Determinacion de DU 5

DETERMINACION DU
TLC: MA. CRISTINA LEAL SANTIAGO

OBJETIVO
Determinar la presencia del antígeno Du, que es la expresión
débil del antígeno D.
FUNDAMENTO
El antígeno Du es una variante débil del antígeno D que tiene enfoque desde
el punto de vista transfusional. Este antígeno aglutina débilmente o no
aglutina con los anticuerpos Anti-D habituales y, por tanto, es posible
clasificar equivocadamente al portador de este antígeno como RH negativo.
El factor Rh es una clase de proteína que se encuentra en los glóbulos rojos de la sangre,
cuando alguien tiene esa proteína se le considera “Rh Positivo”. Cuando no la tiene es “Rh
Negativo”. El factor Rh es hereditario " se transmite en dos genes. El factor Rh positivo es
dominante, es decir si una persona tiene un gen positivo " otro negativo, su factor Rh será
positivo.
El termino DU se refiere a la expresión débil del antígeno D normal , es decir la menor
concentración de antígeno D por GR. Todo donante encontrado como DU positivo
se identifica con Rh D positivo.
En la evaluación del DU se usa anti D en la prueba antiglobilinica directa.
 La determinación de grupos sanguíneos del sistema Rh se efectúa
enfrentando glóbulos rojos problema con anticuerpos de
especificidad conocida.
 El antígeno D es altamente inmunogénico, lo cual le confiere la
característica de ser el de mayor importancia clínica después de
los antígenos del sistema ABO.
 Se estima que entre 30-85 % de las personas Rh D negativo que
reciben una transfusión Rh D positivo producen anticuerpos anti-D
causantes de enfermedad hemolítica fetoneonatal (en el caso de
embarazadas), anemias hemolíticas autoinmunes y reacciones
transfusionales.
Determinación del antígeno D débil (Du) en tubo
❑ La detección del antígeno Du debe realizarse siempre que se obtenga una

aglutinación negativa para el Anti-D, ya que este antígeno, aunque se una
al Anti-D, no produce aglutinación.
❑ Los hematíes que se han enfrentado al Anti-D se lavan y se incuban con
antiglobulina humana (suero de Coombs). Si había Anti-D unido a los
hematíes, la antiglobulina produce la aglutinación e indica la presencia del
antígeno Du en la membrana de los hematíes. Si hay aglutinación la
sangre se clasifica como RH positivo variante débil.
PROCEDIEMIENTO
▪ Rotular dos tubos por muestra con su número correspondiente y marcar uno con la
letra D y otro como Control Negativo.
▪ Depositar dos gotas de suero Anti-D en el tubo marcado con la letra D y dos gotas
de control negativo en el marcado como CN.
▪ Añadir a cada tubo una gota de suspensión de hematíes de la muestra
correspondiente(Glóbulos rojos lavados ) y mezclar.
▪ Incubar a 37ºC durante 30 minutos.
▪ Centrifugar 2 minutos a 2000 rpm.
▪ Resuspender el botón celular y observar si existe aglutinación en alguno de los dos
tubos.
▪ Lavar los hematíes tres veces con suero salino fisiológico, centrifugando 2 minutos
a 2000 rpm. Decantar totalmente la solución salina, sobre todo en el último lavado.
▪ Añadir a cada tubo 2 gotas de antiglobulina humana (suero de Coombs) y mezclar
con el botón celular.
▪ Centrifugar 2 minutos a 2000 rpm.
▪ Resuspender el botón celular y observar la posible presencia de aglutinación
macroscópica y microscópicamente.
▪ Si no hay aglutinación en ninguno de los tubos se añade a cada tubo una gota de
control de Coombs. Si la técnica se ha hecho bien tienen que aglutinar los dos
tubos al depositar el control de Coombs.
Interpretación de los resultados
❖ La observación de aglutinación indica presencia del antígeno D; la reacción es
positiva y el individuo será clasificado como Rh positivo.
❖ La aglutinación de los glóbulos rojos en estudio con el reactivo anti-D por la
prueba antiglobulina indirecta para D débil, indica que los glóbulos pertenecen a
la variedad D débil (siempre que los glóbulos rojos resulten Coombs directo
negativo). La no aglutinación con el reactivo Anti-D en la prueba antiglobulina
indirecta para D débil indica ausencia del correspondiente antígeno; la reacción
es negativa y el individuo será clasificado como Rh negativo.

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❑ La detección del antígeno Du debe realizarse siempre que se obtenga una

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