Informe de Laboratorio 2 Determinacion de Alcoholes

UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZO
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

CARRERA DE LABORATORIO CLÍNICO
INFORME DE PRÁCTICA DE LABORATORIO

PERÍODO ACADÉMICO 2022 2S
ASIGNATURA Laboratorio Toxicológico SEMESTRE: PARALELO: A
Octavo
NOMBRE DEL DOCENTE Dr. Wilson Moncayo
FECHA 07-12-2022
NÚMERO DE PRÁCTICA 02 HORA: 15:00 - 18:00 DURACIÓN: 3
horas
LUGAR DE LA PRÁCTICA LABORATORIO UNACH – E 301
TÍTULO DE LA UNIDAD Toxicología y análisis toxicológico
TEMA DE LA PRÁCTICA Determinación de alcohol- Test Sulfocrómico
 Ayala Castillo Jhonny Gabriel
 Carmilema Tuquinga María Fernanda
 Lliquin Guashco Lizeth Maritza
NOMBRE DE LOS
 Londo Asqui Erika Dayana
ESTUDIANTES
 Padilla Riofrio Darwin Jhovany
 Peralvo Porras Lenin Ariel
 Sánchez Paguay Karina Maribel
RESULTADO DE APRENDIZAJE
Los resultados de aprendizaje demuestran lo que el estudiante será capaz de resolver al finalizar un
proceso formativo.
 Emplear técnicas cualitativas para la determinación de alcohol en
OBJETIVO GENERAL diferentes muestras.
 Destacar la importancia del uso del test sulfocrómico como prueba
cualitativa en la determinación de alcohol en diferentes muestras.
OBJETIVOS  Conocer la importancia de la determinación de etanol en
ESPECÍFICOS muestras de sangre.
 Interpretar correctamente los resultados en la identificación de
alcoholes.
FUNDAMENTO TEÓRICO:
Identificación de alcohol
Los alcoholes son el grupo de compuestos químicos que resultan de la sustitución de uno o varios átomos
de hidrógeno (H) por grupos hidroxilo (-OH) en los hidrocarburos saturados o no saturados.
Una prueba de laboratorio simple que se puede emplear para señalar la presencia de un alcohol (u otras
moléculas orgánicas que contienen hidrógenos de acidez parecida o mayor) es la reacción del sodio
metálico. Si el sodio se disuelve con la liberación de un gas, existe por lo menos una posibilidad de que el
compuesto sea un alcohol; sin embargo, la prueba de Lucas y la del ácido crómico son dos reacciones
importantes que constituyen la parte medular de la clasificación de los alcoholes.
El ácido crómico, es un agente oxidante común, que puede usarse para convertir alcoholes primarios en
aldehídos. Este ácido es inestable durante largos períodos, y como resultado de ello, generalmente se prepara
en solución al tratar dicromato de potasio con ácido sulfúrico o acético. Este método tiene la desventaja
potencial de que también oxida aldehídos a ácidos carboxílicos, en especial si se deja que el aldehído quede
en contacto con el ácido crómico por cierto tiempo.
El reactivo oxida alcoholes primarios y secundarios y a medida que lo hace se presenta un notable cambio
de color. Los alcoholes terciarios o cetonas, no se ven afectados por el reactivo. El reactivo de ácido crómico
es color naranja, y se indica una prueba positiva cuando este color cambia a un precipitado o emulsión verde
o azul verdoso. Los alcoholes primarios y secundarios, así como los aldehídos, producen una reacción
positiva en 5 segundos o menos, en tanto que los alcoholes terciarios y las cetonas no se ven afectadas por
la prueba (Castillo, 2015).
Mezcla sulfocrómica
La mezcla sulfocrómica es uno de los agentes de limpieza más violentos de uso común, pues posee un
altísimo poder oxidante. Su utilización está muy difundida, pero se deben tomar ciertas precauciones y
conocer alguno de sus efectos para no cometer errores que puedan acarrear situaciones peligrosas o grandes
pérdidas de tiempo. Consiste en una solución diluida de dicromato de sodio o potasio, (CrO7Na2 o
Cr2O7K2), en ácido sulfúrico concentrado.
Salvo para casos excepcionales no debe prepararse con drogas puras o pro análisis, porque ello es un gasto
absolutamente innecesario.
La elección de la base se hace teniendo en cuenta que el de potasio es menos higroscópico y puede
conservarse indefinidamente en recipientes de cierre común, pero es bastante más caro que el de sodio.
En condiciones normales es aconsejable utilizar este último de grado comercial, que además es más fácil de
conseguir (Hidalgo, 2015).
Es mejor el vidrio transparente porque así se puede observar el color que va tomando la solución: El anión
dicromato es anaranjado rojizo, y a medida que se reduce a catión crómico va verdeando. Cuando el color
de la solución es verde botella, ya no posee poder oxidante y debe desecharse.
Figura 1. Izquierda: solución recién preparada, centro: aún posee poder oxidante y derecha debe descartarse porque no le
queda dicromato.
Etanol
Es un líquido incoloro, volátil, con un olor característico y sabor picante. También se conoce como alcohol
etílico. Sus vapores son más pesados que el aire. Se obtiene, principalmente, al tratar etileno con ácido
sulfúrico concentrado y posterior hidrólisis. Algunas alternativas de síntesis son: hidratación directa de
etileno en presencia de ácido fosfórico a temperaturas y presiones altas y por el método Fischer-Tropsch, el
cual consiste en la hidrogenación catalítica de monóxido de carbono, también a temperaturas y presiones
altas. Su fórmula química es CH3-CH2-OH, principal producto de las bebidas alcohólicas (Ramírez, 2013).
Determinación de etanol en muestras de sangre
Dentro de los tóxicos volátiles, los alcoholes etanol (alcohol etílico) y metanol son sustancias de importancia
toxicológica, dada su acción farmacológica depresora del sistema nervioso central (SNC) y el abuso
creciente del consumo de bebidas alcohólicas. Esto último presenta importancia médico legal debido a que
los individuos alcoholizados pueden ser causantes de trastornos y accidentes de los cuales son imputables.
En el caso del etanol, la intoxicación más frecuente ocurre cuando el individuo ingiere cantidades excesivas
de esta sustancia por el consumo de bebidas alcohólicas fermentadas y/o destiladas. Los tipos de muestras
generalmente usados para estas determinaciones son: sangre (alcoholemia), orina, otros fluidos biológicos,
vísceras, alimentos, etc (Ministerio Publico, 2010).
Metanol
Su fórmula química es CH3OH. El metanol es el más simple de los alcoholes y es tóxico. A elevadas
concentraciones, el metanol puede causar dolores de cabeza, mareos, náuseas, vómitos y la muerte. Una
exposición aguda puede causar ceguera. Una exposición crónica puede ser causa de daños al hígado.
El metanol (alcohol de madera o alcohol de quemar) es un agente químico de uso industrial que se encuentra
en numerosos productos de limpieza, anticongelantes, pinturas y barnices. La intoxicación puede tener lugar
de forma accidental al manipular estos productos (Castillo, 2015).
MATERIALES Y MÉTODOS
Materiales Equipos Reactivos
 Probeta  Centrifuga  Cerveza
 Tubos de ensayo
 Gradilla  Pipetas  Reactivo de
 Matraz aforado dicromato de
potasio y ácido
sulfúrico
 Muestra de sangre
PROCEDIMIENTO / TÉCNICA:
Determinación de alcaloides
Preparación de una solución etílica al 2% (Tubo1)
1. La muestra que se utiliza 2. Con ayuda de una probeta

