdl.handle.net/10953.1/14550
Fajardo-Zapata AL, Méndez-Casallas FJ, Hernández-Niño JF, Molina LH,

Tarazona AM, Nossa C. La automedicación de antibióticos: un problema de
salud pública. Salud Uninorte [Internet]. 2013 [citado el 16 de septiembre de
2022];29(2):226–35. Disponible en: http://www.scielo.org.co/scielo.php?
script=sci_arttext&pid=S0120-55522013000200008&lng=en.

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“AÑO DEL FORTALECIMIENTO DE LA SOBERANIA NACIONAL”

CURSO: Microbiología y Parasitología

DOCNTE: Malqui Ramos, Ingrid Lisset

1. Akuts Chuin, Nora Luz

Laboratorio de: Fecha: 15/09//2022

Antimicrobianos: Quimioterápicos y antibióticos. Mecanismos de acción de los

Explica el crecimiento microbiano

Estudiante: Tiempo desarrollo de la guía:

IV Ciclo de la Escuela Profesional de 150 minutos

El método que actualmente recomienda el CLSI está basado en el

II. CONOCIMIENTOS PREVIOS:

¿Cómo se interpreta el antibiograma?

• Discos de sensibilidad: para Gram positivos y Gram negativos

• 02 tubos con Solución Salina Fisiológica Estéril (5mL c/u)

• 01 Cultivo Staphylococcus aureus

• 01 Cultivo Escherichia coli

• 01 Cultivo de Klebsiella sp.

• 01 Cultivo de Bacillus sp.

IV. DESARROLLO DE LA PRÁCTICA Actividad 1. Antibiograma

Se realiza mediante el método de Kirby Bauer modificado, para lo cual, a

BACTERIA ANTIBIÓTICO HALO DE INTERPRETACIÓN

AUG: amoxicilina y acido 45 sensible

Escherichia CXM:Amoxicilina 27 sensible

Actividad 2. Espectro antibiótico

Se coloca en el centro de una placa con Agar Mueller Hinton un disco de

AUG: Amoxicilina + ácido clavulánico Espectro intermedio

Aprender el manejo cuidadoso de muestras que pueden contener

Portar la bata y equipo de protección (guantes)

Trabajar siguiendo cuidadosamente el protocolo de la práctica.

Cumplir con las normas establecidas en el reglamento del laboratorio.

Avisar al responsable de la práctica de cualquier accidente por

No usar equipo que desconozcas su manejo o del cual se tengan

VI. CONCLUSIONES (2 PUNTOS)

CXM: AMOXICILINA = 27MM / SENSIBLE

1. ¿QUÉ SE EVALÚA EN EL ANTIBIOGRAMA? (2 PUNTOS)

Define la eficacia del antibiótico frente a un organismo, para ver cual es la

2. ¿QUÉ SE EVALÚA EN EL ESPECTRO ANTIBIÓTICO? (2 PUNTOS)

3. UNA VEZ QUE SE TIENE LAS MEDIDAS DE LOS HALOS DE

En nuestro caso hemos acudido al método del Manual de procedimientos para

4. MENCIONE 2 CAUSAS DE LA APARICIÓN DE RESISTENCIA A LOS

⮚ Automedicación: Cuando los antibióticos se usan con demasiada

➢ Uso inadecuado de los antibióticos: Provoca el aumento de la aparición

VIII. OBSERVACIONES Y RECOMENDACIONES

❖ Trabajar en grupos de mesa siguiendo cuidadosamente el

IX. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS (4 PUNTOS)

Elsevier España; 2009.

579.1788 / M14A Madigan M, Martinko J, Parker J. Biología de los Microorganismos de

Sacsaquispe R, Velásquez J. Presentación del manual de procedimientos

Fajardo-Zapata AL, Méndez-Casallas FJ, Hernández-Niño JF, Molina LH,

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