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• 1ère fction de Mb : compartimentation fondamentale/ Cell. //rôle Frontière

physique entre M. intra- et extracell, + maintient des propriétés ≠ /chacun d’eux.
• Caractère hydrophobe de Bicouche lipidique permet à cellule maintenir [ ] de
solutés ≠ de part et d'autre de Mb, càd. entre cytoplasme et M. extracellulaire et
ceci est vrai pour chaque compartiment cellulaire (Mitoch, lysosome, RE, etc.).
• //caractère hydrophobe, s’oppose à libre diffusion ions et solutés hydrophiles,
Echanges et fonctions de même qu’à celle de la plupart des macromolécules biologiques.
des systèmes membranaires cellulaires • Séparation des compartiments // Mb ne doit cependant pas être totale et des
échanges moléculaires sont nécessaires à la vie cellulaire.
• Contradiction avec 2nd fction que doit exercer Mb //assurer de nbreux échanges.
• Fctionnement cell.  importation continue Mières 1ère (ou de combustibles) et
exportation des produits ou déchets du métabolisme.
• Cellules développées systèmes de transport d'ions et molécules // intervention
des protéines Mbaires : co-transporteurs, pompes ou canaux.

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• Raisons pour lesquelles cellules ont besoin de ces protéines de transport :

 approvisionnement en métabolites,
 élimination des déchets métaboliques,
 maintien de concentrations ioniques bien définies.

• Différents transports Mbaires:

a) Pour molécules simples:
 Transport passif (sans ) : Diffusion simple , Diffusion facilité, Osmose
 Transport actif (nécessite ) : Pompe , Co-transporteur
b) Pour molécules complexes: (Cf. Exposé)
 Endocytose : phagocytose, pinocytose
 Exocytose :

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I. TRANSPORTS PASSIFS (TP) :

• Sans dépense d’
• Toujours dans le sens du gradient de [ ]
• Se produit même si cellule est morte.
• On distingue 3 types: Diffusion simple, Diffusion facilitée, Osmose
I.1. Diffusion simple (DS):
• Processus passif (n’utilise pas d’ATP)
• Diffusion /Mb / sens [ ] fortes  [ ] faibles jusqu’à équilibre [ ] part et autre Mb
• Subst. diffuse suivant son gradient [ ] : de zone la + [ ] à zone qui l’est moins.
•  quelques molécules qui traversent naturellement Mb par simple diffusion :
petites molécules et molécules hydrophobes (liposolubles)
• Vitesse de diffusion d’une molécule est :
 proportionnelle à son Gradient de [ ]
 proportionnelle à son Hydrophobicité.
Extracellulaire Intracellulaire
 inversement proportionnelle à sa taille. 5 6

I.2. Diffusion facilitée (DF) :

• TP (sans  car respecte gdient de [ ]) + intervention des protéines
• Condition de la molécule :
 Grosse taille
 Non liposoluble
 Ex: sucres, ions (Na+, K+…)
• Des protéines de la Mb permettent le passage de ces molécules à travers lipides:
 Protéines porteuses/perméases (transporteuses): s’associent aux molécules
à transporter et les déplacent dans Mb
 Protéines tunnels/conductines (canaux): forment des pores à travers Mb.

Protéines porteuses/perméases
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 DF à travers pores ioniques : (Canaux protéiques, Canaux ioniques)

• Passage sans dépense d’, dicté par 1gradient électrochimique de l’ion,
• Passage //2paramètres: forces électrostatiques intérieur du canal et  du pore:
• Passage des ions est très rapide (106 ions/s) (103 fois + rapide que autre protéine porteuse).
• Sont très sélectifs et uniport (un sens, une molécule).
• Possèdent caractéristique fondamentale : il s’agit de «portes» en général fermées,
dont l’ouverture brève est commandée par 1signal extérieur.
• ≠types : 1) canaux s’ouvrant// champ électrique transMbaire (régulés par PM),
2) canaux sensibles à fixation Ligand (ion, neurotransmetteur, nucléotide, protéine)
(régulés/ligand), 3) canaux sensibles//mécaniques (régulés mécaniquement).
• Les + répandus (/ Mb plasmique des cellules Ales), canaux tjrs ouverts (non régulés)
perméables au K+ (canaux de fuite du K+) interviennent/maintien du PM.
• Canalopathies : ens. de maladies en rapport avec dysfonctionnemnt des canaux
ioniques Mbaires (canalopathie musculaire, cardiaque, cérébrale).
Protéines Tunnels (canaux)
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Diffusion simple Diffusion facilitée 11 Comportement des molécules avec charge nette 12