fue una cerveza con una tomamos 36,36ml de la cerveza
concentración al 5,5 %
y trasvasamos al matraz
2. Para conocer la cantidad V1=2X100/5,5 aforado hasta debajo de la línea
para preparar la solución se de aforo completándolo con
aplica la siguiente formula V1=36,36ml
agua destilado
C1V1=C2V2
Preparación de la muestra de suero (Tubo 3)
1. Realizamos la 2. La muestra se la entrega

3. Centrifugamos la
extracción de sangre en al docente para que coloque
muestra para obtener
un tubo tapa rojo. alcohol o agua dentro de la
el suero
muestra.
Preparación de los tubos con las muestras
1. Preparar el reactivo de 2. Tubo 1 solución etílica

trabajo que es test al 2% colocamos 500 ul
sulfocrómico y en un tubo de ensayo
adicionamos 1000ul en
cada tubo de ensayo.
4. Tubo 3 colocamos 500ul

de la muestra de suero esta 3. Tubo 2 colocamos 500ul de
puede o no puede tener la concentración pura (alcohol)
alcohol en un tubo de ensayo en un tubo de ensayo.
6. Si se produce un cambio
5. Tubo 4 colocamos 500 ul
de color, el análisis es
de la muestra problema en un
positivo caso contrario esta
tubo de ensayo
será negativa
OBSERVACIONES
Figura 1. Preparación de la solución alcohólica al 2%.
Para la preparación de la solución alcohólica al 2% se aplicó la ley de concentración-volumen, la solución

que se preparo fue de 100 ml es decir 63,64 ml de agua destilada y 36,36 ml de la bebida alcohólica (cerveza
artesanal con 5,5 % de concentración). El volumen de la preparación en el balón aforado está por debajo de
la línea de aforo debido a que es una solución colora.
Figura 2. Muestra biológica suero del paciente.
El suero del paciente posterior a la centrifugación presento hemolisis. Así mismo la determinación de
alcohol en sangre resulto negativa debido a que se añadió agua a la muestra del paciente (suero) y no alcohol.
Figura 3. Resultados de la determinación de alcohol etílico.
Después de añadir 1 ml del reactivo de H2SO4-K2C12O7 en los tubos A,B,C,D se añadió en cada uno la
solución previamente establecida, posterior se realizó la lectura e interpretación de los mismos. Tubo A
(solución alcohólica al 2%), tubo B (muestra pura cerveza) y tubo D (puede o no contener alcohol etílico)
tomaron un color verde, mientras que el tubo C (muestra biológica suero del paciente) mantuvo el mismo
color.
La determinación de alcohol etílico en los tubos A, B y D fue positiva debido a que cambio a color verde
característico de esta determinación, mientras que la del tubo C fue negativa debido a que mantuvo el color
ya que la muestra de suero no contenía alcohol sino agua.
RESULTADOS
Tubo 1 muestra
estándar
Tubo 4 muestra
Cambio de color desconocida
de un naranja a un
color verdoso Cambio de color de un
naranja a un color
verdoso
Tubo 2 muestra pura Tubo 3 muestra suero
Cambio de color de un naranja a Cambio de color de un naranja a

