INMUNOCROMATOGRAFÍA

Silvia Alejandra Cala Gonzalez-2221417; Andrea Carolina García Arévalo- 2220836; Ángela Sofía Castrillón Soto- 2211261;
Sara Lucía Gutiérrez Portilla- 2220608; Eduar Morales Villamizar- 2221402

INTRODUCCIÓN
La prueba rápida OnSite Chagas Ab Combo es un inmunoensayo
Las pruebas de inmunocromatografía han tomado importancia en cromatográfico de flujo lateral basado en el principio de
el ámbito clínico, debido a que gracias a éstas se puede realizar inmunoensayo indirecto. El casete de prueba consta de una
un diagnóstico rápido de diversas enfermedades infecciosas tales almohadilla de conjugado con proteína A conjugada con oro
como sífilis, hepatitis, malaria, Chagas, rotavirus, influenza, coloidal, una banda T pre-recubierta con antígenos
entre otras, a través de la detección de antígenos en diversos recombinantes de Trypanosoma cruzi, y una banda C
líquidos biológicos. [1,2] pre-recubierta con anticuerpos anti-Proteína A. Si se presentan
anticuerpos IgG contra T. cruzi en la muestra, éstos se unen a los
Esta técnica inmunológica permite visualizar la reacción
conjugados de Proteína A. Luego el inmunocomplejo es
antígeno-anticuerpo por la acumulación del oro coloidal del
capturado en la membrana por los antígenos pre-recubiertos con
conjugado (formado por un anticuerpo específico contra uno de
T. cruzi, formando una banda T de color borgoña, indicando un
los epítopos del antígeno a detectar y el oro coloidal como
resultado positivo para Chagas Ab. [4]
reactivo de detección), en zonas específicas del papel de
nitrocelulosa donde se fijan previamente anticuerpos de captura La prueba Bioline™ Influenza Antigen es un inmunoensayo
específicos al antígeno que se quiere determinar. [2] cromatográfico para la detección diferencial y cualitativa de
antígenos del virus de la gripe de los tipos A y B directamente de
Si la muestra contiene el antígeno problema, éste se unirá al
hisopos nasales, faríngeos o nasofaríngeos o de muestras
conjugado y migrará a través de la membrana de nitrocelulosa
aspiradas nasales o nasofaríngeas. La muestra se trata con un
hasta llegar a la zona de prueba donde se encuentra el anticuerpo
tampón diluyente. Cuando la muestra extraída fluye a través de
específico de captura. Al llegar la muestra a esta zona, los
las tiras las partículas migran. En el caso de una muestra
complejos formados por la unión del antígeno y conjugado
positiva, los anticuerpos presentes en las partículas reaccionan
quedarán retenidos y la línea se coloreará (muestras positivas).
con el antígeno del virus, formando un complejo
En el caso contrario las muestras son negativas. La zona control
partícula-antígeno que, a su vez, será retenido en la membrana
está formada por un tercer anticuerpo que reconoce al reactivo
por otros anticuerpos específicos para dicho antígeno.
de detección. Cuando el resto de muestra alcanza esta zona, el
Dependiendo del virus contenido en la muestra, es decir, si se
anticuerpo se unirá al conjugado libre que no ha quedado
detecta influenza A o B serán visibles diferentes líneas de color
retenido en la zona de captura, coloreando de color rosa. Esta
(A, B y C como control). [5]
línea se colorea siempre. [3]
El inmunoensayo cromatográfico Rota-Adeno es un
En este informe se muestran los resultados de distintas pruebas
procedimiento para la detección cualitativa in vitro de antígenos
de inmunocromatografía con el fin de determinar la presencia o
de Rotavirus y Adenovirus en la materia fecal humana. El test
ausencia de la enfermedad del Chagas, influenza y rotavirus de
está basado en la captura inmunológica de micropartículas
distintos pacientes.
coloreadas durante su paso a través de una membrana sobre la