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 DF à travers perméases : (Transporteuses ou protéines porteuses)

• Fonctionnent passivement et pas consommation d’ ; seul 1gdient de [ ] qui .
• Une fois liées/molécule  Cgmt Conformation  Passage de l’autre côté de Mb
• Ne présentent jamais simultanément site de fixation du soluté des 2côtés de Mb.
• Mécanisme moléculaire du transport encore pas totalement éclaircies!!!!
• Fixation/Transfert du soluté//perméase : processus idem//réact. type Enz/Substrat.
• Formalisme classique/Enzymologie//sauf «substrat» ici pas chimiquement modifié

Comportement des molécules sans charge nette

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Ex d’une protéine porteuse : perméase au Glucose (GLUT-1)

1. Assure diffusion du glucose,
2. Uniporteur (transporte une seule substance) ,
(1) & (2) fixation molécule Glu sur site extérieur  Chgmt Conformation,
3. Glucose libéré dans cytosol,
4. Transporteur retourne à sa conformation de départ.
• Spécificité de ce transporteur élevée car seules molécules chimiquement très
voisines du Glu peuvent être transportées : galactose, fructose, mannose… ;
d’autres composés, tels mannitol ou méthyl-glucose, ne sont pas reconnus.
• Fait différence entre isomères D et L, ces derniers exclus du transport.
• DF par transporteur  largement vitesse et sélectivité de transport //DS
• On compare DS à DF  différence en efficacité transport
• Transporteur de glucose (GLUT1) illustre bien ces 2aspects.

Efficacité du transport Mbaire

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I.3. Osmose
• Rappel: Durant Osmose, eau (solvant), traverse sélectivement Mb perméable
du M. hypotonique (le – [ ], le + dilué) vers M. hypertonique (le + [ ], le - dilué).
• Eau cherche à diluer M. hypertonique jusqu'a atteindre équilibre part et autre Mb.
• Osmose : passage molécules d’eau à travers Mb semi perméable (perméable à
l’eau mais pas aux solutés) en 2 compartiments de [ ] ≠ en solutés.
Osmose si 2 zones de [ ] ≠ séparées par Mb perméable à eau, mais imperméable au soluté
• Puisque Mb perméable à l’eau, peut donc traverser Mb si  gradient de [ ].
• Osmose ne nécessite aucune  et ne concerne que déplacements d'eau.
• Isotonique (normale) ; Hypotonique (cytolyse) ; Hypertonique (plasmolyse)
• Plasmolyse : Contraction du contenu d’1cellule en raison d’1perte d’eau.
La perte d’eau  entraîne diminution de pression de turgescence/cellule végétale.

Spécificité du transport Mbaire par GLUT1 • Cytolyse (lyse) : Éclatement de Mb cellulaire, provoque destruction de la cellule.
*Spécificité illustrée//GLUT1 qui a besoin 1,5 mM de D-Glu pour fctionner à 50% (Km) de sa capacité
maximale (Vmax), nécessite + de 2000 fois + de L-Glu pour 1transport équivalent de cet isomère
*De même, pour D-mannose ou D-galactose il lui faut respectivement 20 et 30 mM.
Ainsi, lorsque ces glucides sont tous présent à [ ]  5 mM, D-Glu passera préférentiellement 17 18

Aquaporines (AQP)
• Comment l’eau traverse Mb des cellules?
• Passage lent à travers phopholipides Mbaires.
• Passage rapide à travers canaux Mbaires spécifiques : AQP.
• Passage Eau part et d’autre Mb//empêchant ions de pénétrer/cell.
• AQP expliquent la +/- gde perméabilité des Mb cell. biologiques à l'eau.
• Petit diamètre de 0,2nm //  500 AQP découvertes/Vgl et Al, dont 13 / Homme
• Comparer à un sablier qui ferait passer une à une molécules
• Permettent aux cellules d'absorber, conserver ou excréter eau,
• Jouent rôle majeur /contrôle d'hydratation des organismes vivants et /circulation
de l'eau entre ≠ organes ou différentes parties d’une cellule.
• Mutations des AQP: mutations des 2 allèles de l’AQP 2 (abondement exprimée
/cellules d’épithélium rénal) responsables du diabète insipide, maladie caractérisée
par excrétion de volumes >> d’urine très diluée 8L-10L/jour.
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II. TRANSPORTS ACTIFS (TA):