un color verdoso un color verdoso
Interpretación de resultados
 Tubo 1 muestra estándar (Positivo)

 Tubo 2 muestra pura (Positivo)
 Tubo 3 muestra suero (Positivo)
 Tubo 4 muestra desconocida (Positivo)
La muestra es negativa cuando mantiene su color original en este caso el color naranja.
La muestra es positiva cuando hay un cambio de color que pasa de un naranja a un color verdoso.
Pero la muestra del tubo tres nos dio un falso positivo ya este no era alcohol era solo agua entonces al haber
una hemolisis de la muestra por lo que es importante que se obtenga correctamente la muestra y se
centrifugue a las revoluciones adecuadas.
CONCLUSIONES
 . El método de Sheftel modificado más conocido como colorimétrico diferencial, se fundamenta en
la oxido-reducción de la mezcla sulfocrómica sobre el alcohol etílico con formación de ácido acético
y sulfato crómico, cuya intensidad de color varia de amarillo al verde en forma proporcional a la
concentración a la concentración de alcohol etílico presente en la muestra.
 La determinación de etanol se puede utilizar tanto para fines médicos como legales. Las muestras y
los resultados se tratan de manera distinta dependiendo del fin para el que vayan a utilizarse. Suelen
utilizarse muestras de sangre en las que se determina la concentración de etanol, cuando una persona
acude a urgencias con signos y síntomas sugestivos de una intoxicación etílica, se le puede pedir la
determinación de etanol.
 En los resultados obtenidos a través del reactivo, que tiene dicromato de potasio y ácido sulfúrico,
que es de color amarillo; al pasar el alcohol esto varía a color verde. Es decir se indica una prueba
positiva cuando este color cambia a un precipitado verde y negativo cuando mantiene su color.
RECOMENDACIONES
 Manejar todos los reactivos a utilizar con cuidado ya que pueden ser perjudiciales para el cuerpo.
 Utilizar todos los implementos de bioseguridad.
 No realizar la asepsia con de la zona de punción en la extracción sanguínea para evitar interferencias
en los resultados.
BIBLIOGRAFÍA
Castillo, J. (2015). Manual de prácticas de laboratorio Química orgánica y aplicada. Obtenido de
Identificación de alcoholes: https://www.uqroo.mx/lab_quimica/archivos/manual_qoya_uqroo.pdf
Hidalgo, L. (2015). Mezcla sulfacrómica. Obtenido de https://www.studocu.com/ec/document/universidad-

de-guayaquil/quimica-ii/mezcla-sulfocromica/3329980
Ministerio Público. (2010). Determinación de Etanol en Muestras de Sangre . Obtenido de

http://criminalistica.mp.gob.ve/wp-
content/uploads/2015/10/Microdifusi%C3%B3n_en_c%C3%A1mara_de_Conway.pdf
Ramírez , P. (2013). Etanol. Obtenido de https://quimica.unam.mx/wp-

content/uploads/2008/05/12etanol.pdf
Mgs. Ximena del Rocío Robalino Flores Dr. Wilson Moncayo

DIRECTORA DE CARRERA DOCENTE

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Preparación de una solución etílica al 2% (Tubo1)

1. La muestra que se utiliza 2. Con ayuda de una probeta

Preparación de la muestra de suero (Tubo 3)

1. Realizamos la 2. La muestra se la entrega

1. Preparar el reactivo de 2. Tubo 1 solución etílica

4. Tubo 3 colocamos 500ul

Figura 1. Preparación de la solución alcohólica al 2%.

Para la preparación de la solución alcohólica al 2% se aplicó la ley de concentración-volumen, la solución

Figura 2. Muestra biológica suero del paciente.

Figura 3. Resultados de la determinación de alcohol etílico.

Tubo 2 muestra pura Tubo 3 muestra suero

Cambio de color de un naranja a Cambio de color de un naranja a

 Tubo 1 muestra estándar (Positivo)

Hidalgo, L. (2015). Mezcla sulfacrómica. Obtenido de https://www.studocu.com/ec/document/universidad-

Ministerio Público. (2010). Determinación de Etanol en Muestras de Sangre . Obtenido de

Ramírez , P. (2013). Etanol. Obtenido de https://quimica.unam.mx/wp-

Mgs. Ximena del Rocío Robalino Flores Dr. Wilson Moncayo

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