que se ha inmovilizado el anticuerpo monoclonal. El test
Rota-Adeno utiliza una combinación de anticuerpos
monoclonales contra el antígeno VP6 del grupo A de rotavirus, 6. Se esperó entre 1 y 15 minutos para obtener la
conjugados a partículas de látex rojas, y anticuerpos confirmación de la prueba ya sea un resultado positivo
monoclonales específicos para rotavirus en la membrana. o negativo.
Anticuerpos monoclonales contra el antígeno hexon de Prueba de Influenza tipo A & B
adenovirus (presente en todos los subtipos de adenovirus), 1. Se tomó 300µL de diluyente para ensayo y se colocó en
conjugados a partículas de látex azules y anticuerpos un tubo de ensayo.
monoclonales específicos para adenovirus en la membrana. 2. Con un isopo se prosiguió a introducirlo por el orificio
Adenovirus es positivo si se visualiza línea azul, rotavirus si se nasal hasta sentir un tope y se viro suavemente.
ve roja, Rotavirus y adenovirus si se ven ambas. La línea de 3. El hisopo se extrajo del orificio nasal y se llevó a el
control es verde. [6] tubo de ensayo con diluyente.
4. Se agito el isopo tipo molinillo para que la muestra
OBJETIVOS
tomada del paciente se homogenice con el diluyente de
ensayo, seguido de ello se retiró el isopo de el tuyo de
● Comprender el funcionamiento de las distintas pruebas
ensayo
de inmunocromatografía.
5. Se abrió la bolsa donde se encontraba la tirilla de la
● Realizar diversas pruebas de inmunocromatografía para
prueba y se prosiguió a introducirla en el tubo de
la determinación de la presencia o ausencia de algunas
ensayo por la parte donde se encuentran las flechas
enfermedades infecciosas.
apuntando.
● Reconocer la importancia de la realización de las
6. Se esperó entre 10 y 15 minutos para realizar la lectura
pruebas inmunocromatográficas.
de los resultados.
METODOLOGÍA Prueba para detección de Rotavirus/Adenovirus
En esta práctica de laboratorio se realizaron 3 pruebas de 1. Con un palillo se toman 50 mg de la muestra de materia
inmunocromatografía utilizando el suero de un paciente para la fecal aproximadamente.
prueba de detección de chagas, la secreción naso faringe para la 2. Se pipeteo 1ml de buffer de extracción en un tubo de
prueba de detección e Influenza tipo A y B, y materia fecal para ensayo
la prueba de detección de Rotavirus/Adenovirus; los 3. se llevó los 50 mg de heces a el tubo de ensayo para
procedimientos se listan a continuación: homogeneizar con el buffer
4. Se dejo sedimentar la suspensión de heces durante 3
Prueba de detección de chagas: minutos
1. Se tomó una muestra de sangre del paciente. 5. Se saco el casette de la bolsa plástica y se pipeteo 200
2. La muestra de sangre se llevó a la centrifuga para µL del sobrenadante claro en el orificio circular de
obtener el suero del paciente entrada del cassette
3. Se abrió la bolsa por la muesca donde se encontraba la 6. Se esperó 5 minutos para realizar la lectura de resultado
prueba y se prosiguió a colocarla en una superficie RESULTADOS
plana Tabla 1. Resultados generales pruebas rápidas de
4. Se tomo 50 µL de suero del paciente y depositaron en la inmunocromatografía.
en el pozo de la muestra
5. Se colocó una gota de diluyente de muestra en el pozo
de muestra
Prueba para detección de Chagas cardíacos como: arritmia severa, corazón agrandado, problemas
Figura 1. Prueba rápida en Casete OnSite para Chagas Ab digestivos y mayor posibilidad de derrame cerebral [7].
Combo. Fabricada por CTK Biotech, Inc.
Prueba para detección de Influenza Tipo A & B
Como se puede ver en la figura 2, la prueba finalizada dio como
un resultado Negativo/ no reactivo, este ensayo
inmunocromatográfico entonces quiere decir que no evidenció