• Ressemble à DF (nécessite présence d’1transporteur Mbaire) mais :
– Transport à l’encontre du gdient de [ ] (du M. moins [ ] vers M. le + [ ])
– Donc besoin d’1source d’ (scission ATP, lumière, réact. oxydo-réduction)
• A quoi ça sert TA ?
• Permet aux cellules de conserver M.intérieur ≠ du M. extérieur. (But du TA)
(M. Int/M. Ext // Na+: 10mM/145mM ; K+ : 140mM/5mM ; Cl-: 4mM/110mM,..)
• TA entraîné par  d’ATP:
– Protéines transMbaires// Souvent appelées ATPases
– Possèdent 1/ +eurs sites de liaison pour ATP // Tjs sur face cytosolique de Mb
– ATPases //capacité de liées ATP et l’a clivé   nécessaire pour transporter
des molécules contre leur gradient

Coupe schématisée d'une AQP

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Caractéristiques du TA : II.1. Pompes:

• Peut se faire contre gdient de [ ] // en sens inverse de la diffusion. • Ce type de transport dénommé «TA Iaire» (capacité  102-103 ions/sec).
• Nécessite une dépense d’ de la part de la cellule. • Couplage entre transport de molécule contre son gdient et hydrolyse d’ATP :
• Nécessite une protéine de transport. • Pompes : définies comme protéines de transport qui utilisent hydrolyse d'ATP
(ATPases) suivie de transfert temporaire de phosphate sur protéine de transport
Fait >> : au repos, 40 % d’ dépensée sert d’entretenir mécanismes de TA /Mb ;
 Chgment de conformation nécessaire au déplacement du soluté.
Sans mécanismes du TA, [ ] s’équilibreraient//diffusion, composition interne
identique à [ ] externe.  Mort de cellule. • Bien que détails peu connus!!, transfèrent soluté en subissant chgmt conformation
REV qui expose alternativement site Liaison du soluté sur face puis sur l'autre.
• Passage d'ions/petites molécules nécessite profond chgmt de conformation
 pompes ioniques : protéines se fixent à substance puis, en se déformant, (grâce à
• Transport bcp + lent mais permet aux solutés de traverser contre leur gdient
molécule qui fournit  à la protéine) fait traverser Mb à cette substance :
•  2 principales classes de transporteurs de TA : Pompes & Co-transporteurs
* pompe à Na+/K+-ATPase : rejette 3Na+ et faire entrer 2K+. (Ex: Si surplus AA/
formés de protéines +ieurs fois transMbaires (allant de 10 à 14 passages Mbaires). électrolytes tels Na+ et K+, ceux-ci seront transportés contre gdient [ ] par TA //pompes)
Ces transporteurs n'ont pas de pore apparent.
* pompe Ca2+ -ATPase : assure sortie du Ca2+ vers M. extra cellulaire.
• Transfèrent molécules de soluté à travers Mb selon principe de réaction «E-S»
 pompes à molécules : Transporter petits peptides, H. stéroïdes, ≠ types d’H,

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Ex1: Pompe Na + / K + : (ATPase Na+/K + )

• Transport Na+ et K+ étroitement couplé à hydrolyse d'ATP pour transfert des ions
contre leur gradient électrochimique (TA Iaire).
[Na+]ext = 15 [Na+]cyt [K+]cyt = 30 [K+]ext
• Raison de ces déséquilibres ioniques (≠ces engendrées et maintenues par) due à
présence de pompe Na+/K+, située /Mb, qui chasse (expulsant activement Na+)
Na+ vers extérieur et concentre simultanément (important K+) K+ / hyaloplasme,
«luttant» sans cesse contre gdients de [ ] de ces ions.
• Echange dans un rapport précis : 3ions Na+ contre 2ions K+
• Maintient [ ] cytosoliques faible de Na+ et élevée de K+ (Maintient gdients Na+/K+)
• Mécanisme de transport //3 étapes :
 fixation des ions à haute affinité,
 transfert des ions au travers de la Mb,
Fonction de la pompe Na + /K+
 réduction d'affinité qui permet libération des ions.
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•  dynamisme engendré par fixation d'ATP et son hydrolyse subséquente, qui se

traduit par phosphorylation transitoire du transporteur sur résidu Asp 369.
• «Hydrolyse/phosphorylation/déphosphorylation» nécessaire au transport des ions
• Gdient Na+/K+ généré de part et d'autre de Mb essentiel au fonctionnement Cell.:
 régulation du pH,
 régulation du volume cellulaire,
 transport de nutriments tels que glucose et certains AA,
 transmission du signal dans le système nerveux (potentiel d'action).
• Près du tiers d’ cell. dépensée/cell. Ale sert pour fonctionnement cette pompe.
• Expérimentalement, ouabaïne (glycoside extrait de digitale) inhibe pompe Na+/K+

