4 2. 1. Control de Calidad de Antibiograma

CONTROL DE CALIDAD
DE
ANTIBIOGRAMAS
• Lic. TM. VALERIANO ROSALES ANDRADE
CONTROL DE CALIDAD
• Se define CALIDAD como el conjunto de

características relacionados con la habilidad
de satisfacer necesidades establecidas para
este producto o servicio.
• En el Laboratorio Clínico se tiene como
finalidad proporcionar resultados validos.
Se requiere :
- Fiabilidad
- Reproducibilidad
- Rapidez
- Relación costo-beneficio.
Factores que alteran la fiabilidad y reproducibilidad :
- El personal
- Factores ambientales
- Muestra
- Material de laboratorio
- Equipo
- Lectura de los Resultados
- Reporte final.
MEDIDAS DE BIOSEGURIDAD :
- El ingreso al Laboratorio debe ser restrigido.

- Utilizar guardapolvos, guantes y mascarilla.
- Está prohibido comer, beber, fumar y maquillarse.
- Las superficies de trabajo deben ser
descontaminadas antes y después del proceso.
- Los desechos del Laboratorio deben ser
autoclavados a 121°C por 15 libras de presión.
Entidades encargadas de la
estandarización de los
metodos de suceptibilidad a
antimicrobianos.
• SISTEMA DIN (PAISES BAJOS)
• SOCIEDAD BRITANICA DE ANTIMICROBIANOS.
• SOCIEDAD FRANCESA DE MICROBIOLOGIA.
• COMITÉ AMERICANO DE ESTANDARIZACION DE
LABORATORIO CLINICO.
ANTIBIOGRAMA :
CONCEPTO
• Es la técnica actualmente utilizada para la

determinación de la sensibilidad a los
antimicrobianos frente a un microorganismo
en cuestión.
HISTORIA :
Antiguamente en Egipto, las personas se

curaban de alguna dolencia, comiendo pan
mohoso.
Los primeros datos científicos datan desde
el descubrimiento de los antimicrobianos,
en 1928 con Alexander Fleming.
PRINCIPIO
• La cantidad constante de antimicrobiano en un

reservorio(disco de papel) aplicado sobre la
superficie del Agar en el cual se ha cultivado un
microorganismo.
• Se formara así por difusión, un gradiente de
concentración del antimicrobiano y la sensibilidad
del microorganismo estará indicada por tamaño el
tamaño de la zona de inhibición del crecimiento.
• El diámetro obtenido dependerá no
sólo de la sensibilidad del
microorganismo y la carga del
disco, sino también del espesor de la
capa de agar, su pH. y su
composición, de la capacidad de
difusión de la droga en este medio, la
temperatura, la velocidad de
duplicación bacteriana, y el tamaño y
fase de crecimiento del inóculo.
Métodos de Antibiograma
Existen 2 métodos :
A. POR DIFUSION :
- Met.. Disco Placa ( Kirby – Bauer)
- Met. Epsilon Test
B. POR DILUCION :
- Met. Dilución en Agar.
- Met. Dilución en Caldo
A. MET. POR DIFUSION:
• 1. MET.DISCO PLACA O KIRBY-

