UNIVERSIDAD NACIONAL AUTNOMA DE MXICO.

FACULTAD DE ESTUDIOS SUPERIORES IZTACALA

EXUDADO FARNGEO
Reporte de Prctica de Laboratorio
Garca Mireles Adrin Uriel, Islas Lpez Lesli Michel,
Maldonado Guadalupe Gabriel, Sanabria Anguiano
Mitzi Elizabeth, Rendn Rosales Mara Fernanda,
Valverde Caldern Diana Fabiola.

GRUPO 2332

Dra. Norma Patricia Chen Escamilla

Dra. Rosa Mara Quintana Aguila

Prof. Samuel Meja Lomel

 PRCTICA DE EXUDADO FARNGEO
UTILIDAD DE LA PRUEBA

Se realizar el exudado farngeo con el objetivo de identificar los microorganismos

presentes en las vas areas superiores, mediante la observacin de sus colonias,
caractersticas en ciertos agentes. Posteriormente se identificar la morfologa del
agente mediante la observacin a microscopio en 10x, 40x, y 100x y su
susceptibilidad a distintos antibiticos.

OBJETIVOS

Realizar un exudado farngeo de forma correcta.

Identificar los microorganismos presentes en el cultivo
Identificar las caractersticas fsicas y morfolgicas de las colonias.
Conocer los microorganismos causantes de las infecciones respiratorias
ms comunes de tipo bacteriano

INTRODUCCIN

El aparato respiratorio o sistema respiratorio consiste en las estructuras que

realizan el intercambio de gases entre la atmsfera y la sangre. Incluye a las vas
respiratorias, pulmones y msculos respiratorios que median en el movimiento del
aire tanto dentro como fuera del cuerpo humano. 1

El aparato o tracto respiratorio est divido anatmicamente en superior (boca,

nariz, fosas nasales, orofaringe, nasofaringe, laringe, trquea y senos
paranasales) e inferior (bronquios, pulmones y unidad respiratoria) as como
algunas estructuras accesorias, es decir, las pleuras y la pared torcica (huesos,
articulaciones y msculos del trax). 1

Es travs del aparato respiratorio que el oxgeno (O2) es introducido dentro del
cuerpo para su posterior distribucin a los tejidos y el dixido de carbono (CO 2)
producido por el metabolismo celular, es eliminado al exterior. Sin embargo no se
limita a ello, tambin interviene en la regulacin del pH corporal, en la proteccin
contra los agentes patgenos y sustancias irritantes y en la vocalizacin (debido a
la vibracin de de las cuerdas vocales). 1
El tracto respiratorio est en contacto directo con el medio ambiente y se
encuentra expuesto continuamente a los microorganismos suspendidos en el aire
que respiramos; Diversos mecanismos no especficos protegen el tracto
respiratorio de las infecciones, entre ellos, se sealan: los pelos, pasaje
contorneado, mucus, inmunoglobulina A secretora y sustancias antibacterianas
como la lisozima presente en las secreciones respiratorias. Los reflejos mecnicos 1
como la tos, el estornudo y la deglucin contribuyen con la eliminacin de agentes
extraos; por otra parte, la microbiota normal de la nasofaringe y orofaringe
previene la colonizacin del tracto respiratorio por microorganismos patgenos. 2

Esto ltimo tiene su origen al nacer, momento en el cual el hombre est libre de
grmenes, pero es rpidamente colonizado por microorganismos, que en su
mayora provienen de la flora normal de otros seres humanos (especialmente de la
madre), y que adquieren por contacto directo o indirecto, o que le llegan por los
alimentos. La flora es especialmente numerosa a nivel de ciertas mucosas (boca,
faringe, intestino, vagina), y con menor representacin en la piel. La flora humana
normal es el conjunto de grmenes que conviven con el husped en estado
normal, sin causarle enfermedad. Su composicin es caracterstica para la especie
humana, tanto en los grmenes que la componen como en su nmero y
distribucin en el organismo. 3

La flora humana normal desde diversos puntos de vista representa un importante

mecanismo de defensa del husped. Contribuye al desarrollo de la respuesta
inmunolgica y ayuda a evitar la colonizacin de la piel o las mucosas por
bacterias que pueden ser patgenas (los grmenes para iniciar la infeccin deben,
en general, comenzar por colonizar los epitelios donde compiten con los
integrantes de la flora por factores tales como receptores celulares y nutrientes). 2

