Aislamiento de Compuestos Bioactivos de Lippia Graveolens

AISLAMIENTO DE COMPUESTOS BIOACTIVOS DE Lippia Graveolens
Mendoza Das S. y Mora Mora M.E.

Facultad de Ciencias Qumicas/ Centro de Investigacin y Estudios de Posgrado
Universidad Autnoma de Quertaro
RESUMEN
Un extracto butanlico del organo (lippia graveolens) proveniente de Puebla se analiz por
medio de cromatoplacas, con la finalidad de saber si se podan separar los compuestos de
dicho extracto. Cabe mencionar que el extracto ya ha sido objeto de estudio y se demostr
que este posee propiedades antioxidantes y antimicrobianas, de ah la intencin de tratar de
separar los compuestos responsables de estas propiedades.
Mediante los anlisis practicados al extracto en cromatoplacas se determin un sistema de
disolventes en el cual s poda haber separacin de compuestos, por lo que se procedi a usar el
cromatgrafo de lquidos para as obtener compuestos puros.
En el cromatgrafo de lquidos a su vez se probaron distintos sistemas de disolventes para
encontrar el ms apropiado para la separacin, esto se hizo en columnas analticas. Una vez
determinadas las condiciones ideales de separacin y probado la obtencin de compuestos puros,
se procedi a utilizar una columna preparativa para obtener la mayor cantidad del compuesto
puro.
Los cromatogramas muestran el aislamiento de compuestos puros (dos), por lo que se cumpli
con el objetivo.
INTRODUCCIN
Organo es el nombre comn para ms de sesenta especies de plantas con aroma y sabor
caractersticos. La mayora pertenece a las familias Lamiaceae, gnero Origanum y Verbenaceae
gnero Lippia. El organo europeo corresponde a Origanum sp. y el mexicano a Lippia sp.
Dentro de los organos comercialmente ms conocidos se encuentran el O. vulgare (organo
griego), O. Onites (organo turco) L. graveolens y L.berlandieri (organo mexicano) (Kintzios,
2002).
Lippia graveolens es la especie de organo ms comercializada en Mxico, desde la antigedad
Lippia graveolens se ha utilizado como condimento y hierba curativa y sigue dicho patrn en la
actualidad.
En cuanto a estudios taxonmicos sobre el organo, los trabajos que se han llevado a cabo han
sido en su mayora sobre el recurso silvestre, casi todos relacionados con aspectos de inventario,
rendimiento de hoja seca, as como modelos para cuantificar y predecir la produccin (Vzquez,
1991)
Se ha determinado que los flavonoides (compuestos fenlicos) son los compuestos que ms
abundan en Lippia graveolens (Martnez, 2004). Un punto de inters en los compuestos fenlicos
es su propiedad de evitar o retardar la oxidacin lipdica (unin del oxgeno a los lpidos
formando radicales libres que provocan alteraciones qumicas). La oxidacin de lpidos puede
jugar un papel importante in vivo ya que interviene en enfermedades del corazn, arteriosclerosis,
cncer y en el proceso de envejecimiento (Jadhav y col., 1996).
Considerando que en los ltimos aos el organo europeo ha desplazado al organo mexicano en
el mercado internacional, un estudio sistemtico y multidisciplinario de Lippia graveolens podra
conferirle un valor agregado, adems de abrir la posibilidad de comercializar no slo las hojas o
el aceite esencial sino tambin productos derivados de los extractos polares.
DESARROLLO EXPERIMENTAL
Cromatografa en capa fina
Con capilares se tom una pequea muestra del extracto de Lippia graveolens y se aplic en la
cromatoplaca. La cromatoplaca se coloc dentro de una cmara de vidrio a la cual se le
adicionaron previamente una mezcla de solventes dependiendo de las caractersticas polares de la
muestra (el solvente no deba tocar los puntos de aplicacin para evitar disolucin de la muestra),
posteriormente la placa se eluy, se retiro y se sec. Despus se revel con luz ultravioleta y
sulfato crico (al revelar con sulfato crico se requiere calentamiento de la cromatoplaca en una
parrilla).
Purificacin de los principios activos
La separacin de los constituyentes individuales de las fracciones activas se realizar utilizando
cromatografa de lquidos de alta eficiencia (HPLC). El primer paso ser un ensayo con
columnas analticas y una vez encontradas las condiciones ideales se utilizarn columnas
preparativas para aislar los compuestos obtenidos.
La pureza de los compuestos se verificar mediante cromatografa en capa fina.
DISCUSIN DE RESULTADOS
En anlisis cromatogrfico se observan tres elementos, el primero la fraccin butanlica del
extracto de organo (F4), donde se ve la existencia de dos compuestos dentro de esa fraccin,
tambin se ve el pico nueve (P9), una sola mancha, lo que indica un compuesto puro, y por
ltimo, el pico diez (P10) el otro compuesto puro que se logr obtener (figura 1).
Figura 1
El cromatograma (figura 2) muestra claramente la separacin de dos picos(los dos ms grandes),
de los cuales el de mayor longitud (pico 9) tuvo un tiempo de retencin de 22.3 minutos, mientras
que el pico 10 tuvo un tiempo de retencin de 23.7 minutos, el hecho de que se distingan dos
picos bien definidos indica que se lograron separar dos compuestos puros, cada uno se recolect
en un matraz erlenmeyer distinto.
Figura 2
CONCLUSIONES
A travs de varios ensayos por intentar separar uno o ms compuestos puros del extracto
butanlico de Lippia graveolens (organo), se lograron obtener dos, dicho resultado se verific
con dos tcnicas apropiadas en la distincin de compuestos puros de impuros, las cuales fueron
cromatografa en capa fina y cromatografa de lquidos, por lo que la veracidad en la obtencin de
dos compuestos puros se respalda en los anlisis de las dos tcnicas cromatogrficas.
Con el aislamiento de compuestos bioactivos se brinda la oportunidad para que sea identificada la
estructura de estos, el hecho de conocer su estructura permite compararla con la de compuestos
ya conocidos que poseen propiedades antioxidantes y antimicrobianas. Una vez realizados dichos
ensayos y obtenido resultados positivos se tendrn dos puntos importantes: el primero la
obtencin de dos estructuras (con propiedades antioxidantes y antimicrobianas) que permitan
compararlas con las ya conocidas y en caso de ser distintas se abrir un nuevo punto de
investigacin, y el segundo ser conferirle un valor agregado al organo, con la finalidad de
lograr un mayor consumo y por lo tanto una mayor comercializacin.
BIBLIOGRAFA
Jadhav, S.; Nimbalkar S.S.; Kulkarni A.D.; Madhavi D.L.. In Food Antioxidants. 1a edicin. Ed.
Dekker. New York: 5-10. 1996
Kintzios S.E.. Profile of the multifaceted prince of the herbs. 1a edicin Ed. Spiridon. USA: 2-8.
2002
Martinez Rocha, A.. Determinacin de compuestos fenlicos y actividad antioxidante de Lippia
graveolens (verbenaceae) procedentes de los estados de Quertaro, Puebla y Guanajuato.
Universidad Autnoma de Quertaro. Tesis para obtener el ttulo de Licenciado en Biologa. 2004
Vzquez, Cota J.. Propagacin vegetativa de organo por medio de enraizamiento de estacas.
Estado actual del conocimiento sobre el Organo en Mxico.Documento Presentado en la
Primera Reunin Nacional sobre Organo. INIFAP-CIFAP-B.C.S. Academia Nacional de
Ciencias Forestales. Ed. Melndez. Bermejillo, Dgo.,.. Mxico: 41-42.1991

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