BAUER :
Consiste en depositar una cantidad
constante de antimicrobiano en un
reservorio sobre una superficie previamente
inoculada y tan pronto como el disco
impregnado de Atb toma contacto con el
agar, este difunde en forma radial.
• AGAR MUELLER HINTON :
Medio que no posee inhibidores y donde
crece la mayoría de patógenos.
- Libre de iones y concentración regulada de
iones divalente Ca, Mg y Zn.
- Posee alta reproducibilidad lote a lote.
- Bajo nivel de Timina y Timidina.
Características del Medio :
. pH : 7.2 –7.4
. Humedad
. 4 mm de espesor en placas de 100 ml.
. Controlar la esterilidad 24 h a 37°C.
• El inóculo:
El inóculo estandarizado, se puede preparar
resuspendiendo colonias en solución salina
estéril hasta alcanzar la turbidez de 0,5 de
McFarland.
Esta suspensión contiene 1-2x108 UFC/ml.
• Los Discos de ATB :
Mantenerlos refrigerados a 8°C
Los discos que pertenecen a la familia de los
betalactámicos pierden su potencia al estar
frente al calor.
Antes de colocar los discos deben de
atemperarse y evitar su desecación.
• Lectura de placas e interpretación :
Después de 16 a 18 horas de incubación
examinar cada placa y medir los diámetros
de las zonas de inhibición.
En medios suplementados con sangre, se
deberá medir la zona de inhibición del
crecimiento, no la zona de inhibición de la
hemólisis.
Factores técnicos que influyen en
el tamaño de la zona :
• Densidad del inóculo.
• Momento en que se colocan los discos.
• Temperatura y Tiempo de incubación.
• Espesor del medio y separación de discos.
• Potencia de los discos de Antibióticos.
A. MET. POR DIFUSION :
2. E- TEST :
Es una técnica cuantitativa para la
demostración de la susceptibilidad
antimicrobiana que es capaz de inhibir el
desarrollo bacteriano.
Las consideraciones de la prueba incluyen
demostrar la eficacia clínica de un fármaco
y resistencia.
2. EPSILÓN TEST
B. MET. DE DILUCION
Método que se basan en la determinación del
crecimiento del microorganismo en
presencia de concentraciones crecientes del
antimicrobiano que se encuentra diluido en
el medio de cultivo.
Estos métodos se vienen usando para la
determinación de la CIM y la concentración
mínima bactericida.
• Existen 2 tipos del Métodos de
dilución :
1.Dilución en Agar
2.Dilución en Caldo
Interpretación de los
resultados :
El clínico debe interpretar los resultados
y seleccionar racionalmente los
antibióticos más apropiados para su
paciente, conociendo la
farmacocinética del antibiótico, su vida
media y datos de aislamientos
bacterianos similares.
CONTROL DE CALIDAD :
Cepas Control
• E.coli ATCC 25922
• S.aureus ATCC 29223
• P.aeruginosa ATCC 27853
• E.faecalis ATCC 29212
• E.coli ATCC 35218
• N.gonorrheae ATCC 49226
• H.influenzae ATCC 49766
• K.pneumoniae 700603
Antibiograma de Staphylococcus spp.
• Antibióticos a incluir :
-Oxacilina
-Eritromicina
-Clindamicina
-Vancomicina
-Gentamicina
-Ciprofloxacina
Antibiograma de Enterococcus spp
-Ampicilina
-Gentamicina(disco de 120 ug)
-Estreptomicina(disco de 300 ug)
-Vancomicina
-Nitrofurantoína
Antibiograma de Pseudomona
aeruginosa
-Ceftazidima
-Cefoperazona/Sulbactam
-Imipenem y/o Meropenem
-Amikacina
-Norfloxacina
-Ciprofloxacina
Antibiograma de Enterobacterias
-Ampicilina
-Amoxicilina/Ac.clavulánico
-Aztreonam
-Amikacina
-Ac.Nalidíxico
-Nitrofurantoína
Antibiograma de Streptococcus
pneumoniae
-Oxacilina
-Eritromicina
-Cotrimoxazol
-Levofloxacina
-Vancomicina
-Rifampicina
Antibiograma de Haemophilus sp
-Ampicilina
-Ampicilina/Sulbactam
-Creftriaxona
-Cotrimoxasol
-Cloranfenicol
-Cefepime
Antibiograma de Vibrio cholerae
-Ampicilina
-Cloranfenicol
-Ciprofloxacina
-Furazolidona
-Tetraciclinina
-Eritromicina
MICROORGANISMOS
PROBLEMAS :
1.Detección de Resistencia en Staphylococcus.
- Resistencia a meticilina u oxacilina
- Sensibilidad reducida a vancomicina
2.Detección de Resistencia en Enterococcus.
- Resistencia a penicilina/ampicilina
- Resistencia a vancomicina
- Alto nivel de resistencia a aminoglucósidos.
3.Bacilos gram negativos productores de BLEEs.
4.Detección de Resistencia de St.pneumoniae
5.Detección de Resistencia de N.meningitidis
6.Detección de Resistencia de Haemophylus
7.Detección de Resistencia de
microorganismos no fermentadores.
PROTOCOLOPARAUNCONTROLDECALIDAD
CONTROLMENSUAL
PRUEBASFUERASDELRANGO
ACCIONESCORRECTIVAS
RESULTADOSVERIFICADOS
CONCLUSION
• La importancia de adquirir
confianza en las pruebas, obtener
una información rápida y segura y
lograr la precisión de los resultados
permite mejorar la calidad de los
ensayos.
“La sabiduría y el dinero
dan protección, pero la
sabiduría tiene la ventaja
de dar vida a quien la
posee.”
Eclesiastés 7:12
LA BIBLIA
MUCHAS GRACIAS

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• Se define CALIDAD como el conjunto de

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• La cantidad constante de antimicrobiano en un

• 1. MET.DISCO PLACA O KIRBY-

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