Sin embargo, y aun a pesar de todos los mecanismos defensivos del aparato
respiratorio existen ocasiones en que, sase por causas ambientales o biolgicas,
estos no bastan para evitar enfermarse. 3
Dentro de las infecciones que afectan al gnero humano, las que ocurren en el
tracto respiratorio son las ms frecuentes y de ellas son las infecciones de vas
respiratorias superiores (ITrS) las que originan el mayor nmero de consultas
mdicas, sobre todo en la edad peditrica. Es por ello que hoy da, las infecciones
respiratorias (IRA) constituyen un motivo de frecuente preocupacin dentro del
equipo de salud. 4 2

El 80% de estas infecciones son de etiologa viral, en segundo lugar son

producidas por bacterias y un reducido nmero de casos son de origen mictico.

El 80% de las ITRS son de etiologa viral. El resfriado comn es causado

principalmente por el grupo de los rinovirus y coronavirus. La faringitis aguda en su
gran mayora es causada por rinovirus, adenovirus, parainfluenza y coxsackie.

La causa bacteriana ms frecuente de faringoamigdalitis y, por lo tanto,

susceptible de ser tratada con antimicrobianos es Streptococcus pyogenes,
responsable de 15 a 30% de las faringitis agudas en nios y de 5 a 10% en
adultos. Existen otras bacterias causantes de faringitis, entre stas tenemos a los
Estreptococos beta-hemolticos de los grupos C y G que se han asociado a brotes
epidmicos de faringitis transmitidas por alimentos, a faringitis endmica en
comunidades cerradas donde concurren jvenes y adultos. 5

Otros agentes etiolgicos poco frecuentes lo constituyen: Arcanobacterium

haemolyticum, Yersinia enterocolitica, Franciscella tularensis y Neisseria
gonorrhoeae, esta ltima debe ser considerada entre los jvenes y adultos como
consecuencia del contacto buco-genital. 4
Existen microorganismos que forman parte de la microbiota habitual de la faringe,
algunos participan en la etiologa de infecciones del tracto respiratorio bajo, sin
embargo, no se consideran patgenos en faringoamigdalitis aguda en pacientes
inmunocompetentes; es el caso de H. influenzae, S. pneumoniae, M. catarrhalis y
S. aureus. H. influenzae es un agente causal de faringitis en nios. En pacientes
inmunocomprometidos, se debe informar el hallazgo de Candida sp., bacilos
gramnegativos y S. aureus. Tanto en la sinusitis como en otitis media, entre los 3
microorganismos etiolgicos frecuentemente implicados se seala a: S.
pneumoniae, H. influenzae y, en menor proporcin M. catarrhalis. 5

El diagnstico de las enfermedades infecciosas se realiza sobre la base de los

signos y sntomas clnicos que presenta el paciente, los datos epidemiolgicos y la
demostracin del agente causal o las huellas que ste ha dejado en el sistema
inmunolgico del individuo. El papel del laboratorio de microbiologa clnica
consiste en determinar la presencia de patgenos potenciales en los tejidos, los
lquidos corporales o las secreciones de los pacientes, e identificarlos en caso de
que estn presentes. 3

Este servicio es indispensable para el mdico tratante, porque la informacin

acerca de la identidad del patgeno es de importancia primordial para predecir el
curso de la infeccin y orientar o decidir la conducta teraputica ms apropiada.
Esta informacin puede obtenerse por medio de cuatro formas posibles:
4
El cultivo y la identificacin de los microorganismos a partir de muestras
clnicas.
El examen microscpico de la muestra clnica.
La medicin o cuantificacin de la respuesta inmune especfica para el
patgeno en el paciente.
La deteccin de molculas especficas de los patgenos en las muestras de
los pacientes.

La extensin y la confiabilidad de la informacin que puede proporcionar el

laboratorio varan de acuerdo con la naturaleza del patgeno. Algunos de ellos son
fciles de detectar, cultivar, identificar y caracterizar; otros requieren medidas
extraordinarias tan slo para detectar su presencia. La principal conexin entre el
mdico y el laboratorio de microbiologa clnica es la muestra que se recolecta y se
enva para su procesamiento. Es por ello, que la recoleccin correcta de una
muestra clnica para su cultivo es la etapa ms importante en el aislamiento
exitoso de un microorganismo responsable de una determinada enfermedad
infecciosa. 3

En este rubro podemos encontrar al exudado farngeo, una prueba de laboratorio

que se hace para aislar e identificar organismos que puedan causar una infeccin
en la garganta.