Reporte: Negativo/ No reactivo proteínas específicas de la influenza A o B en la muestra

analizada, en su caso una muestra nasofaríngea; la única banda

Prueba para detección de Influenza Tipo A & B presente en la interpretación de resultados es la destinada al

Figura 2. Prueba de un solo paso para detectar antígeno de control, indicando el correcto funcionamiento de la prueba

influenza tipo A & B. Fabricado por Standard diagnostics, Inc. independientemente de su resultado; en el caso de que la prueba
denote ser positiva las proteínas de la influenza estarían
presentes en la muestra, uniéndose a los anticuerpos en la tira y
producirían una señal visible.
Reporte: Negativo/ No reactivo
Los resultados de la prueba del antígeno de la influenza deben
interpretarse en el contexto de la situación clínica y junto con
Prueba para detección de Rotavirus/Adenovirus
otros signos y síntomas de enfermedad, como fiebre, tos, dolor
Figura 3. Prueba rápida para la detección de
de cabeza, mialgia y fatiga. [8]
Rotavirus/Adenovirus Combi (N1003)

Prueba para detección de Rotavirus/Adenovirus

Este kit de inmunocromatografía rápida se utilizó para la
detección de rotavirus/adenovirus revelando la presencia de
Reporte: Negativo/ No reactivo antígenos específicos de rotavirus y adenovirus en una muestra
de heces humanas, asignadas en el laboratorio; se utilizan
DISCUSIÓN anticuerpos monoclonales específicos para el rotavirus que se
Prueba para detección de Chagas unen a los antígenos presentes en la muestra. Si se detectan los
En la prueba para detección cualitativa de anticuerpo IgG para antígenos de rotavirus, se produce una reacción que se visualiza
Trypanosoma cruzi enfermedad de Chagas se obtuvo un en la tira de prueba como una línea coloreada.
resultado Negativo/No reactivo. Indicado por la línea C El resultado Negativo/ no reactivo como lo muestra la figura 3
coloreada y ausencia de coloración de la línea T, lo que significa denota que no se efectuó la presencia del antígeno, esto solo se
que no hay presencia detectable de anticuerpos anti-T Cruzi en la utiliza como herramienta diagnóstica más no como análisis
muestra estudiada. Por otro lado, un resultado positivo estaría definitivo de una posible infección gastrointestinal. El rotavirus
indicado por la presencia de coloración en la línea C y T, y el adenovirus son dos virus que pueden causar gastroenteritis,
reflejando la presencia de anticuerpos anti-T Cruzi en la muestra una inflamación del estómago y los intestinos que puede
del paciente. Un paciente con la enfermedad de chagas al inicio provocar diarrea, vómitos, fiebre y dolor abdominal. Estos virus
de la infección puede presentar síntomas leves, como: fiebre, son muy contagiosos y se transmiten principalmente por
fatiga, dolor de cabeza, dolor de cuerpo, pérdida del apetito, contacto con las heces infectadas. [9]
vómito, diarrea, párpado hinchado. Generalmente, estos
primeros síntomas desaparecen, pero en caso de que no se trate
la infección esta puede causar graves problemas intestinales y
CONCLUSIONES simultánea de Rotavirus y Adenovirus en heces (2020).
En las pruebas realizadas, se obtuvieron resultados negativos o https://www.monlab.es/document/Muestras%20fecales/
no reactivos, lo que sugiere la ausencia de los antígenos IFU%20rota-adenovirus%20monlabtest.pdf
buscados en las muestras analizadas. Es importante tener en [7] Enfermedad de Chagas. (s.f.). MedlinePlus.
cuenta que estas pruebas inmunocromatográficas son útiles para https://medlineplus.gov/spanish/chagasdisease.html#:~:
un diagnóstico rápido, pero los resultados deben interpretarse en text=%C2%BFQu%C3%A9%20es%20la%20enfermed
el contexto clínico y considerarse junto con otros signos y ad%20de
síntomas de la enfermedad. [8] Centro de control y prevención de enfermedades(2021).
Rapid Influenza Diagnostic Tests (RIDTs). Recuperado
el 06 de mayo de 2023, de
REFERENCIAS
https://www.cdc.gov/flu/professionals/diagnosis/rapidcl
[1] Escalante A, H., Huamanchay C, O., & Davelois A, K.
in.htm
(2001). La inmunocromatografía para el diagnóstico de
[9]World Health Organization (WHO). (2009). Manual para el
la infección por Taenia solium en Mesocricetus auratus
diagnóstico virológico de las infecciones
mediante la detección de coproantígenos*. Revista
gastrointestinales. Recuperado de
Peruana de Medicina Experimental Y Salud Pública,
https://apps.who.int/iris/bitstream/handle/10665/70156/
18(3-4), 57–62.
WHO_IVB_08.17_spa.pdf?sequence=1
http://www.scielo.org.pe/scielo.php?script=sci_arttext&
pid=S1726-46342001000200002#:~:text=La%20inmun
ocromatograf%C3%ADa%20es%20una%20t%C3%A9
cnica
[2] Acosta M, E., Fernández M, J., & De Guillén Y. (s.f.).
DESARROLLO Y EVALUACION DE UNA PRUEBA
INMUNOCROMATOGRAFICA PARA EL
DIAGNOSTICO DE LA INFECCION CON
Trypanosoma cruzi
https://www.conacyt.gov.py/sites/default/files/TES-BN-
012.pdf
[3] Carreón R,. & Rodríguez R, Y. (2020, 1 de julio). Las
pruebas rapidas y el diagnostico. BM Editores.
https://bmeditores.mx/porcicultura/las-pruebas-rapidas-
y-el-diagnostico/
[4] Prueba Rápida en Casete OnSite Chagas Ab Combo (Suero /
Plasma / Sangre Total). Biolore. (s.f.).
http://biolore.com.co/wp-content/uploads/2019/08/Inser
to-R0171C-Chagas.pdf
[5] SIMPLE RsV-Flu A + B. Operon. (s.f.).
https://operondx.com/wp-content/uploads/pdf/0905162
_RSV-Flu%20A+B_web.pdf
[6] ROTA-ADENO MonlabTest® MO-804005 20 PRUEBAS
Test inmunocromatográfico para la detección