Organisation schématique de la Pompe Na+/K +

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Extracellulaire • Pompe Na+/K+ identifiée Enz. hydrolysant ATP (ATPase) // en présence Na+ et K+
• Sa localisation spécifique /Mb ATPase et pompe = une seule et même entité.
• Expériences//Mb/GR  caractériser Activité : hémolyse ménagée, «refermer» Mb autour
Milieu de composition contrôlée, aussi bien du pt de vue ionique (utiliser ions radioactifs
pour faciliter l’analyse) que de [ ] en ATP ou en inhibiteurs. Après centrifugation,
transfert des cell. /autre type de milieu suivi d’étude du flux ioniques.
• Observations :
1) Transferts de Na+ et K+ obligatoirement couplés à l’hydrolyse de l’ATP,
2) présence simultanée K+ à l’extérieur et Na+ à l’intérieur indispensable//échanges,
3) Ouabaïne n’agit comme inhibiteur que si elle est à l’extérieur cellules, où elle entre
en compétition avec ions K+ au niveau d’un site de liaison commun,
4) Pour chaque ATP hydrolysé, 3Na+ sont échangés contre 2K+.
• Lien précis  entre hydrolyse d’ATP et étapes Transfert des ions devenu + clair ;
mécanisme en 6 étapes :

Intracellulaire
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Pompes Na+/K+ et canaux ioniques K+ et Na+

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Ex2: Pompe à Ca2+ : (ATPase Ca2+)

• Pompe : tétramère constitué de 2 types de sous-unités, la + grosse (α) possédant
• Cell Ales maintiennent [ ] intracell. très faibles Ca2+ (Intra:10– 7M // Extra:2.10– 3M)
toutes les activités de cette pompe : ch. De 1000 AA , traverse 10 fois Bicouche
• Gdient de Ca2+ maintenu grâce pompe Ca2+ /Mb, rôle chasser Ca2+ libre intracell
• Rôle de la petite (β) mal connu !! : glycoprotéine.
• Pompe  /Mb plasmique et aussi/Mb REL «compartiment de rétention du Ca»
• Position du cplexe par rapport à bicouche déterminante pour son fonctionnement;
constituant normal de tte cell. ; mais particulièrement développé/cell. musculaires
« mise en place précise d’1protéine / Mb ? »
striées «Réticulum sarcoplasmique». /ce cas, fction de pompe Ca2+ séquestrer et
• Echange de 2ions (+) contre 3ions (+), au cours même événement (cotransport de accumuler Ca2+ au sein ces vésicules spécialisées // Rôle/contraction musculaire.
type antiport), conduit à déséquilibre de charges électriques entre 2faces de Mb ;
• Pt de vue structure / fction, idem à ATPase Na+/K+ mais elle est sélective du Ca2+.
on dit que pompe est électrogénique.
• Son activité, déclenchée par hydrolyse d'ATP, suivie par phosphorylation /
• Composante du potentiel électrique caractérise Mb/cell.vivante (potentiel de Mb)
déphosphorylation d’Asp 351, se traduit par le passage simultané de 2 Ca2+
• À côté de pompe Na+/K+,  pompes ayant fctionnement apparemment + simple
et ne transportant qu’1seul ion à la fois (uniport).
• Exemples les + connus sont ceux des pompes à Ca2+ et des pompes à protons.