El diagnstico de laboratorio correcto y oportuno depende del cuidado con que se

realice la toma y manejo de la muestra siguiendo a detalle las instrucciones al
respecto. La interpretacin del resultado del laboratorio debe estar apoyada por un
buen diagnstico clnico y los antecedentes epidemiolgicos del caso. 5

La muestra para aislamiento de agentes infecciosos debe ser tomada antes de

instaurar la terapia con antimicrobianos. La muestra debe identificarse incluyendo
todos los datos relevantes del caso: nombre completo o clave, diagnstico
presuntivo, fecha de toma y tipo de muestra. 5
El mdico solicitar esta prueba cuando el paciente presente dolor de garganta y
fiebre que pueda ser debida a una infeccin respiratoria de vas altas. Los
sntomas varan y pueden incluir:

Dolor de garganta.
Fiebre.
Dolor de cabeza.
Amgdalas rojas con puntitos blancos o amarillos en la parte posterior de la
garganta.
Cuello hinchado y blando.
Debilidad.
Prdida de apetito. 5

El estudio del exudado farngeo es importante para el diagnstico de ciertas

infecciones del aparato respiratorio, no obstante el aislamiento e identificacin de
microorganismos patgenos en estas regiones suele presentar algunos problemas
debido a la existencia de una flora normal abundante que incluye
aproximadamente 200 especies, muchas de ellas consideradas oportunistas con
potencial patgeno e incluso patgenos definidos; por lo que el esquema de
aislamiento debe incluir tanto microorganismos gran negativos como gran
positivos, adems de hongos. 2

Para la obtencin de buenos resultados, es recomendable la toma de muestra

antes del inicio del tratamiento antimicrobiano y es de vital importancia la
adecuada toma de la misma, para lo cual se recomienda sea de los sitios que
tengan mayor afectacin como los que presentan enrojecimiento o pus (en el caso
de la orofaringe), tomando precauciones como la de no contaminar la muestra
tocando lengua, labios u otro anexo de la cavidad bucal. 2

La toma de muestra deber realizarse en el laboratorio, pero si no fuera posible,

entonces deben emplearse medios de transporte como el medio Stuart, que
aseguran la viabilidad de los microorganismos hasta que sea posible la siembra en
los medios adecuados. 2

Debe tenerse presente que la importancia de los microorganismos como

responsables de una infeccin est relacionada con su abundancia en el
exudado que se estudia.

Tanto para la confirmacin de gnero como para la identificacin de las principales

especies de importancia clnica, resulta de vital importancia el estudio de las
caractersticas metablicas en los microorganismos a estudiar, lo cual es llamado
con frecuencia estudio bioqumico o pruebas bioqumicas.

Estas pruebas se realizan generalmente en tubo y se eligen a partir de las

caractersticas del microorganismo que se han obtenido de los cultivos en placa y
de las tinciones realizadas de colonias aisladas; comprenden una amplia gama,
dentro de las cuales destacan TSI, SIM, prueba de fermentacin de carbohidratos,
citrato de Simmons y caldo urea. Adicional a las pruebas bioqumicas, suelen
emplearse las llamadas pruebas especiales, que son todas aquellas pruebas que
no necesariamente arrojan informacin sobre el metabolismo del microorganismo,
sino que tambin pueden distinguir un aspecto morfolgico o estructural. 6
Una vez establecida la identidad del microorganismo causal de la enfermedad, es
importante realizar pruebas de susceptibilidad a los diferentes antibiticos, para
as poder brindar al paciente el tratamiento adecuado y evitar que se propague
an ms la resistencia microbiana que ya constituye un serio problema de salud.
Para esta evaluacin, se utilizan discos de papel impregnados con los frmacos
ms comnmente empleados en el tratamiento de enfermedades causadas por
microorganismos Gram positivos y gramnegativos, que tras ser colocados en
medios inoculados masivamente con la cepa en cuestin permiten observar en
pocas horas (24 48 hr) la accin de los frmacos por la formacin de los
llamados halos de inhibicin (espacios sin crecimiento bacteriano), en los que
dependiendo del dimetro se observa la eficacia del frmaco. 6
HIPOTESIS

En el exudado farngeo se encontraran restos celulares de la mucosa farngea y

7
flora bacteriana habitual como: Lactobacilos sp., Espiroquetas sp. , Estreptococos
del grupo viridans entre otros, al realizarse la prueba en un sujeto aparentemente
sano su cultivo no mostrar algn otro patgeno ajeno a esta flora.

MATERIALES

Abate lenguas
Hisopos de algodn.

o Equipo de laboratorio
Mechero de Bunsen
Asa bacteriolgica
Porta-objetos
Microscopio
Pinzas

o Sustancias
Alcohol
Agua
Tren de tincin
Transportador (opcional)

o Material biolgico
Agar sangre

o Equipo de proteccin
Bata
Guantes de ltex
Cubre bocas
METODO

I. Toma de muestra
Se le pide al paciente que abra la boca y bajo visin directa y con
una iluminacin adecuada se procede a tomar la muestra.

Con la ayuda de un abate lenguas, se deprime la lengua con

suavidad y se tocan con el hisopo todas las areas con exudado,
ulceras o inflamacin.
8
Se deben frotar la mucosa por detrs de la vula, entre los pilares
amigdalinos y la faringe posterior tratando de, en lo posible, no tocar
la mucosa oral, lengua, vula, dientes o labios para no diluir o
contaminar la muestra.

Nota: La garganta puede doler al momento del examen e igualmente se

puede experimentar una sensacin de nuseas cuando se toca la parte
posterior de la garganta con el aplicador de algodn.

II. Transporte (Opcional)

En caso de que exista la necesidad de trasladar alguna muestra, el
hisopo debe colocarse, de inmediato en un tubo que contenga algn
medio de transporte para mantener la muestra lo ms cerca posible
de su estado original con un deterioro mnimo. Deben evitarse las
condiciones ambientales adversas, como exposicin al fro o calor
extremos.

Las muestras deben trasladarse o trabajarse lo antes posible. Se

aconseja un lmite de 2 horas entre la recoleccin y la llegada de las
 muestras al laboratorio. Los medios de transporte de Stuart, Amies y
Cary-Blair, son los que se usan con ms frecuencia.

III. Cultivo
El hisopo se hace rodar y se frota en el borde de una placa de Agar
sangre.

Con el asa de alambre se extiende la muestra en la superficie 9

mediante 10 a 20 movimientos de un lado a otro de la placa
(sembrado en estra)

Al final el asa se hunde varias veces en el medio para investigar

hemlisis bajo la superficie (Los cortes en el agar obligan a que parte
del inculo pase bajo la superficie, medio parcialmenmte anaerobio,
y permiten la deteccin de hemolisinas estreptoccicas)

IV. Anlisis del cultivo

Despus de 18 a 24 horas de incubacin la placa se examina por la

presencia de colonias betahemolticas. Los cultivos negativos deben ser
incubados 24 horas adicionales antes de ser descartados.

De la misma forma, se realiza la tincin de Gram de una colonia aislada

obtenida por crecimiento en condiciones aerbicas, en el medio Agar
sangre Para ello:

10
 Con el asa bacteriolgica se toma una colonia y se le coloca
en un porta-objetos. (Se hace un frotis delgado del material a
estudiar)

Se le agrega una gota de agua a la colonia y se le deja secar

Se fija la muestra con el mechero

Se cubre la superficie del frotis con solucin de cristal violeta
por un lapso de un minuto y se enjuaga con agua destilada.

11
 Se cubre la superficie del frotis con Lugol por un lapso de un
minuto para posteriormente enjuagar con agua destilada.

Se coloca la solucin de alcohol- cetona y se enjuaga al

instante

Se cubre el frotis con la solucin de safranina por 30

segundos para finalmente enjuagar y dejar secar al aire.

12
 Se observa al microoscopio a 10, 40 y 100x la colonia, esto con el fin de
determinar la morfologa bacteriana y descartar o confirmar la presencia de
otros microorganismos, como bacilos.

V. Anlisis del cultivo

Se prepara otro cultivo y por medio de unas pinzas metlicas esterilizadas

se deposita en la superficie del medio de cultivo inoculado un disco de
antibiograma realizando una ligera presin para que quede adherids al
mismo.

La placa preparada con el inculo y los antibiticos se invierte y se lleva a

incubar durante 24 horas a 37C. Tras este tiempo, se leen los
resultados midiendo el dimetro de los halos de inhibicin del crecimiento
que aparecen alrededor de los discos de papel. Se valora la efectividad de
los mismos consultando la tabla correspondiente en la que, segn el
antibitico, tenemos la capacidad de difusin en el medio y por tanto, la
medida de halo que corresponder a una bacteria sensible,
moderadamente sensible/de sensibilidad intermedia, o resistente.