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2 mM Ca2+

0,0001mM

Fonction de la pompe Ca2+-ATPase Ca2+-ATPase (pompe à Ca2+)

En savoir + : Fonctionnement de Ca2+-ATPase de la Mb du réticulum sarcoplasmique (SERCA) En savoir + : Fonctionnement de Ca2+-ATPase de la Mb du réticulum sarcoplasmique (SERCA)
C. Toyoshima / Biochimica et Biophysica Acta 1793 (2009) 941–946 C. Toyoshima / Biochimica et Biophysica Acta 1793 (2009) 941–946
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Ex3: Transporteurs ABC : (ou transporteurs à ATP Binding Cassette )

• Très répandus chez tous les EV, des Bactéries à Homme.
• Gde famille d'ATPases (500), transport unidirectionnel : AA, sucres, AG et ions.
• Utilisent hydrolyse d'ATP comme source  pour ce transport et libèrent P et ADP
• Hydrolyse d'ATP*  ce transport mais mécanisme exact de passage solutés ??
• /Mmfères  /Mb plasmique cell. /rein, intestin, foie// détoxification cytoplasme
• Import/export de variété de substrat : ions, mais surtout xénobiotiques
• Pourquoi s’intéresse-t-on à cette famille de transporteur?
• Maladies associées à altération transporteurs ABC: chimiorésistance de certaines
tumeurs due à surexpression de transporteur de famille ABC (MDR1) qui excrète
xénobiotiques
• Modèle de transport par MDR1: fixation, déplacement latéral, « basculement »
(hydrolyse de l’ATP), Déplacement, libération à l’extérieur de la cellule.

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II.2. Co-transporteurs :TA IIaire

• Transport mû par un gdient d’ions
• Co-transporteurs fctionnent avec aide gdient ionique constitué préalablement
(svt Na+ et parfois H+ ou CL-).
• Syst. co-transport//transfert 1er soluté dépend du transfert simultané du 2nd soluté
• Protéines transportent 2molécules ≠ à la fois: molécule transportée/sens du gdient
l’autre molécule transportée à l’encontre de son gdient.
• La 1ère molécule fournit  pour la 2nd qui passe contre son gdient.
• 2 types de co-transporteurs :
 symports vont transporter 2 molécules /même sens
 antiports vont transporter les 2 molécules /un sens opposé.

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Ex1: Co-transport du H+/saccharose:

• Transport actif de H+ : transportés contre leur gdient de [ ] du M. intra vers
M. extra. grâce à la pompe à proton qui utilise  d’hydrolyse d’ATP pour
transporter activement les ions H +.
• Accumulation des H+ /M.extra.  Formation gdient de [ ] et gdient électrique
• Diffusion des ions H+ avec saccharose (symport)

Ex2: Transporteurs de glucose:

• La cellule a 2 façons de transporter le glucose :
 TP effectué par perméases du Glucose
 TA-IIaire // symport Na+-Glucose (SGLT-1, Sodium glucose cotransporter-1).
• Transporteur abondant/épithélium du T. digestif et tubule rénal (néphron).
• Utilise le fort gdient transMbaire de Na+ (mis en place par ATPase Na+/K+) pour
faire pénétrer spécifiquement Glu/cellule avec Rapport de 1Glu pour 1Na+.

41 Exemple du glucose dans l’entérocyte 42

Ex3: Echangeurs Na+/H+ et HCO3-/Cl- :

pH cytoplasmique essentiellement régulé par 2types d'échangeurs :

 1er échange Na+ externe contre H+ interne (Na+/H+ échangeur ou NHE).
Echange effectué par protéines Mbaires (NHE1-5), possible // gdient Na+ activé
par acidification intracellulaire. ( /presque ttes cell Vertébrés,  protéine échangeuse
cations qui intervient pour contrôler pH intracel. Grâce à ce syst. d’échange, excès
interne H+ (métabolisme) supprimé par sortie des protons, couplée à influx de Na +).
 2nd échange HCO3- interne contre Cl- externe (échangeur d'anions //AE2).
Echange rendu possible par gdient de Cl- et est activé par alcalinisation intracellu.
(/ GR Mmfères: protéine la + abondante de leur Mb (dite «bande3», sur gels d’électrophorèse)
est transporteur d’ions dont rôle capital/cadre des échanges gazeux que ces cell. assurent.
CO2 produit par tissus rentre/GR où il est transformé en HCO 3– ; ce dernier en sort grâce
à cet échangeur d’anions qui fait simultanément entrer ion Cl – .
/Poumons, réactions inverses ont lieu : CO2 étant éliminé des GR, ions HCO3– dissous en
gde qtité /plasma entrent /celles-ci, où ils sont à nouveau échangés contre ions Cl –.
Ce processus inverse d’antiport réalisé grâce à la même protéine, dont fctionnement REV)

Echangeurs Na+/H+ et HCO3-/Cl-

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