RESULTADOS

Observacin de cultivos

10x 40x 100x

Se muestran 3 imgenes de diferentes observaciones al microscopio (a 10, 40 y

100x) respecto a la colonia, en donde se pueden distinguir clulas escamosas y,
principalmente bacterias que son propias de la flora bacteriana bucal y tienen como
caracterstica que son Gram positivas debido a su tincin de color morado azulado.

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Antibiograma

*PE (Penicilina) Resistente

*CF (Cefalotina) Resistente

*AM (Ampicilina) Resistente

*CTX (Ceftriaxona) Resistente

*CXM (Cefuroximsa) Resistente

*DC (Dicloxacilina) Resistente

*E (Eritromicina) Resistente

*PEF (Pefloxacina) Sensible ANALISIS DE

RESULTADOS
*SXT (Sulfametoxazol Trimetroprim) Sensible
Posterior a la
*GE (Gentimicina Intermedio adecuada realizacin
Enterobacteriaceae) del desarrollo de esta
*CAZ (Ceftazidima) Resistente prctica se obtuvo
como resultado que en
*TE (Tetraciclina) Sensible la colonia
anteriormente
analizada se encuentran bacterias de tipo Gram positivo y debido a que estas
fueron obtenidas de la flora bacteriana bucal el riesgo de enfermedades es nulo.
En cuanto al antibiograma lo que ms podemos rescatar es que fueron mnimos
los frmacos sensibles a dicho agente siendo estos PEF (Pefloxacina), SXT
(Sulfametoxazol Trimetroprim) y Te (Tetraciclina).

De acuerdo al trabajo presentado por el investigador Javier Prado M. tenemos que

existe una gran diversidad de microorganismos de tipo bacteriano presentes en la
microbiota normal que no son considerados patgenos, pero, cualquiera de ellos
puede causar enfermedad en individuos con inmunodeficiencias, desordenes
metablicos o tratamientos prolongados con algunos antibiticos, algunos de ellos
son: Staphylococcus epidermidis, Corynebacterium spp, Estreptococos viridans y
del grupo D, Branhamella catharrallis, Klebsiella spp, Proteus spp y Enterobacter
spp; de los cuales el ms comn es Estreptococos viridans. As mismo, se
encuentra tambin la microbiota patgena, en donde la faringe alberga un grupo
de microorganismos considerados patgenos los cuales estn ah generando el
denominado estado de portador sano, es decir, estn en bajo nmero y sin
causar enfermedad, estos son: Streptococcus pneumoniae, Streptococcus
pyogenes, Staphylocuccus aureus, Haemophylus influenzae y parainfluenzae y
Neisseria meningitidis.

Hablando ahora especficamente de Estreptococos viridans, de acuerdo al autor

G. Rodrguez, sabemos que aunque son organismos que forman parte de la flora
normal del tracto respiratorio y digestivo, pueden, bajo determinadas
circunstancias, invadir sitios estriles pudiendo provocar enfermedades graves.
Comparten las caractersticas generales del gnero y se caracterizan por producir
un halo de alfa-hemlisis alrededor de sus colonias. Se aslan de diferentes
procesos patolgicos: caries dental, infecciones quirrgicas, bacteriemias, 14
endocarditis (de la cual es responsable del 50-75% de los casos sobre vlvulas
nativas), abscesos profundos, etc. La mayora de estos son susceptibles a la
penicilina G. 7

CONCLUSIONES

De acuerdo a los resultados obtenidos en la preparacin en fresco, frotis en

tincin de Gram y en el cultivo de la secrecin realizadas con la prueba de
exudado farngeo, se observaron microorganismos que alteran la microbiota
normal.
La hiptesis previamente planteada no se cumple ya que el paciente se
encontraba en un buen estado de salud y por consiguiente solo
encontramos microorganismos de la microbiota normal.
Al realizar el exudado farngeo, se aprendi la tcnica y procedimientos
adecuados para la realizacin de la prueba, as como los cuidados para
obtener de manera adecuada el muestreo, as poder aislar las bacterias
infecciosas presentes en la flora normal y cuidar siempre el rea de trabajo
que todo est limpio y estril. De igual manera aprendimos a identificar la
bacteria que est causando la infeccin y podemos saber cmo combatirla
porque una mal medicacin puede provocar que la bacteria mute
otorgndole una resistencia a un medicamento y resistencia sea transferida
a otras, haciendo ms difcil su erradicacin y dndole una patogenicidad
mayor teniendo que usar otro antibitico que contenga un mayor espectro y
haga un desgaste en el metabolismo del paciente.

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BIBLIOGRAFA
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